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目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在高低转移对的乳腺癌细胞的表达及其意义。方法:分别采用半定量RT-PCR,蛋白免疫印迹法和细胞免疫荧光方法检测GRP78在三种不同乳腺癌细胞株(MDA-MB-231、435S和MCF-7)的mRNA蛋白表达及其亚细胞定位情况,结果:GRP78mRNA和蛋白在(MDA-MB-231细胞的表达最高,其次为(MDA-MB-435S,在MCF-7的表达最低;共聚焦显微镜下观察到GRP78蛋白主要定位在细胞浆,在细胞膜以及细胞核内也有少量的表达,,结论:GRit/8是乳腺癌的一个促癌基因,在乳腺癌的发生、发展过程中发挥着重要作用,其可作为抗乳腺腺癌治疗的一个新的分子靶点。 相似文献
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可溶性VEGF受体-3原核表达载体的构建与蛋白表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的克隆并原核表达可溶性血管内皮细胞生长因子受体-3(sVEGFR-3),用于受体阻断剂的筛选及制备。方法利用RT—PCR技术从人胎盘组织中扩增VEGFR-3胞外Ⅰ-Ⅲ区cDNA片段,通过基因重组技术将该片段克隆至原核表达载体PTrcHis A中,连接产物转化大肠杆菌TOP10,IPTG诱导融合蛋白表达,纯化获得可溶性受体。结果成功构建表达栽体,经IPTG诱导获得大量稳定表达的sVEGFR-3融合蛋白,纯化后获得纯度达到80%以上的可溶性受体。结论大量可溶性VEGFR-3的获得有助于进一步探索肿瘤淋巴道转移的靶向性治疗方案。 相似文献
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目的:检测特异性封闭高度恶性人卵巢癌细胞株Sw626、A2780中畸胎瘤源性生长因子(PC -cell -devivedGrowthFactor,PCDGF)的表达,并观察其对增殖能力的抑制效应。方法:用RT -PCR技术扩增PCDGF基因cDNA保守序列,经pGEM -TEasy载体克隆后双酶切,反向插入哺乳动物真核表达载体pcDNA3 1 ( +)构建反义PCDGF核酸载体。并通过脂质体转染法转染人卵巢癌细胞株Sw626、A2780,用RT- PCR和Westernblot技术检测转染前后PCDGFmRNA和蛋白的表达,MTT实验检测其增殖能力的变化。结果:PCDGF反义核酸载体转染株的mRNA和蛋白水平明显低于对照组,Sw626的抑制率分别为50%、72%;A2780分别为53%、70%。同时增殖能力亦明显降低,其抑制率Sw626及A2780分别为71%、73%。结论:PCDGF反义核酸在高度恶性人卵巢癌细胞株Sw626及A2780中起了特异性封闭作用。为进一步研究PCDGF的分子生物学特性、致瘤机理及今后利用反义PCDGF核酸载体治疗卵巢癌提供了实验和理论模型。 相似文献
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43例高龄人工股骨头置换术患者的康复护理 总被引:1,自引:1,他引:0
股骨颈骨折是老年人常见的损伤.一般股骨颈骨折不易愈合者在15%左右[1],而股骨头坏死的发生率高达20%~30%[2].老年人大多伴有慢性疾病,如高血压、糖尿病、肺气肿等,整体免疫水平降低.因此,术后易发生各种并发症.我院2002~2007 年收治43例高龄人工股骨头置换手术患者,护理体会报告如下. 相似文献
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目的 :探讨二肽基肽酶(DDPⅣ)对前列腺癌细胞1E8侵袭、转移的影响。 方法 :用亚克隆技术构建DDPⅣ基因反义真核表达质粒,脂质体法将其分别转入高转移潜能的人前列腺癌细胞1E8,并应用脂质体介导的基因转摘要 目的 :探讨二肽基肽酶(DDPⅣ)对前列腺癌细胞1E8侵袭、转移的影响。 方法 :用亚克隆技术构建DDP染技术,将重组质粒导入1E8细胞中,应用细胞增殖抑制试验(CCK-8)、蛋白印迹和体外侵袭实验等方法观察了1E8细胞转染前后,细胞生长、DDPⅣ蛋白表达以及细胞体外侵袭能力等指标的变化。 结果 :成功构建了反义DDPⅣ真核表达载体;将其转染入1E8细胞36h、48h后,反义DDPⅣ基因对前列腺癌细胞的侵袭和转移有促进作用;DDPⅣ基因表达下调能使1E8细胞的体内外侵袭能力增强。 结论 :DDPⅣ是前列腺癌的一个抑癌基因,在前列癌的侵袭转移过程中发挥着重要作用,下调DDPⅣ基因表达能明显促进前列腺癌细胞的侵袭和转移能力。提示DDPⅣ可作为前列腺癌抗侵袭治疗的分子靶点。 相似文献
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骨桥蛋白、CD44v6在宫颈癌组织中的表达及其临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨宫颈癌组织中骨桥蛋白(OPN)和CD44v6的表达与临床分期、淋巴结转移的关系。方法 采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)方法,检测骨桥蛋白和CD44v6蛋白在40例宫颈癌、38例宫颈上皮内瘤变(CIN)、10例正常宫颈组织中的表达情况。结果 宫颈癌组织中骨桥蛋白(OPN)和CD44v6的阳性表达率分别为70%和60%,高于宫颈上皮内瘤变(CIN)和正常宫颈组织,差异有统计学意义(P〈0.05);且两者的表达呈正相关。在不同临床分期和组织学类型及组织学分级中骨桥蛋白和CD44v6表达差异无统计学意义;二者在有淋巴结转移的宫颈癌组织中阳性表达率分别为84%和76%,高于无淋巴结转移组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 骨桥蛋白和CD44v6的表达与宫颈癌的发生发展及侵袭转移相关,且二者有协同作用(rs=0.74),在高表达骨桥蛋白的宫颈癌组织中CD44v6的表达也较高,其联合检测可作为判断宫颈癌恶性程度、评价预后及指导治疗的一项评估指标。 相似文献