铜绿假单胞菌中整合子的分布及其可转移耐药性研究

目的 研究淮北地区Ⅰ类、Ⅱ类整合子在多重耐药铜绿假单胞菌(PA)中分布及其可转移耐药情况.方法 用聚合酶链反应(PCR)技术榆测多重耐药菌中整合子基因,并对整合酶基因阳性菌株进行转移接合试验;采用K-B法对接合转移成功菌株及接合子进行13种药物敏感试验.结果 多重耐药铜绿假单胞菌中Ⅰ类整合子检出率为86.1%,未检出Ⅱ类整合子,含整合酶基因的接合子在转移成功接合子中所占比率为35.7%.结论 淮北地区铜绿假单胞菌中整合子的分布以Ⅰ类整合子为主,且水平传播率达到35.7%,应引起高度重视.     

65株铜绿假单胞菌诱导酶及药敏检测结果分析

探讨铜绿假单胞菌诱导酶的产生及对8 种抗生素的耐药情况.方法:药敏试验采用K-B法,诱导酶检测采用纸片法.结果:43.1%的铜绿假单胞菌产诱导酶.产诱导酶株组对第三代头孢菌素及哌拉西林、阿米卡星、氨曲南耐药率均低于非产诱导酶株组(P＜0.005),对环丙沙星的耐药率两者差异无显著性(P＞0.05),对亚胺培南的耐药率产诱导酶株组高于非产诱导酶株组(P＜0.05).结论:诱导酶的检测能补充常规药敏试验的不足.     

碳青霉烯类抗菌药物耐药的大肠埃希菌KPC酶检测与分析

大肠埃希菌是医院内感染和社区获得性感染的重要病原菌,其耐药性十分严重.我们在我院分离的一株碳青霉烯类抗菌药物耐药的大肠埃希菌E902774的耐药机制研究中存在A类碳青霉烯酶KPC(肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶)-2酶.     

淮北地区多重耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类、β-内酰胺类抗生素耐药相关基因研究

目的调查淮北地区临床分离多重耐药铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa PA）的氨基糖苷类、β-内酰胺类耐药相关基因流行状况。方法采用K—B法和MIC法检测36株多重耐药铜绿假单胞菌对14种临床常用抗生素的耐药性：聚合酶链反应（PCR）检测氨基糖苷类修饰酶基因、β-内酰胺酶编码基因和外膜通道蛋白OprD2基因。结果36株铜绿假单胞菌对14种抗菌药物的耐药率为38．9％-100．0％;氨基糖苷类修饰酶基因ant（3″）-Ⅰ、aac（6′）Ⅱ、aac（6′）-Ⅰ、aac（3）-Ⅱ、antf（2″）-Ⅰ检出率分别为63．9％、58．3％、50．0％、38．9％和36．1％,未检出aac（3）-Ⅰ基因;β-内酰胺酶编码基因’rEM、DHA、CTX-Ge和CARB的检出率分别为77．8％、69．2％、27．8％和25．0％,OXA-1、OXA-10的检出率均为16．7％,VIM-2的检出率为13．9％。IMP—1的检出率为2．8％,未检出VEB、SHV、GES、PER、GIM和SPM-2基因．有58.3％的菌株存在外膜通道蛋白OprD2基因缺失。结论淮北地区多重耐药铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗生索的耐药主要与氨基糖苷类修饰酶基因ant（3″）-Ⅰ、aac（6′）Ⅱ、aac（6′）-Ⅰ有关：对β-内酰胺类抗生索耐药主要与TEM、DHA、CTX-Ge、CARB及外膜通道蛋白OprD2基因缺失有关。     

重症监护病房耐亚胺培南肺炎克雷伯菌耐药基因检测

目的:对重症监护病房(ICU)出现的13株耐亚胺培南肺炎克雷伯菌的分子流行病学及耐药机制进行研究。方法:从ICU分离到13株对亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌,采用琼脂稀释法检测包括亚胺培南在内的5种抗菌药物最低抑菌浓度(MIC);用聚合酶链反应(PCR)及耐药基因克隆测序方法研究细菌的耐药机制;用肠杆菌基因间重复性一致性序列-PCR分析菌株的分子流行病学。结果:13株肺炎克雷伯菌亚胺培南的MIC为16～1 024μg/ml;13株实验菌PCR产物克隆测序分析比对为blaKPC-2型和blaSHV型基因。结论:ICU连续出现13株耐亚胺培南肺炎克雷伯菌,KPC-2是引起细菌对亚胺培南耐药的主要原因,SHV型β-内酰胺酶同时参与多重耐药机制。     

银染法鉴定铜绿假单胞菌生物膜

目的:观察银染法鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)生物膜的效果。方法:体外平板法制备PA生物膜模型,用银染法及扫描电镜进行观察鉴定。结果:银染后普通光学显微镜和扫描电镜对生物膜观察结果相符。结论:可以用银染法观察细菌生物膜,方法简单、可靠。     

产KPC-2型碳青霉烯酶肠杆菌整合子分布研究

摘要：目的：研究亚胺培南耐药肠杆菌耐药机制,分析整合子的分布情况及其在流行传播中的作用。 方法：收集临床分离的18株对亚胺培南耐药肠杆菌,用琼脂稀释法检测抗菌药物最低抑菌浓度（MIC）;用PCR、DNA测序法检测KPC-2型碳青霉烯酶基因和整合酶基因,并分析整合子在耐药基因传播中的作用。 结果：18株肠杆菌除对亚胺培南耐药外,对头孢噻肟、环丙沙星、头孢吡肟、阿米卡星、氨苄西林等多药耐药,MIC值分别为128～2 048、8～512、64～2 048、16～2 048、64～4 096 μg/mL;PCR、基因测序显示18株肠杆菌均产KPC-2型碳青霉烯酶;18株菌均扩增出Ⅰ类整合酶基因,未检测出Ⅱ类整合酶基因,可变区中不存在kpc-2基因。 结论：本院分离的18株亚胺培南耐药肠杆菌均存在Ⅰ类整合酶基因,且kpc-2基因是引起这些细菌对亚胺培南耐药的主要原因。     

氨基糖苷类抗生素耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷钝化酶基因的检测

目的 了解淮北3所医院临床分离的36株铜绿假单胞菌氨基糖苷钝化酶(AME)基因存在情况.方法 采用MIC法测定临床分离菌株对3种氨基糖苷类及其他11种临床常用抗菌药物的敏感性;聚合酶链反应(PCR)法检测所测菌株中9种AME基因.结果 36株临床分离铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素的耐药率分别为62.2%、70.3%和81.1%;27株(75.0%)检出AME基因,ant(3″)-Ⅰ、aac(6')-Ⅱ、aac(6')-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ和ant(2″)-Ⅰ检出率分别为63.9%、58.3%、50.0%、38.9%和36.1%,未检出aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ、aph(3')-Ⅳ基因.结论 淮北3所医院临床分离的铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗生素耐药严重,AME携带率高且基因型的分布有明显的地区性.     

CARB-8型β内酰胺酶基因在多重耐药铜绿假单胞菌中的分布

目的了解淮北地区分离的多重耐药铜绿假单胞菌中羧苄西林酶(CARB)基因携带情况及其基因检测。方法用法国生物梅里埃公司VITEK-32全自动微生物分析仪鉴定临床分离的铜绿假单胞菌并作药敏试验;采用PCR法筛检出铜绿假单胞菌CARB基因,用DNA测序法对阳性扩增产物测序分型。结果通过药敏试验筛检出36株多重耐药铜绿假单胞菌,其中9株携带CARB基因,检出率为25.0%。经DNA测序并进行BLAST比对,确定基因型为CARB-8型。结论淮北地区临床样本中分离的多重耐药铜绿假单胞菌携带CARB-8型β内酰胺酶基因,携带率为25.0%,应引起临床重视。     

临床分离多药耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺类抗菌药物耐药相关基因研究

目的 了解安徽淮北地区临床分离多药耐药铜绿假单胞菌(PAE)中β-内酰胺类抗菌药物耐药相关基因存在情况.方法 对36株临床分离多药耐药PAE采用全自动微生物系统进行药物敏感性试验,用改良三维试验法检测各种β-内酰胺酶,用聚合酶链反应(PCR)检测14种β-内酰胺类抗菌药物耐药相关基因和外膜通道蛋白oprD2编码基因.结果 36株PAE中TEM、DHA、CTX-Ge和CARB的检出率分别为77.8%、69.2%、27.8%和25.0%,OXA-1、OXA-10的检出率均为16.7%,VIM-2的检出率为13.9%,IMP-1的检出率为2.8%,未检出VEB、SHV、GES、PER、GIM和SPM-2基因,有58.3%的菌株存在外膜通道蛋白oprD2基因缺失.结论 淮北地区临床分离的多药耐药PAE携带多种β-内酰胺酶基因,oprD2基因缺失率较高.