原发胃癌中p15、p16基因蛋白表达检测

目的：检测胃癌患者手术切除后原发灶、转移灶及癌旁非癌组织中p15、p16基因蛋白表达情况，探讨p15、p16基因失活与胃癌的关系。方法：采用免疫组化方法以及计分制方法进行结果判定。结果：p15、p16基因在癌旁非癌组织、原发灶、转移灶中的蛋白表达的阳性率具有显著性差异，p15的蛋白表达比p16高，而且在癌旁非癌组织、原发灶和转移灶中阳性率逐渐降低。结论：p15、p16蛋白表达与胃癌癌变过程相关，可能是胃癌癌变过程的监测指标之一，某种程度上可以评价预后，p15、p16蛋白表达检测可以某种程度上作为胃癌的筛查指标之一。     

Biglycan及血管内皮生长因子对结肠癌细胞迁移、侵袭能力的影响及机制

目的:观察biglycan及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对结肠癌细胞系HCT116迁移、侵袭能力的影响并探讨其可能的机制。方法:在稳定转染biglycan的结肠癌细胞系HCT116中转染VEGF siRNA,实验设置未转染对照组(mock组)、空载质粒和非特异性干扰片段转染对照组(vector+siRNA-NC组)、biglycan cDNA和非特异性干扰片段转染组(biglycan+siRNA-NC组)以及biglycan cDNA和VEGF siRNA共转染组(biglycan+siRNA-VEGF组)。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测biglycan和VEGF的mRNA表达;采用划痕实验检测细胞的迁移能力;采用Transwell法检测细胞的侵袭能力;采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测SNAIL、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达;采用明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的活性。结果:与mock组及vector+siRNA-NC组比较,biglycan+siRNA-NC组细胞的迁移、侵袭能力均显著提高(P0.05),vimentin、MMP-2、MMP-9、SNAIL蛋白的表达水平显著提高,E-cadherin蛋白的表达水平则显著下降(P0.05),MMP-2和MMP-9的活性显著提高(P0.05)。与biglycan+siRNA-NC组比较,biglycan+siRNA-VEGF组细胞的迁移、侵袭能力均显著降低(P0.05),SNAIL、vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平均显著下降,E-cadherin蛋白的表达水平显著提高(P0.05),MMP-2、MMP-9的活性显著下降(P0.05)。结论:biglycan通过促进VEGF的表达来促进结肠癌细胞系HCT116的迁移和侵袭,下调结肠癌细胞中VEGF的表达可逆转biglycan对HCT116迁移和侵袭的促进作用。     

原发胃癌中p15、p16基因蛋白表达检测

目的:检测胃癌患者手术切除后原发灶、转移灶及癌旁非癌组织中p15、p16基因蛋白表达情况,探讨p15、p16基因失活与胃癌的关系。方法:采用免疫组化方法以及计分制方法进行结果判定。结果:p15、p16基因在癌旁非癌组织、原发灶、转移灶中的蛋白表达的阳性率具有显著性差异,p15的蛋白表达比p16高,而且在癌旁非癌组织、原发灶和转移灶中阳性率逐渐降低。结论:p15、p16蛋白表达与胃癌癌变过程相关,可能是胃癌癌变过程的监测指标之一,某种程度上可以评价预后,p15、p16蛋白表达检测可以某种程度上作为胃癌的筛查指标之一。     

胃上部癌与胃下部癌术前化疗效果比较

目的：比较进展期胃上部癌与胃下部癌术前化疗的效果。方法进展期胃癌患者49例，其中胃上部癌18例（上部组），胃下部癌31例（下部组）。两组术前均行FOLFOX-7方案化疗2个周期，术后常规化疗。观察化疗不良反应发生情况，比较两组手术RO切除率、病理缓解情况、肿瘤控制情况、生存情况。结果两组化疗不良反应以恶心、呕吐为主，均未出现Ⅳ级不良反应，经相应处理后均缓解。上部组肿瘤控制率均高于下部组（P均＜0．05）。两组R0手术切除率、病理缓解情况、生存期差异无统计学意义。结论与胃下部癌相比，胃上部癌患者术前辅助化疗可获得更好的疗效。     

健脾益气方含药血清对人胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响

目的观察健脾益气方含药血清对人胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响。方法采用健脾益气方含药血清培养MKN-28,分别在培养24、48、72 h时采用MTT法测算MKN-28增殖抑制率;采用激光共聚焦法及流式细胞术观察MKN-28细胞形态和细胞周期变化。结果健脾益气方含药血清可显著抑制MKN-28增殖,且抑制率与含药血清浓度及其作用时间呈正相关;含药血清可改变MKN-28细胞周期,诱导其凋亡。结论健脾益气方含药血清对人胃癌细胞株MKN-28具有抑制增殖、促进凋亡的作用。     

5-氮杂胞苷对胃癌细胞系的生长凋亡及DR4与DR5表达的影响

目的探讨5-氮杂胞苷(5-Aza-CdR)对胃癌细胞系的生长,凋亡及DR4与DR5表达的影响。方法反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法、Western blot方法和甲基化特异性PCR(MS-PCR)法检测5-Aza-CdR处理后的胃癌细胞株内DR4和DR5的RNA表达水平。结果 5-Aza-CdR能够逆转胃癌细胞中DR4和DR5的启动子甲基化水平,并上调DR4和DR5的表达水平。结论 5-氮杂胞苷对胃癌细胞系MKN28、AGS和SGC7901具有增殖抑制作用,且具有药物浓度和作用时间的依赖性。促进胃癌细胞系MKN28、AGS和SGC7901的凋亡且能使死亡受体DR4和DR5的表达水平增高。     

胃癌患者紧密连接蛋白1的表达及意义

[目的]研究胃癌组织中紧密连接蛋白1(ZO-1)的表达及意义。[方法]采用免疫组织化学方法检测辽宁省肿瘤医院2001年1月~2006年12月期间收集的50例正常胃组织和100例胃癌及其癌旁组织标本中ZO-1表达情况,并分析胃癌组织中ZO-1表达水平与各临床参数之间的关系。[结果]ZO-1在胃癌组织中表达下调,在胃癌组织中的表达率(40.0%)显著低于癌旁组织(84.0%)和正常胃组织(84.0%)(P=0.000)。ZO-1表达水平与胃癌患者年龄、性别和组织学类型无关(P均>0.05)。ZO-1表达水平与分化程度、浸润深度、区域淋巴结转移、远处转移及临床分期具有相关性,分化程度越低、浸润越深、伴有淋巴结转移和远处转移、临床分期越高,ZO-1表达水平越低(P均<0.05)。ZO-1高表达组5年生存率高于低表达组(70%vs20%,P<0.05)。[结论]ZO-1在胃癌组织中表达下调,与肿瘤的临床分期、转移和预后密切相关,可作为胃癌诊断和预后评价的标志物之一。     

CHD5 和 WWOX 基因在胃癌中的表达及其对预后的影响

目的:探讨抑癌基因CHD5和WWOX的蛋白在胃癌中的表达及其对预后的影响. 方法:随机选取我院收治的胃癌患者65 例,采用免疫组化法检测胃癌组织及相应癌旁组织 CHD5 和WWOX蛋白的表达及与预后的关系. 结果:CHD5和WWOX蛋白在胃癌组织中的阳性表达率分别为36.92%(24/65)和41.54%(27/65),明显低于在癌旁组织的(P<0.05). 在胃癌组织中,CHD5 和WWOX蛋白的表达与TNM分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移均有关( P<0.05). 生存分析Kaplan-Meier法显示,CHD5和WWOX蛋白阳性表达的患者1、3年生存率显著高于阴性表达的患者,差异均有统计学意义( P<0.05). 结论:CHD5和WWOX在胃癌组织中低表达与胃癌的病变程度、侵袭转移及预后不良关系密切,提示CHD5和WWOX蛋白低表达可能参与胃癌的发生、发展及胃黏膜恶性转变等过程.     

Biglycan及FAK信号通路对结肠癌细胞侵袭、转移能力的影响及机制

目的 观察Biglycan对局部黏着斑激酶(Focal adhesion kinase,FAK)活化的影响,探索其是否通过调控FAK信号通路影响结肠癌细胞的侵袭和迁移。方法 构建过表达Biglycan的人结肠癌细胞系HCT116并施加FAK抑制剂处理。实验设置空白对照组(HCT116)、空载体对照组(Vector),空载体抑制剂处理组(Vector+PF-562271)、Biglycan过表达组(Biglycan)和Biglycan过表达抑制剂处理组(Biglycan+PF-562271)。抑制剂处理24h后,采用Western blot技术检测FAK、p-FAK在各组结肠癌细胞中的表达;采用Transwell实验分析各组结肠癌细胞的侵袭和迁移能力。结果 Biglycan过表达后会显著提高FAK的磷酸化水平,促进HCT116细胞的侵袭和迁移(P＜0.01);FAK抑制剂PF-562271能够明显降低p-FAK的表达,逆转Biglycan对结肠癌细胞侵袭和迁移能力有影响(P＜0.01)。结论 Biglycan通过激活FAK信号通路影响结肠癌细胞系HCT116的侵袭和转移。