丽蝇蛹集金小蜂和球孢白僵菌对家蝇的协同控制作用

目的探讨丽蝇蛹集金小蜂和球孢白僵菌对家蝇的协同控制作用,为家蝇防制提供科学依据。方法通过"Y"形管气味选择和寄生选择实验,研究表面黏附球孢白僵菌孢子对丽蝇蛹集金小蜂雌蜂寄主选择性和寄生的影响;利用生态模拟实验研究蝇蛹表面喷洒孢子对羽化家蝇生殖能力和寿命的影响。数据分析采用SPSS 20.0软件进行单因素方差分析。结果丽蝇蛹集金小蜂雌蜂对表面喷洒球孢白僵菌孢子后0、1、3、5、7 d蝇蛹的选择性与对照蝇蛹比较差异无统计学意义(P0.05);在表面喷洒球孢白僵菌孢子蝇蛹中羽化出的家蝇雌虫平均产卵前期为(6.00±0.94)d,对照组为(6.07±0.78)d,差异无统计学意义(P=0.200);表面喷洒球孢白僵菌孢子蝇蛹中羽化出的家蝇和对照组家蝇的单雌产卵量分别为(152.20±14.37)和(633.17±17.08)枚,卵孵化率分别为(20.64±1.74)%和(88.63±2.05)%,雌蝇寿命分别为(4.93±1.74)和(28.93±2.70)d。家蝇蛹表面喷洒球孢白僵菌孢子可使其单雌产卵量和卵孵化率均下降为对照组的1/4,雌蝇寿命下降为对照组的1/6,生殖潜力下降为对照组的1%。结论在蝇蛹孳生地周围释放丽蝇蛹集金小蜂可控制80%以上的蝇蛹,同时在孳生地表面喷洒球孢白僵菌孢子,可使未被寄生蝇蛹中羽化出家蝇的生殖潜力下降近99%,从而达到双重控制家蝇的目的。     

盐酸环丙沙星对家蝇幼虫和蛹体内抗氧化酶活力的影响

目的研究不同浓度盐酸环丙沙星对家蝇幼虫和蛹体内总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)3种抗氧化酶活性的影响。方法家蝇幼虫孵化后分别提供常规饲料、含0.1%、0.3%和0.5%盐酸环丙沙星的饲料。每天分别取样,至家蝇羽化。家蝇幼虫采用直接研磨法获得酶液,家蝇蛹先去除蛹壳后再进行研磨获得酶液。分别采用试剂盒测定T-SOD、CAT和POD活力,数据采用多重比较进行统计学分析。结果对照组、0.1%、0.3%处理组家蝇幼虫和蛹体内T-SOD、CAT和POD活力间差异无统计学意义(P0.05),而0.5%盐酸环丙沙星饲喂的家蝇幼虫和蛹体内3种抗氧化酶活力均高于前3组,其中喂食0.5%盐酸环丙沙星后家蝇幼虫体内的TSOD活性最高可达对照组的30倍,蛹体内的T-SOD活性最高可达对照组的40倍;喂食0.5%盐酸环丙沙星后,家蝇幼虫体内CAT活性最高可达对照组的3倍,蛹体内的活性最高可达对照组的6倍;喂食盐酸环丙沙星后,家蝇幼虫体内POD活性最高可达对照组的2倍,而蛹体内的POD活性最高可达对照组的7倍。结论低浓度盐酸环丙沙星对家蝇幼虫和蛹体内的抗氧化酶活力影响较小,而高浓度盐酸环丙沙星则可导致抗氧化酶活力显著升高。     

截短的BabA蛋白结合区(C51)具有促进幽门螺杆菌AGS细胞黏附作用

  目的   获得能与Lewis b结合的截短的BabA结合域,并评价其对幽门螺杆菌黏附人胃腺癌上皮细胞系（AGS细胞）的影响。   方法   采用Swiss Model分析蛋白截短后的结构变化,克隆表达截短的BabA结合区蛋白,命名为C51,用Native-PAGE蛋白电泳法检测其是否为多聚体。 用流式细胞术检测C51蛋白对J99和M523两株幽门螺杆菌黏附AGS细胞的影响,并用革兰染色观察C51蛋白对幽门螺杆菌聚集的影响。   结果   体外表达的C51蛋白以多聚体形式存在,该蛋白促进了J99和M523的聚集并使其与AGS的黏附分别增加了12%（t=8.211,P=0.001）和22%（t=4.402,P=0.012）。   结论   C51蛋白仍保持了与黏附相关的空间结构,并促进了幽门螺杆菌和AGS细胞的结合。     

球孢白僵菌CF08株对丽蝇蛹集金小蜂的安全性评价

目的研究球孢白僵菌CF08株对丽蝇蛹集金小蜂的安全性。方法采用浸虫法和饲喂法研究球孢白僵菌CF08株对丽蝇蛹集金小蜂成虫的安全性;采用浸渍法研究球孢白僵菌CF08株对丽蝇蛹集金小蜂幼期的安全性。利用SPSS 20.0软件进行统计学分析,组间比较采用单因素方差分析,多重比较采用Duncan法。结果浸虫法和饲喂法处理后丽蝇蛹集金小蜂雌蜂寿命分别为(11.09±0.15)和(10.92±0.15)d,对照组雌蜂寿命为(10.99±0.19)d,三者间差异无统计学意义(F=0.893,P=0.446);浸虫法和饲喂法雄蜂寿命分别为(5.83±0.09)和(5.88±0.03)d,对照组雄蜂寿命为(5.75±0.09)d,三者间差异亦无统计学意义(F=2.614,P=0.152)。被寄生不同时间的棕尾别麻蝇蛹浸渍球孢白僵菌孢子液后,蝇蛹中丽蝇蛹集金小蜂的出蜂率80%,平均出蜂数为43只/蛹,雌蜂比90%,羽化出的丽蝇蛹集金小蜂雌雄蜂体长平均为2.0和1.4 mm,与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。羽化出的雌蜂对棕尾别麻蝇蛹的寄生率均90%,出蜂率80%,平均出蜂数约为43只/蛹,后代的雌蜂比90%,与对照组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论幼期暴露球孢白僵菌CF08株对丽蝇蛹集金小蜂的生长、发育、繁殖和后代品质均无显著影响,两者可联合应用于蝇类的生物防治。     

患者胃窦黏膜组织幽门螺杆菌real time-PCR检测与分离培养结果的一致性分析

  目的  针对胃黏膜组织标本的幽门螺杆菌（HP）感染诊断的real time-PCR检测和分离培养2种最常用方法进行结果一致性分析,为HP感染诊断方法的选择提供科学依据。  方法  在浙江省4个地区（萧山、温岭、苍南和湖州）各选取1所医院,采集2020年11月16日至12月7日送至杭州致远检验医学研究所进行HP分离培养和耐药性分析的全部患者胃窦部黏膜活检标本,共1 312份。 每份样本经研磨匀浆处理后分为2份,分别用于常规HP分离培养和real time-PCR检测（以cagH为检测靶点）,2种方法平行双盲进行。 检测结果的一致性及不同医院来源样本间的差异用χ2检验、Fisher精确检验以及独立样本t检验等统计学方法进行分析。  结果  1 312份样本中,分离培养法和real time-PCR法的阳性率分别为29.34%（385/1 312） 、28.51%（374/1 312）,差异无统计学意义（P=0.636）。 来自4所医院的标本,2种方法的检出率差异均无统计学意义（P=0.075）,二者在萧山某院、温岭某院、苍南某院、湖州某院样本以及总体样本中的Kappa值分别为0.84、0.89、0.75、0.91、0.85。 real time-PCR法的灵敏度和特异度分别为89.26%、100.00%。 在real time-PCR法检测阳性而培养阴性的样本中,检测Ct值为25.47～34.97,均值为30.90,90%的Ct值均≤34.46,频数最高组为29.00～30.00组。  结论  分离培养法和real time-PCR法在临床胃黏膜标本HP诊断中均可达到较高的检测效能,且2种方法检出结果一致性良好,可应用于HP个体化治疗,以便在做出HP感染诊断的同时提供受检者的药敏检测结果。 标本中HP菌量及标本的保存运输条件可能对结果产生重要影响。     

家蝇幼虫肠道及其培养介质中可培养细菌的分离与鉴定

目的明确家蝇幼虫肠道中可培养共生细菌和培养介质中细菌在家蝇发育过程中的变化动态,探究家蝇肠道共生细菌的来源。方法家蝇卵孵化后,每天取家蝇幼虫及其周边的培养介质,分别分离培养细菌,直到化蛹。结果未经家蝇幼虫孳生的培养介质中只分离到了假单胞菌属和沙雷菌属。在家蝇幼虫孳生后的培养介质中分离到可培养细菌14属,分别为变形杆菌属、香味菌属、假单胞菌属、普罗威登斯菌属、微杆菌属、克雷伯菌属、库特氏菌属、葡萄球菌属、产碱杆菌属、博德特氏菌属、鞘氨醇杆菌属、根瘤菌属、肠杆菌属和克吕沃尔菌属。在家蝇肠道中分离到共生细菌共计11属,分别为变形杆菌属、香味菌属、假单胞菌属、普罗威登斯菌属、微杆菌属、克雷伯菌属、库特氏菌属、葡萄球菌属、产碱杆菌属、博德特氏菌属和明串球菌属。家蝇幼虫肠道与介质中共有的细菌有8属。家蝇肠道中分离到次数最多菌属是普罗威登斯菌属、变形杆菌属和库特氏菌属,而在幼虫培养介质中分离到次数最多的是香味菌属。随着家蝇发育过程,其培养介质中分离到的菌属数量呈现逐渐升高趋势;家蝇幼虫发育过程中,其肠道中分离到的菌属数也呈逐渐升高趋势。结论家蝇体内的肠道共生细菌与其孳生环境中的细菌有一定的重复性。