EB病毒对新生儿脐带血单核细胞来源的树突状细胞表型的影响

从脐带血单核细胞来源树突状细胞(DC)表型变化的角度来探讨EB病毒对DC表型的影响,以阐明其逃逸宿主免疫的机制。将GM-CSF和IL-4、EB病毒和LPS不同组合对单核细胞来源DC进行刺激培养,利用单染色和三染色免疫荧光抗体标记—流式细胞术检测单核细胞来源DC表面CD14、CD11c、CD1a、HLA-DR、CD86、MR和MHCⅠ类分子。加入EB病毒后,DC表面CD14分子表达的下调不明显,CD1a的表达则随病毒加入时细胞的分化阶段有关;同时EB病毒还影响了加入LPS后HLA-DR和CD86的升高和MR的降低;EB病毒还影响了细胞表面MHCⅠ类分子的表达。因此EB病毒可抑制单核细胞来源DC的分化和成熟,这可能是其逃逸宿主免疫的机制之一。     

胰岛素样生长因子1诱导脐血CD14^＋单核细胞转化树突状细胞分化成熟的研究

目的 通过研究胰岛素样生长因子1（IGF-1）对脐血CD14^ 单核细胞转化的树突状细胞分化成熟的影响,以探讨IGF-1对新生儿天然免疫的作用。方法 利用无血清,无激素培养系统,体外培养10例健康足月新生儿脐血及10例健康成人外周血CD14^ 单核细胞,观察IGF-1对新生儿脐血CD14^ 单核细胞转化的树突状细胞（monocyte-derived dendritic cell,mDC)表型和功能的影响。结果 与正常成人比较,IL-4 GM-CSF诱导的新生儿脐血mDC中：CD1a^ 细胞百分率和甘露糖受体（MR）阳性细胞百分率明显降低,细胞表面主要组织相容性Ⅱ型抗原（MHCⅡ）和CD40表达明显降低,其吞噬功能,抗原提呈功能明显下降,IGF-1能显著升高脐血mDCMHCⅡ表达,下调甘露糖受体及细胞的吞噬功能,结论 IGF-1体外可促进脐血CD14^ 单核细胞转化的树突状细胞成熟。     

胰岛素样生长因子1诱导脐血CD14+单核细胞转化树突状细胞分化成熟的研究

目的　通过研究胰岛素样生长因子 1(IGF 1)对脐血CD14 单核细胞转化的树突状细胞分化成熟的影响 ,以探讨IGF 1对新生儿天然免疫的作用。方法　利用无血清 ,无激素培养系统 ,体外培养 10例健康足月新生儿脐血及 10例健康成人外周血CD14 单核细胞 ,观察IGF 1对新生儿脐血CD14 单核细胞转化的树突状细胞 (monocyte deriveddendriticcell,mDC)表型和功能的影响。结果　与正常成人比较 ,IL 4 GM CSF诱导的新生儿脐血mDC中 :CD1a 细胞百分率和甘露糖受体 (MR)阳性细胞百分率明显降低 ,细胞表面主要组织相容性II型抗原 (MHCII)和CD4 0表达明显降低 ,其吞噬功能 ,抗原提呈功能明显下降。IGF 1能显著升高脐血mDCMHCII表达 ,下调甘露糖受体及细胞的吞噬功能。结论　IGF 1体外可促进脐血CD14 单核细胞转化的树突状细胞成熟     

比较卡介苗及其成份对脐血单核细胞转化的树突状细胞成熟的影响

通过比较卡介苗（BCG），卡介苗多糖核酸提取物（BCG-PSN）以及热休克蛋白65（HSP65）对脐血单核细胞转化的树突状细胞成熟的影响。以探讨BCG及其有效成分对新生儿免疫功能的作用。经体外分离，诱导19例健康足月新生儿CD14^ 单核细胞分化成为未成熟树突状细胞，并观察BCG，BCG-PSN和HSP65对其成熟的影响。结果：BCG可通过上调CD83，CD86和MHCⅡ类抗原，下调甘露聚糖受体（MR）促进脐血单核细胞转化的树突状细胞成熟，BCG-PSN和HSP65不能促进脐血树突状细胞分化成熟，提示BCG可能通过促进脐血树突状细胞的成熟，影响新生儿T细胞功能发育，而BCG-PSN和HSP65并无此作用。     

顺铂、拓扑替康、柔红霉素和羟基脲对人骨髓间充质干细胞的作用

我们曾研究一些白血病常用的化疗药物对人间充质干细胞（MSC）的影响,并发现其独特的耐药性。本研究评估一些实体瘤常用的化疗药物如顺铂、拓扑替康、柔红霉素和可长期使用的口服化疗药物如羟基脲等对人MSC的作用。在体外培养系统中,比较人MSC与NB4细胞系、人外周血单个核细胞（PBMC）对这些单一化疗药物的敏感性。单一化疗药物作用72小时后,继续将人MSC在正常培养液培养9天,用MTT方法测定细胞增殖恢复情况。Annexin V／PI染色后,用流式细胞仪检测上述4种化疗药物诱导的细胞凋亡。结果表明：人MSC对4种化疗药物均较NB-4细胞耐药,拓扑替康、顺铂、羟基脲和柔红霉素对人MSC的IC50分别是其对NB-4细胞的IC50的636倍、24．8倍、20倍以上和2．4倍,但人MSC对拓扑替康、顺铂和柔红霉素较人PBMNC更敏感,拓扑替康、顺铂和柔红霉素对人PBMNC的IC50分别是其对人MSC的IC,。的27倍以上、1．9倍和1．4倍。4种药物在临床浓度都明显抑制人MSC增殖,去除药物作用后,这种抑制作用持续存在。上述单一药物临床浓度作用于人MSC后48—72小时凋亡细胞增加。结论：顺铂、羟基脲、拓扑替康和柔红霉素单一药物均可造成人MSC持续损伤,其机制与细胞凋亡有关。     

呼吸道合胞病毒感染后气道上皮细胞Toll样受体4的表达及其功能

目的 观察呼吸道合胞病毒(RSV)感染后气道上皮细胞Toll样受体4(TLR4)表达变化及其信号通路的功能,探讨RSV诱导气道炎症的机制.方法 体外培养人气管上皮细胞株9HTEo,以RSV感染复数为10感染上皮细胞,用半定量逆转录PCR(RT-PCR)检测TLRl～10 mRNA表达;用定量PCR检测TLR4 mRNA表达的动态变化;用流式细胞术检测TLR4蛋白表达及与细胞凋亡的关系;感染后再用TLR4激动剂脂多糖(LPS)刺激细胞,用酶联免疫法(ELISA)检测上清液中白细胞介素-8(IL-8)含量以观察病毒诱导表达的膜TLR4蛋白功能.RT-PCR和流式细胞术实验分为正常组和RSV感染组,用GraphPad 4.0统计软件进行配对t检验;实时定量PCR实验分为正常组、RSV感染组和紫外线灭活RSV感染组,采用Kruskal-Wallis检验分析;ELISA实验分为正常组、RSV感染组、单独LPS刺激组和RSV-LPS共刺激组,采用One-way ANOVA检验分析.结果 (1)RSV感染组TLR2～10 mRNA表达均上调(t值为3.49～14.47,P均＜0.05),以TLR2和TLR6变化最为显著;定量PCR结果提示:感染组TLR4 mRNA 3 h后开始增高(Kruskal-Wallis检测值=8.82,P＜0.05,n=6),紫外灭活RSV组TLR4 mRNA表达无明显变化;(2)流式细胞术结果表明:RSV感染组膜上TLR4表达比正常组增高(平均荧光强度:1.27±0.48,0.97±0.25,t:2.39,P＞0.05,n=10),感染组胞内TLR4表达比正常组降低(平均荧光强度:3.08±1.38,3.36±1.31;t=2.92,P＞0.05,n=10),感染组膜TLR4阳性细胞中(93.32±1.7)%为膜黏连蛋白-5阳性细胞;(3)RSV-LPS共刺激组培养上清液中IL-8含量明显高于单纯LPS刺激组(F=59.29,P＜0.01,n=3).结论 RSV感染后,上皮细胞TLR4mRNA和蛋白表达水平上调,与TLR4信号通路相关的IL-8分泌增加;TLR4与上皮细胞凋亡的关系提示TLR4及其信号通路可能参与了RSV诱导的上皮细胞急、慢性炎症反应.     

阶梯性康复训练联合持续静态牵伸技术对肘关节骨折患者术后关节功能恢复及预后的影响

目的:探讨阶梯性康复训练联合持续静态牵伸技术对肘关节骨折患者术后关节功能恢复及预后的影响。方法:选择160例肘关节骨折患者作为研究对象,随机分为对照组和观察组,各80例。2组患者均给予骨折切开复位内固定手术治疗,对照组患者术后给予持续静态牵伸技术训练,观察组患者在上述治疗的基础上外加阶梯性康复训练。比较2组患者治疗前、治疗3个月后肘关节功能、肘关节主动活动度及肿胀评分及日常生活能力评分变化,分析2组患者骨折愈合时间、并发症及治疗满意度差异。结果:与治疗前相比,2组患者治疗后日常生活、疼痛、运动功能及肘关节功能和日常生活能力评分总分均明显升高,肿胀评分明显降低,且观察组患者治疗后上述评分改善更为显著(P<0.05)。观察组患者的骨折愈合时间明显低于对照组(P<0.05),肘关节主动活动度康复效果明显高于对照组(P<0.05)。结论:阶梯性康复训练联合持续静态牵伸技术治疗肘关节骨折术后患者,可以明显改善其肘关节功能,降低骨折愈合时间,提高预后生活质量,具有一定的临床应用价值。     

丙泊酚对体外循环大鼠Nrf2/HO-1通路及肠屏障损伤的影响

目的 探究丙泊酚对体外循环(CPB)大鼠核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶(HO)-1通路及肠屏障损伤的影响。方法 SD雄性大鼠72只采用随机数字表法分为假手术(Sham)组、CPB组、Nrf2激活剂(Hesperin)组(10 mg/kg)、丙泊酚高、中、低剂量(40、20、10 mg/kg)组，每组12只。制备CPB模型，CPB组大鼠在CPB开始前20 min开始静脉输注生理盐水；Hesperin组、丙泊酚各剂量组在CPB开始前20 min开始静脉输注相应剂量的丙泊酚注射液。CPB转流2 h后，进行肠道微循环测试；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆二胺氧化酶(DAO)活性、D乳酸(D-LA)、内毒素(ET)含量；生化法检测肠组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性；苏木素-伊红染色(HE)观察肠组织病理变化；免疫组织化学法观察肠屏障功能相关紧密连接蛋白(ZO)-1和occludin表达；Western印迹检测肠组织Nrf2、HO-1蛋白表达。结果 与Sham组相比，CPB组微血管直径明显缩小，...