小鼠BTLA慢病毒表达载体的构建及鉴定

目的 构建小鼠BTLA慢病毒表达载体,并对表达产物进行鉴定.方法 以pET-28a-mBTLA质粒为模板,通过PCR技术构建pMD18-T-mBTLA质粒,将小鼠BTLA基因全长编码序列克隆到慢病毒转移载体,通过脂质体转染293T细胞包装成小鼠BTLA慢病毒颗粒.PCR技术和基因测序对重组质粒进行鉴定.荧光显微镜观察重组慢病毒感染293T细胞形态学变化.RT-PCR和Western blot法鉴定BTLA在重组慢病毒感染293T细胞中的表达.50％组织培养感染剂量法(TCID5o法)检测重组慢病毒滴度.结果 成功构建的pMD18-T-mBTLA质粒和pSL6-mBTLA质粒,经双酶切电泳后均出现大小约为1 kb的条带与mBTLA编码序列的大小相符.基因测序并比对分析进一步证实mBTLA编码序列成功整合到质粒载体.病毒上清PCR扩增和293T细胞形态学观察证实Lenti-mBTLA慢病毒包装成功.TCID50法测定Lenti-mBTLA慢病毒滴度为1.3×108 pfu/mL.RT-PCR和Western blot法证实Lenti-mBTLA慢病毒能有效表达mBTLA mRNA和蛋白质.结论 成功构建了表达小鼠BTLA的慢病毒.     

糖尿病患者血脂检验在临床诊断中的应用价值

目的:探讨糖尿病患者血脂检验在临床诊断中的应用价值。方法:选择2017年10月至2018年12月南方医科大学附属小榄医院收治的100例糖尿病患者纳入研究工作,另选择同时间段来本院进行常规体检的100例健康者纳入研究,分别命名为观察组与对照组。两组均接受血脂检验,并比较分析两组的血脂检验结果,包括总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白–胆固醇(HDL–C)、低密度脂蛋白–胆固醇(LDL–C)。结果:观察组患者的TC、TG、LDL–C均明显高于对照组,HDL–C明显低于对照组,差异具有统计学意义(P 0.05)。结论:糖尿病患者在临床诊断中应用血脂检验方法具有重要应用价值。     

活动性肺结核患者血浆IL-37的检测及其临床意义

目的检测活动性肺结核(ATB)患者血浆中IL-37的含量,探讨其临床意义。方法采用ELISA夹心法检测30例ATB患者血浆中白细胞介素37(IL-37)的含量,并对15例患者进行了治疗后跟踪检测,21例健康志愿者作为对照组。结果 ATB患者血浆中的IL-37含量明显高于健康对照组,15例跟踪患者治疗后血浆中IL-37含量较治疗前明显下降;结核抗体阳性患者血浆IL-37含量高于结核抗体阴性患者,痰涂片阳性患者血浆IL-37含量显著高于痰涂片阴性患者;ATB患者血浆IL-37含量与患者外周血白细胞总数呈负相关。结论 ATB患者血浆中的IL-37含量明显升高,血浆IL-37的检测有可能成为ATB疗效评估的指标。     

结核性胸膜炎患者树突状细胞亚群的检测及意义

目的 检测树突状细胞(DC)及其各亚群[髓样树突状细胞(mDC)和浆细胞样树突状细胞(pDC)]在结核性胸膜炎(TP)患者外周血及胸腔积液中的变化,并且分析其与白细胞介素-12(IL-12)水平的相关性,探讨其临床意义.方法 以12例健康志愿者作为对照组,采用流式细胞术对16例TP患者(TP组)外周血和胸腔积液中总体树突状细胞(tDC)及其各亚群的比例进行检测;同时,用ELISA法对TP患者外周血浆和胸腔积液中IL-12的含量进行检测.结果 Tp组患者外周血中tDC和mDC比例显著高于对照组,治疗后tDC比例下降明显;TP组患者胸腔积液中tDC和mDC比例高于外周血,但pDC低于外周血;TP组患者血浆中IL-12的含量显著高于对照组,而胸腔积液中IL-12的含量则明显高于其血浆含量;TP患者血浆中IL-12的水平与外周血tDC、mDC呈正相关,并且胸腔积液中IL-12的水平也与胸腔积液tDC、mDC呈正相关.结论 DC,尤其是mDC在TP中具有重要的抗结核免疫作用.     

活动性肺结核患者外周血髓样树突状细胞中 BTLA与B7-H4共表达检测及临床意义

目的 检测活动性肺结核患者(APT)外周血髓样树突状细胞(myeloid dendritic cell,mDC)中BTLA和B7-H4的表达,分析其与mDC表面成熟标志分子CD83、抗原递呈分子HLA-DR以及共刺激分子CD86表达的相关性,探究其临床意义。方法 采用流式细胞术检测46例APT外周血中mDC共表达BTLA和B7-H4的情况,以23例健康志愿者作为对照,同时对10例患者进行治疗后(1个月)的跟踪检测。比较BTLA和B7-H4双阳性mDC(DP-mDC)中CD83、HLA-DR及CD86的表达差异。结果 APT外周血中DP-mDC的表达显著高于健康对照组,在复治患者中表达显著高于初治患者,经过1个月治疗DP-mDC比例显著降低。在健康对照和患者外周血中,DP-mDC表达CD83和HLA-DR都显著高于DN-mDC,而CD86在DP-mDC中的表达水平低于DN-mDC。APT外周血中DP-mDC和DN-mDC表达HLA-DR的水平显著低于健康对照,CD86和CD83水平都显著高于正常对照。结论 APT中mDC高表达BTLA和B7H4分子,并与其表面分子的表达存在相关性,提示BTLA和B7H4的表达可能对mDC抗结核免疫中发挥调节作用。     

B、T淋巴细胞弱化因子在人类免疫性疾病中的作用及机制研究进展

B、T淋巴细胞弱化因子（BandTlymphocyteattenuator，BTLA）是类似于CTLA-4和PD-1的一种共抑制性分子，在负向调控外周免疫耐受和免疫应答中具有重要作用。动物疾病模型的研究表明：BTLA在多种疾病的发生、发展中起着重要的作用，但在人类免疫性疾病中的作用尚不明朗。本文以近年来BTLA在人类免疫性疾病的临床研究为基础，综述BTLA在人类免疫性疾病中的作用及机制，从中归纳其在人类免疫性疾病中的规律，探讨BTLA在临床疾病发生、发展的机制，为以BTLA为靶点的人类免疫性疾病的诊断、治疗和预防策略提供依据。     

联合检测血清 HE4和 CA153对乳腺癌早期诊断的价值

目的：探讨联合检测血清人附睾分泌蛋白4(HE4)与糖类抗原153(CA153)在乳腺癌早期诊断中的应用价值。方法收集乳腺癌患者40例,乳腺良性疾病患者50例及体检健康者30例,采用免疫组化法检测组织中 HE4的表达,采用化学发光法检测血清 CA153和 HE4的表达水平,并分析比较血清 CA153和 HE4单项或联合检测对女性乳腺癌的诊断价值。结果乳腺癌组织 HE4高表达率明显高于乳腺良性肿瘤组织(P <0.05),乳腺癌患者血清 HE4和 CA153水平均明显高于乳腺良性疾病患者和体检健康者(P <0.05),同时乳腺癌患者血清 HE4与 CA153呈正相关(P <0.05)。血清 HE4和 CA153单一指标检测乳腺癌的检出率分别为85.0%、65.7%;而两者联合检测的检出率高达92.5%,明显高于单项检测。结论血清 HE4对乳腺癌的早期诊断具有参考价值,同时联合血清 CA153检测能提高乳腺癌的检出率,可成为乳腺癌筛查和早期诊断的可靠模式。