系统性红斑狼疮女性患者血清泌乳素β_2-微球蛋白和白细胞介素-6水平的研究

系统性红斑狼疮 (ｓｙｓｔｅｍｉｃｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ,ＳＬＥ)是以多脏器损害为主要表现的自身免疫性疾病 ,多见于女性 ,其发病机制至今未明。近期的研究表明 ,内分泌激素、主要组织相容性抗原复合体 (ＭＨＣ)Ⅰ类分子和细胞因子水平的紊乱与ＳＬＥ的发病有关[1,2 ] 。为此我们检测了 3 6例女性ＳＬＥ患者血清泌乳素 (ＰＲＬ)、β2 微球蛋白 ( β2 ＭＧ)和白细胞介素 (ＩＬ) 6水平 ,发现有明显异常 ,现报告如下。1　资料与方法1 1　临床资料3 6例女性ＳＬＥ患者 ,年龄 ( 3 8± 14)岁。诊断标准符合1982年美国风湿病学…     

3例复发难治性B细胞急性淋巴细胞白血病的治疗及移植物抗宿主病预防

目的 通过对3例复发难治性B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患者的治疗方法及移植治疗后移植物抗宿主病(GVHD)的预防方法分析,总结这类疾病有效治疗方案及预防方案.方法 3例复发难治性B-ALL患者中2例为费城染色体Ph(+),在确定半相合供者后,给予CD19靶向嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞桥接治疗,缓解后接受亲缘半相合异基因造血干细胞移植(haplo-HSCT),采用造血干细胞移植方案GIAC进行移植治疗,同时在移植后给予小剂量环磷酰胺(PTCY,14.5 mg/kg体质量)预防GVHD.结果 3例B-ALL患者CAR-T细胞治疗后均获得了完全缓解(CR),其中2例达分子生物学缓解,1例达流式MRD阴性缓解;其中2例患者顺利接受haplo-HSCT,回输后均成功供者细胞造血重建,无严重GVHD,白血病疾病状态稳定.另1例伴有p.T315I突变的Ph(+)-ALL患者,CAR-T细胞治疗后获得短暂分子生物学缓解,但在移植准备过程中再次复发后失去移植机会.结论 CAR-T治疗后序贯亲缘半相合移植治疗复发难治性B-ALL患者效果良好;小剂量PTCY联合GIAC移植方案可以安全有效地预防GVHD的发生;CAR-T细胞治疗后短期再次复发的B-ALL患者目前仍然治疗困难.     

MSCs联合雷帕霉素对异基因鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用

目的探讨体外骨髓间充质干细胞（MSCs）联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞的免疫调节作用及可能机制。方法从5～6周龄BALB/c鼠骨髓中分离培养MSCs并鉴定其纯度。用EZ SepTM Mouse 1X分离异体BALB/c鼠脾脏淋巴细胞,分别在刀豆蛋白A（ConA）、脂多糖（LPS）刺激下,用MSCs和/或雷帕霉素处理,MTT法检测淋巴细胞的增殖,流式细胞术检测T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达和T淋巴细胞凋亡情况,Real time PCR测定T淋巴细胞IL 10 mRNA、IFN γ mRNA的表达水平。结果MSCs明显抑制T、B淋巴细胞增殖,联合雷帕霉素组抑制作用更加显著（P＜0.01）。MSCs可抑制T淋巴细胞的凋亡,联合雷帕霉素组较单独MSCs组抑制作用更加明显(P＜0.01)。MSCs联合雷帕霉素具有协同促进IFN γ mRNA表达和协同抑制IL 10 mRNA表达的作用。单独MSCs或MSCs联合雷帕霉素对T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达无显著影响。结论MSCs联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞有免疫负调节作用,可能与协同抑制淋巴细胞增殖、T淋巴细胞凋亡和干预IFN γ mRNA、IL 10 mRNA表达有关。     

骨髓源性间充质干细胞联合来氟米特对小鼠T淋巴细胞的免疫调节作用

目的 探讨骨髓源性间充质干细胞(BMSCs)在体外联合来氟米特(LEF)对小鼠T淋巴细胞的免疫调节作用.方法 直接贴壁筛选法分离培养小鼠BMSCs,流式细胞分析(FCM)鉴定BMSCs的纯度.用EZ-SepTMm Mouse 1X分离异体BALB/c小鼠的脾淋巴细胞,在刀豆球蛋白A(ConA)诱导的同时,先经LEF处理,洗去LEF后,脾淋巴细胞再和BMSCs共培养.分组:A组:脾淋巴细胞;B组:脾淋巴细胞+BMSCs;C组:LEF处理的脾淋巴细胞;D组:LEF处理的脾淋巴细胞+BMSCs.用四甲基噻唑蓝(MTT)比色法检测各组T淋巴细胞的增殖情况,流式细胞术分析各组T淋巴细胞的活化及凋亡情况,定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组T淋巴细胞的白细胞介素(IL)-2、IL-10基因水平.结果 在体外,BM-SCs处理组(B组)T淋巴细胞的A570 nm值为0.578±0.042,LEF处理组(C组)A570 nm值为0.5024±0.040,两组A570 nm值均显著低于对照组(A组)A570 nm值为0.778±0.035(P<0.01).BMSCs联合LEF组(D组)A570 nm值为0.218±0.033,显著低于BMSCs处理组及LEF处理组(P<0.01). BMSCs联合LEF对CD3+CD69+、CD3+CD28+表达、IL-2基因表达均无明显影响.BMSCs单独或联合LEF组T淋巴细胞凋亡率分别为(2.29±0.32)%、(4.22±0.98)%,较A组T淋巴细胞凋亡率(8.08±1.20)%均明显下降.BMSCs处理组和LEF处理组T淋巴细胞IL-10基因相对表达分别为:0.098±0.039、0.054±0.022明显低于A组(IL-10基因相对表达为1.000)(P<0.01),MSCs联合LEF组IL-10基因相对表达为:0.023±0.015,显著低于BMSCs处理组及LEF处理组(P<0.01).结论 BMSCs联合LEF对小鼠T淋巴细胞有一定程度的协同免疫调节作用.     

32例原发性干燥综合征临床分析

目的：通过临床病例分析，进一步提高对原发性干燥综合征（pSS）的诊治水平，改善预后。方法：回顾性地分析1992年10月－2000年5月住我院的pSS病人32例的临床资料。结果：pSS以女性患者明显多见，男性1例，女性31例。首发症状和临床表现中，口、眼干燥发生率最高（首发症状中占81．2％，临床表现中占96．8％）。有肾小管酸中毒临床表现的发生率为28．1％，有明显肺间质病变者3例，占9．3％，血红蛋白降低、血小板降低的发生率分别是46．8％和25％。并发恶性淋巴瘤者1例，占3．1％。结论：凡在临床上出现不明原因的肾小管酸中毒、盆血、肺间质病变、血小板减少等，均要考虑pSS可能，而作相应检查，以达早期诊治。     

骨髓瘤细胞可诱导骨髓间充质干细胞的基因表达谱发生暂时和 (或)长期性改变

目的:正常骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)在与骨髓瘤细胞相互作用过程中,MSC的全基因表达谱的改变目前尚未有报道,本研究就对此进行研究并进一步探索多发性骨髓瘤的发病机制。方法:正常人骨髓MSC与骨髓瘤细胞株在Transwell共培养体系培养前后,用全基因表达芯片检测MSC全基因mRNA的表达谱,比较正常MSC在与骨髓瘤细胞共培养(MC组)或共培养后去除骨髓瘤细胞后继续单独培养的MSC(MA组),和MSC单独培养的对照组(MK组)基因表达谱的变化。结果:MC组与MK组相比较,在所有分析的10 000个基因中共发现837个差异基因(837/10 000,8.37%),其中有472个基因表达上调(472/837,56.39%),365个基因表达下调(365/837,43.61%)。而MA组与MK组相比较,共发现367个差异基因,其中有218个基因表达上调(218/367,59.40%),149个基因表达下调(149/367,40.60%)。从芯片结果中筛选出MMP1、FGFR2、ANGPTL4、MFAP5、TGM2、STC1、CCL7和IL-32这8个基因,经定量PCR验证后的结果与基因芯片结果相一致。结论:骨髓瘤细胞可以诱导正常骨髓MSC多种基因表达改变,并且有些改变即使在骨髓MSC脱离骨髓瘤细胞后仍可存在;此外,初步筛选到8个差异表达基因,其中7个基因在多发性骨髓瘤发病机制中的作用既往未见报道,有待今后进一步研究。     

慢性痛风性关节炎患者骨代谢的水平及其临床意义

目的 探讨慢性痛风性关节炎患者骨代谢的水平及临床意义.方法 采用电化学发光免疫分析法检测30例急性痛风性关节炎患者(AG组)、30例高尿酸血症患者(HU组)、60例慢性痛风性关节炎患者(CG组)和30例健康体检者(HC组)的血清骨钙素(OC)、Ⅰ型原胶原N端前肽(PINP)和Ⅰ型胶原C端交联肽(CTX)的水平.分析CG组患者骨代谢指标OC、PINP和CTX分别与年龄、BMI、急性关节炎病程、高尿酸病程、血清尿酸、FBG、血脂、CRP、ESR、IL-6、痛风石以及关节超声改变等因素的相关性.结果 骨代谢指标OC、PINP以及CTX水平在AG组、HU组和CG组呈逐渐升高的趋势;其中,CG组血清CTX水平高于HC组和AG组[(453.75±134.69)ng/L vs.(319.74±83.94)ng/L 和(306.76±84.95)ng/L](P＜0.05).相关性分析结果显示,CG 组患者OC与痛风石、ESR、IL-6、关节内尿酸盐呈正相关(P＜0.05),与FBG、三酰甘油呈负相关(P＜0.05);PINP与痛风石、ESR、IL-6、关节内尿酸盐呈正相关(P＜0.05);CTX与痛风石、关节内尿酸盐呈正相关(P＜0.05),与滑膜血流信号呈负相关(P＜0.05).多元线性回归分析显示,关节内尿酸盐是CG组患者骨代谢失衡的危险因素(P＜0.05).结论 慢性痛风性关节炎患者存在骨代谢失衡,其骨代谢水平与痛风石、FBG、三酰甘油、IL-6、ESR、关节内尿酸盐等多因素相关.关节内尿酸盐可能是骨破坏的重要因素.     

结缔组织病患者骨代谢的变化及云克对类风湿关节炎骨代谢的影响

目的：通过测定骨密度和骨代谢指标了解结缔组织病患者骨质疏松的发生情况和骨代谢的变化情况,并评价云克治疗类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）对骨代谢的影响。方法：选取2016年2月—2017年2月于江苏大学附属医院风湿免疫科住院患者共280例,其中系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）75例,原发性干燥综合征（primary Sjogren syndrome,pSS）45例,RA 160例。采用双能X线法测定患者腰椎和髋部骨密度,采用电化学发光免疫分析法检测骨钙素（osteocalcin,OC）、Ⅰ型原胶原N端前肽（N?terminal propeptide of typeⅠ procollagen,PINP）和Ⅰ型胶原C端肽交联（C?terminal cross?linking telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX）。分别分析骨代谢指标OC、PINP和CTX与患者年龄、病程、体重指数（body mass index,BMI）、C?反应蛋白（C?reactive protein,CRP）、红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate,ESR）、补体C3、类风湿因子（rheumatoid factor,RF）、骨密度以及激素使用程度等因素的相关性。有70例RA患者给予云克治疗4个月,统计分析云克治疗前后骨代谢指标的差异。结果：280例结缔组织病患者骨量减少的发生率为27.7%,骨质疏松的发生率为21.5%。与SLE组比较,OC、PINP以及CTX水平在pSS组和RA组呈升高趋势;同时,pSS和RA患者的OC、PINP以及CTX水平在骨量正常组、骨量减少组和骨质疏松组呈逐渐升高的趋势。相关性分析发现,pSS患者骨代谢指标与RF呈显著正相关（OC：r=0.570,P=0.002;PINP：r=0.752,P < 0.001;CTX：r=0.660,P < 0.001）;SLE患者OC、PINP与髋部骨密度呈显著负相关（OC：r=-0.382,P=0.028;PINP：r=-0.527,P=0.002）;pSS患者OC、CTX与髋部骨密度呈显著负相关（OC：r=-0.471,P=0.013;CTX：r=-0.422,P=0.028）。与治疗前比较,云克治疗4个月后RA患者OC水平上升（P < 0.05）,ESR水平下降（P < 0.05）;而PINP、CTX、CRP和骨密度无明显变化。结论：结缔组织病患者存在不同程度的骨代谢异常,骨质疏松发生率较高。骨代谢指标可早期预测骨量丢失情况。云克治疗有助于改善RA患者骨代谢。     

系统性红斑狼疮患者外周血BMP/Smads信号通路相关基因表达及与OPG/RANKL的相关性分析

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血BMP/Smads信号通路相关基因表达,了解其与OPG/RANKL相关性,探讨其在SLE骨代谢中的意义?方法:选取SLE患者26例及正常对照组20例,运用实时定量PCR方法检测两组外周血单个核细胞BMP/Smads信号通路相关基因BMP-2?Smad1?Smad5?Smad8及RANKL?OPG的表达,ELISA法定量检测血清中RANKL?OPG水平,计算OPG/RANKL比值;分析Smad1?Smad5?Smad8基因表达量与疾病活动相关指标及OPG/RANKL相关性?结果:SLE患者外周血单个核细胞OPG/RANKL系统中OPG基因mRNA表达水平较正常对照组减低 (0.002 5 ± 0.000 7 vs. 0.017 6 ± 0.006 7,P < 0.05),RANKL基因mRNA表达水平无统计学差异 (0.003 3 ± 0.001 0 vs. 0.002 4 ± 0.000 9,P > 0.05),SLE患者OPG/RANKL比值较正常对照组明显减低 (0.229 6 ± 0.071 2 vs. 0.609 5 ± 0.165 1,P < 0.01)?SLE患者Smad1?Smad8基因mRNA表达水平较正常对照组明显减低 (0.003 1 ± 0.000 4 vs. 0.006 6 ± 0.000 7;0.003 3 ± 0.000 5 vs. 0.005 6 ± 0.000 6,P < 0.01),Smad5基因mRNA表达较正常对照组减低(0.001 7 ± 0.000 3 vs. 0.004 2 ± 0.000 4,P < 0.05),SLE患者与正常对照组BMP-2基因mRNA表达水平无统计学差异(0.006 9 ± 0.002 0 vs. 0.010 5 ± 0.002 1,P > 0.05)?SLE患者组血清RANKL表达较正常对照组明显增高(P < 0.01),OPG表达在两者间无明显统计学意义(P > 0.05),SLE血清OPG/RANKL较正常对照组明显减低(P=0.006)?相关性分析显示,SLE患者Smad8 mRNA水平?OPG/RANKL均与血沉呈正相关 (P < 0.05)?OPG mRNA水平与Smad8 mRNA表达水平呈正相关P <0.01,而RANKL与Smad1 mRNA基因表达呈负相关(P < 0.01)?结论:SLE患者体内BMP/Smads系统基因表达存在异常,可能与SLE的骨代谢异常相关?     

肿瘤坏死因子 -α抑制剂对未使用糖皮质激素类风湿关节炎患者骨代谢水平的影响

目的: 探讨未使用糖皮质激素类风湿关节炎(RA)患者骨代谢变化及其影响因素,并研究肿瘤坏死因子α(TNF α)抑制剂(注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白,强克)的治疗作用。方法: 选择在我院住院诊治的65例未使用糖皮质激素的RA患者,测定血清中Ⅰ型胶原C 末端肽(CTX)、Ⅰ型胶原氨基端前肽(PINP)与骨钙蛋白的含量,并与红细胞沉降率(ESR)、C 反应蛋白、类风湿因子(RF)等因素进行相关分析。对照组为我院57例健康体检人员。给予30例RA患者皮下注射强克25 mg,每周2次,3个月后再次测定骨代谢指标,分析治疗前后的变化。结果： ① RA患者血清CTX含量(511.37±204.48) ng／L明显高于对照组［(391.62±143.68) ng／L, P<0.05］,血清PINP含量(42.19±15.39) μg／L明显低于对照组［(49.61±15.42) μg／L, P<0.05］。② RA患者血清CTX含量与其年龄、DAS28评分、ESR、C反应蛋白呈明显正相关(r分别为0.483、0.367、 0.410、0.361,P均<0.01),血清PINP、骨钙蛋白含量与病程呈正相关 (r分别为0.272、0.303, P均<0.01)。③ RA患者接受TNF α抑制剂治疗后,血清PINP、骨钙蛋白含量均较治疗前明显升高［(80.79±63.88) vs (60.23±45.93) μg／L, P<0.05; (22.13±14.46) vs (16.74±8.46) μg／L, P<0.05］。 结论： RA患者破骨增高、成骨降低;骨代谢水平主要与病程、疾病活动度相关;予以TNF α抑制剂治疗后骨代谢水平有所改善。