环介导等温扩增技术用于HCV基因分型的初步研究

目的建立适用于临床的常见HCV基因型的快速、敏感、有效的核酸逆转录环介导等温扩增技术(RTLAMP)。方法根据不同HCV亚型的标准序列设计HCV-1b、2a、3b和6a型特异性引物,建立及优化针对各HCV亚型的RT-LAMP试验方法;收集55例已确认为HCV RNA阳性的临床标本做检测及分型。结果本组HCV-RNA阳性标本,运用LAMP法的检出率为94.55%(52/55),其中HCV-1b型占40.38%(21/52)、2a型占9.62%(5/52)、3b型占23.08%(12/52)、6a型占26.92%(14/52)。结论建立了针对不同HCV基因型的LAMP检测方法,该法快速、敏感,适合于在临床应用。     

肝癌患者肠道微生态结构变化的特点分析

目的探讨原发性肝癌患者肠道菌群结构的变化。方法选择2017年9月至2018年12月广东省第二人民医院诊疗的原发性肝癌患者87例,另取健康体检者80名作为健康对照。制备微生物基因组DNA后Illumina平台进行高通量测序。结果原发性肝癌组和健康对照组间α多样性差异无统计学意义(P>0.05)。肝癌组拟杆菌门和变形菌门所占百分比为(56.41±4.63)%和(9.26±1.82)%,显著高于健康对照组的(53.32±4.22)%和(7.42±1.16)%(均P<0.05)。肝癌组厚壁菌门和放线菌门所占百分比为(32.62±3.75)%和(0.34±0.05)%,显著低于健康对照组的(37.25±4.13)%和(0.62±0.11)%(均P<0.05)。肝癌组拟杆菌属和大肠杆菌螺旋杆菌属所占百分比为(50.83±4.15)%和(11.35±1.87)%,显著高于健康对照组的(42.45±3.84)%和(8.52±1.71)%(均P<0.01)。肝癌组双歧杆菌属和梭菌属所占百分比为(21.13±3.64)%和(10.44±1.25)%,显著低于健康对照组的(28.54±4.13)%和(14.28±1.52)%(均P<0.01)。结论肝癌患者肠道微生态系统中拟杆菌以及其隶属的拟杆菌门,大肠杆菌螺旋杆菌属属以及其隶属的变形菌门所占比例明显著高于对照组,双歧杆菌属以及其隶属的放线菌门和梭菌属以及其隶属的厚壁菌门所占比例明显著低于对照组。     

小白菊内酯抑制CD34+ CD38- KG-1a白血病细胞的增殖并增强其被allo-NK细胞杀伤的敏感性

目的：探讨小白菊内酯（parthenolide,PTL）对CD34+CD38- KG-1a白血病细胞的增殖、Bcl-2表达及其被同种异体NK（allo-NK）细胞杀伤敏感性的影响。方法：免疫磁珠法从KG-1a细胞中分离CD34+CD38- KG-1a细胞。XTT法检测PTL对CD34+CD38-白血病细胞增殖的影响,Real-time PCR和Western blotting分别检测PTL对CD34+CD38- KG-1a细胞Bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响,LDH释放法观察PTL对CD34+CD38- KG-1a细胞被allo-NK细胞杀伤敏感性的影响。结果：PTL对CD34+CD38- KG-1a细胞增殖的抑制呈剂量（2.5~80 μmol/L)依赖性。PTL浓度为2.5 μmol/L时,PTL组CD34+CD38- KG-1a细胞的增殖抑制率显著高于对照组\[（4.89±1.07）% vs 0,P<0.01\];PTL杀伤CD34+CD38- KG-1a细胞的IC50为20 μmol/L;PTL组CD34+CD38-KG-1a细胞Bcl-2 mRNA \[（0.105±0.007）vs（0.307±0.013）,P＜0.01\]与蛋白表达均显著低于对照组。在效靶比为10∶1,20∶1和40∶1时,allo-NK细胞对PTL组CD34+CD38- KG-1a细胞杀伤率逐步升高,且均高于阴性（无PTL处理）对照组\[(19.76±1.01)%,(30.14±0.96)%和(51.48±3.15)% vs (12.50±1.42)%,(16.90±0.93)%和(31.70±1.53)%（均P<0.01）\];效靶比为40∶1时,allo-NK细胞对PTL组细胞的杀伤效率显著高于阳性（Bcl-2抑制剂ABT-737处理）对照组\[（51.48±3.15）% vs （43.08±2.81）%,P<0.05\]。结论：PTL能抑制CD34+CD38-KG-1a细胞的增殖并增强其被allo-NK细胞杀伤的敏感性,这可能与PTL下调Bcl-2的表达有关。     

不同方法对乙肝病毒血清标志物检测结果分析

目的探讨不同方法对乙肝五项血清学标志物的定性和定量检测的结果并进行对比分析。方法应用酶联免疫吸附实验(ELISA),胶体金免疫检测技术和时间分辨荧光免疫定量检测法(TRFIA)对410例标本进行检测。结果TRFIA方法的灵敏度和特异度高于ELISA法和胶体金法。结论TRFIA方法适合于临床进行乙肝病毒标志物的定量检测。     

259株泌尿系感染的病原菌分布及耐药性分析

目的分析本院泌尿系感染患者的病原菌分布及耐药性,为临床泌尿系统感染的预防和治疗提供实验依据。方法对中段尿培养分离的259株细菌进行菌株鉴定和药敏试验,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测。结果 259株病原菌中革兰阴性杆菌187株,占72.2%(187/259),革兰阳性菌43株,占16.6%(43/259),真菌29株,占11.2%(29/259)。革兰阴性菌中以大肠埃希菌(139株)和肺炎克雷伯菌(22株)为主,产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率分别为55.4%(77/139)和45.4%(10/22);药敏结果显示,革兰阴性杆菌对亚胺培南、美罗培南敏感性较好(100%);革兰阳性球菌对万古霉素、替考拉宁、利奈唑烷敏感性较高(100%)。结论泌尿系感染中以革兰阴性杆菌为主,大肠杆菌为最常见的病原菌,未发现耐万古霉素的革兰阳性球菌。根据药敏结果合理选用抗菌药物对泌尿系感染的治愈与耐药菌株的控制有重要意义。     

血培养和血清降钙素原检测对血流感染者早期诊治的临床价值

目的探讨血培养和血清降钙素原(PCT)联合检测对血流感染患者早期诊治的临床价值。方法对625例患者血标本用酶联荧光分析法(ELFA)测定血清PCT,同时进行血培养,并对23例血培养阳性的重症患者血清PCT进行多次检测和结果分析。结果血培养结果为阴性的患者(阴性组)PCT阳性率为41.01%(0.05~2.58μg/L),血培养结果为阳性的患者(阳性组)PCT阳性率为80.77%(0.05~200.00μg/L)。阳性组PCT阳性率高于阴性组,差异有统计学意义(χ2=65.12,P0.01)。假丝酵母菌、多种细菌、革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌感染患者的PCT阳性率分别为100.00%、100.00%、92.11%和56.81%。对23例血培养阳性的重症患者进行了多次PCT检测,治疗过程中PCT水平逐渐降低者预后较好,PCT10μg/L且持续维持高水平者,其预后较差。结论同时进行血培养和PCT检测对血流感染患者的早期诊治有着重要的临床价值。     

两种方法联合检测对早期先天性梅毒的监控和诊治价值

目的 探讨甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST) 和明胶颗粒凝集试验(TPPA)联合检测对早期先天性梅毒的监控和诊治价值,为临床诊治早期先天性梅毒提供更有价值的实验依据.方法 采用TRUST测定梅毒血清非特异类脂质抗原,采用TPPA测定梅毒血清特异性螺旋体抗体.结果 2007～2010 年受检的1 846人次中,TPPA确证的梅毒特异性螺旋体抗体阳性94 例,检出率为5.09%(94/1 846),而TPPA和TRUST同时阳性仅28例,占总受检人数的1.52%(28/1 846),提示TPPA阳性而TRUST阴性的新生儿仍要定期观察和检查,以便得到及时的诊断和治疗.94 例确证的梅毒特异性螺旋体抗体阳性标本中,TRUST阳性28例,敏感性29.79%,TRUST检出33例阳性标本中,5例经TPPA确证为阴性,特异性为84.85%,TPPA检出梅毒的阳性率明显高于TRUST,差异有统计学意义(χ2=52.41,P＜0.01).2007 年检出新生儿血清特异性螺旋体抗体阳性20例,2008年29例,较2007年增长40.0%,2009年38例,较2008年增长31.0%.由此提示新生儿先天性梅毒其发病率呈逐年上升趋势,已经成为一个不容忽视的公共卫生问题,应该引起大家重视.结论 新生儿胎传梅毒的早期诊断、早期治疗是减少甚至杜绝对患者侵害的最有效方法.母亲在妊娠期内和新生儿出生后在临床监控中同时进行TRUST和TPPA检测,既能提高梅毒血清学的阳性检出率,减少漏检和误判,也可作为观察病程和疗效的指标,以便梅毒患者能得到及时有效的诊治.TRUST 和 TPPA联合检测为临床诊治早期先天性梅毒提供更有价值的实验室依据,更有利于梅毒的监控和诊治.     

新生儿败血症病原学及耐药性分析

新生儿败血症是新生儿时期严重的感染性疾病,发病率及病死率均较高,严重危害新生儿的健康,同时也是导致新生儿死亡的重要原因。它的临床表现缺乏特异性,同时随着新的抗菌药物的不断问世,致病菌也在不断变迁,而且由于抗菌药物的广泛使用,耐药菌株也在不断增多。血培养检出细菌及其耐药性是临床诊治的重要参考,及时了解病原菌的分布情况及耐药情况,对于指导临床用药、减少耐药产生有重要意义。现就我院2007年6月至2008年12月收治的40例血培养阳性患儿的病原菌和药物敏感性结果分析报告如下。     

多药耐药菌的医院感染调查分析

目的 分析多药耐药菌的医院感染情况,减少医院感染,提高医院感染预防控制水平.方法 运用Excel软件收集医院检验系统全年细菌送检的资料,对多药耐药菌医院感染的情况进行统计分析.结果 2008年共检出病原菌2036株,其中多药耐药菌568株,占27.90%;全年发生医院感染463例,其中多药耐药菌医院感染208例,占44.92%.结论 多药耐药菌已成为医院感染的重要病原菌,加强对多药耐药菌的监控,有利于提高医院感染防控水平,控制多药耐药菌传播.     

2009年977例真菌感染的鉴定及药敏分析

目的分析真菌培养各类病原菌的分布情况及主要致病菌的耐药特点,给临床合理使用抗真菌药物提供实验依据。方法各类标本选择沙保罗培养基分离培养,对真菌阳性者进行鉴定和药敏试验。结果真菌培养阳性率为17.4%,977例真菌中白色念珠菌666例,占68.2%;光滑念珠菌173例,占17.7%;热带念珠菌72例,占7.3%;其他占6.8%。4种药物的敏感率:氟立康唑71.4%,伊曲康唑83.1%,两性霉素B96.6%,氟立康唑98.0%。977例真菌以呼吸道感染标本最多,痰标本731例,占74.8%,咽拭子46例,占4.7%,其次是泌尿系感染的中段尿标本79例,占8.1%。结论真菌感染的病原学检查和药敏试验对真菌感染诊断和治疗有着积极的临床价值。