胞嘧啶脱氨酶的原核表达和多克隆抗体的制备

目的：在原核系统中表达并纯化大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（cytosine deaminase,CD)，制备鼠抗大肠杆菌CD多克隆抗体，方法：亚克隆CD基因到原核表达载体pMAL-c2和pBV222中，并转化入大肠杆菌DH5α内，诱导表达并纯化MBP-CD和6his-CD融合蛋白，用纯化的MBP-CD融合蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体。结果：通过重组质粒的酶切筛选出重组阳性克隆，成功地表达和纯化出MBP-CD和6his-CD融合蛋白，用纯化的MBP-CD成功制备了鼠抗CD多克隆抗体，并用6his-CD和GST-CD重组蛋白进行Western印迹分析，证实了抗体的正确性，结论：应用多克隆抗体可以检测体内外CD基因的表达，为临床前和临床上深入开展CD基因的生物治疗研究提供重要的实验材料。     

幼儿园566名儿童体检结果的启示

我们从1992年开始至1994年6月，对我部幼儿园2～6岁的566名儿童检查了血红蛋白、身高、体重、胸透等项目。并以1991年版《实用儿科学》和1985年九省市正常儿童体格发育标准中的有关数据为依据，对结果进行评价。1体检结果调查566名儿童，血红蛋白合格率为970％（54／566），身高、作重、胸透合格率分别为98．8％（559／566）、82．9％1469／566）、99．5％（563／566）。四项体检结果显示，我部幼儿园儿童的体质基本上是好的，符合3～7岁儿童生长发育规律。2讨论以上结果给我们保健工作提供了以下启示：2.1要认真做好幼儿入园前的体检部队流…     

醒脑静注射液治疗肺性脑病31例疗效分析

目的 :探讨醒脑静注射液治疗肺性脑病的临床疗效。方法 :采用随机分组对照法 ,将 6 1例肺性脑病患者分为加用醒脑静组 (治疗组 ) 31例和单纯西药治疗组 (对照组 ) 30例 ,进行疗效对比分析。结果 :治疗组治愈12例 ,有效 15例 ,总有效率 87.10 % ;对照组治愈 5例 ,有效 16例 ,总有效率 70 .0 % ,2组疗效差异有显著性(P<0 .0 5 )。从时效关系看 :治疗组对意识障碍的起效时间〔(72 .0 0± 33.94 )小时〕明显快于对照组〔(117.71± 34.70 )小时 ,P<0 .0 1〕,表现为促醒时间短 ,意识恢复正常快 ,并能达到镇静安神的作用 ;从改善原发病症状、体征及血气指标看 :治疗组在改善头痛、失眠、多语、幻觉、谵妄、狂躁及喘憋等症状方面明显优于对照组 (P<0 .0 5 ) ,对降低 Pa CO2 效果亦明显优于对照组 (P<0 .0 1)。结论 :醒脑静注射液具有开窍醒脑、行痰通瘀、镇静止痉和清热解毒等功效 ,是防治肺性脑病的安全、有效药物。     

发热门（急）诊的消毒隔离

医院在易于隔离的地方设立相对独立的发热门(急)诊，并采取严格的消毒隔离和防护措施，其目的是实现对传染性非典型肺炎疫情的早期预警和预报，防止疫情进一步扩散、蔓延。     

HPLC-ELSD法同时测定复方产品中10种皂苷类成分的含量

目的：建立高效液相色谱串联蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)同时测定复方产品中红景天苷、刺五加苷B、刺五加苷E、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3和人参皂苷Rd等10种皂苷类成分含量的方法。方法：采用YMC-Triart C₁₈色谱柱分离,以乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,蒸发光散射检测器检测。结果：在此方法条件下10种皂苷类成分得到了良好的分离。红景天苷、刺五加苷B、刺五加苷E、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3和人参皂苷Rd在0.04～1.00 mg/mL浓度范围内,人参皂苷Rb1在0.08～2.00 mg/mL浓度范围内,线性关系良好,平均加标回收率在98.6%～101.5%之间,方法重复性良好,RSD(n=6)小于3%。结论：该方法操作简便、重复性好、准确度高,可用于复方产品中多种皂苷类成分的质量控制研究。     

脂肪因子Chemerin对骨代谢影响的研究进展

现代社会肥胖人群逐年增多,肥胖相关代谢性骨病的患者也日益增多,严重危害人群健康。Chemerin作为一种脂肪因子,主要由脂肪细胞和肝细胞分泌,在循环中水平高于经典脂肪因子如Leptin和Adiponectin,对全身代谢和免疫发挥重要作用。近年研究发现,肥胖状态下伴随着外周脂肪组织的增多,骨髓内脂肪组织也急剧增加。骨髓内脂肪细胞分泌Chemerin,通过旁分泌或自分泌方式抑制成骨细胞分化和促进破骨细胞分化以及影响骨髓腔微环境。本文将系统回顾国内外有关Chemerin与骨代谢相关研究的文献,并探讨Chemerin对骨代谢的影响及其机制。     

NAG酶荧光比色测定细胞毒及其应用研究

细胞毒测定作为免疫学的一项基本技术在肿瘤的生物治疗方面已成为检测NK细胞、LAK细胞、CTL细胞、细胞因子活性、药敏实验等一切杀伤活性的必不可少的手段.我室建立的NAG酶荧光比色法测定细胞毒,较经典的~(51)Cr释放     

输日加工食品应对肯定列表制度对策研究

介绍了日本肯定列表制度的基本内容和影响,通过分析加工食品的定义、特点和肯定列表制度中关于加工食品的有关规定,提出了加工食品应对日本肯定列表制度的几点对策,为输日加工食品检验检疫工作提供参考。     

人脂联素球状结构域的表达、纯化和功能鉴定

目的表达和纯化人脂联素（adiponectin,APN）球状结构域并观察其生物学活性.方法用PCR方法复制人脂联素球状结构域（globular domain of adiponectin,gAPN）的cDNA,并克隆于pET28a（＋）原核表达载体中.将重组表达质粒pET28a（＋）-gAPN转化大肠埃希菌BL21（DE3）,37℃培养至A600达到0.6时,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导目的蛋白的表达.细菌经超声破菌,得到粗提的包涵体洗涤变性后经镍柱亲和层析柱一步纯化,获得纯化的gAPN重组蛋白,复性后冻干保存.然后,用链佐星（streptozocin,STZ）诱导的小鼠高血糖模型检测其生物活性.结果IPTG诱导后有Mr约为17 000大小的目的蛋白表达,免疫印迹结果进一步表明,其具有人gAPN的抗原性.表达蛋白主要以包涵体形式存在,占菌体蛋白的30%以上,表达产物经变性、纯化、复性,可获得纯度90%以上的目的蛋白.该重组蛋白能够降低STZ诱导的小鼠高血糖模型的血糖水平.结论在大肠埃希菌BL21（DE3）中成功表达了人gAPN蛋白,经变性、纯化、复性后得到具有生物学活性的蛋白.     

慢性髓系白血病患者中基因SCIN表达及启动子甲基化的临床研究

目的:探讨基因SCIN表达及启动子甲基化在慢性髓系白血病(CML)患者中的临床意义。方法:应用实时定量PCR检测64例CML患者和37例对照骨髓单个核细胞SCIN的表达水平。应用实时定量甲基化特异性PCR结合亚硫酸盐测序PCR检测65例CML患者和29例对照SCIN启动子甲基化水平。结果:CML患者与对照组相比细胞SCIN表达水平明显下调(P=0.010);慢性期、加速期与急变期患者中SCIN表达下调率分别为61%、67%和75%,有增加趋势。Spearman相关性分析显示,基因SCIN表达与BCR-ABL1转录水平呈负相关(r=-0.315,P0.05)。然而,SCIN低表达组与高表达组相比较,在性别、年龄、外周血白细胞数、血红蛋白水平、血小板数量、染色体特征、CML分期及BCR-ABL1转录水平等临床参数中未见差异(P0.05)。CML患者SCIN启动子甲基化水平与对照组比较无统计学差异,且SCIN表达与启动子甲基化水平无相关性(P0.05)。结论:基因SCIN在CML患者中非甲基化依赖性表达下调,可能与BCR-ABL1融合基因致病CML有关;SCIN表达下调可能与CML进展有关。