动物血清替代人血清制备乙肝标志物室间质评物的初步研究

目的尝试制备以胎牛血清(FCS)替代人血清为基质的乙型肝炎病毒(HBV)标志物室间质评样本。方法以FCS作为基质稀释人血清HBV标志物高值样本制备室间质评样本,并对制备样本进行基质效应和互换性实验、均匀性和稳定性评估及初步临床应用。结果使用两种检测方法验证制备样本的可互换性,检测值分布于95%可信区间内,相关性很好。雅培i1000全自动免疫分析仪检测HBV 5个项目[乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)]制备物结果的F值均F界值(F界值=3.02),保存于-20℃和4℃时可稳定1个月以上。20家使用化学发光法[ABBOTT i2000全自动免疫分析仪(简称ABBOTT i2000)]和20家使用酶免法(科华试剂)的实验室HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的变异系数(CV)分别为ABBOTT i2000仪器组7.60%、7.79%、6.37%、13.30%、3.61%,科华试剂组11.67%、14.72%、9.11%、12.30%、9.75%。结论通过试验验证以FCS为基质制备的质评样本的互换性、稳定性和均匀性满足室间质评样本要求,初步认为FCS在一定程度上可以作为基质用于HBV标志物室间质评样本的制备。     

5种C反应蛋白快速检测系统检测性能比较

目的评价目前常用的5种C反应蛋白(CRP)快速检测系统的分析性能。方法对5种CRP快速检测系统(Uppergold U2金标斑点法定量读数仪、NEPHSTAR特定蛋白分析仪、ABX Micros CRP200全自动血液分析仪、i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪和Quik Read 101型检测系统,均使用原厂配套试剂;以A、B、C、D、E随机顺序代表)进行不精密度[变异系数(CV)]、准确度、线性、抗干扰能力性能评价,对参考区间进行验证,并以Dade Behring BN Pro Spec全自动血浆蛋白分析系统(简称DADE系统)作为参照系统进行比较。结果 5种CRP快速检测系统的批内精密度和批间精密度为1.01%~16.91%,与厂商声明相符,但较DADE系统差。Passing-Bablok回归分析显示5种CRP快速检测系统与DADE系统回归方程的斜率为0.88~1.73,A、B、C 3种CRP快速检测系统与DADE系统的相关性良好,而D、E 2种CRP快速检测系统与DADE系统的相关性则较差。以CRP=50 mg/L为临界值,5种CRP快速检测系统与DADE系统的一致率为92.4%~100%。4种CRP快速检测系统的线性范围为5~160 mg/L,1种为5~100 mg/L。1 500 FTU乳糜、0.2 mg/L游离型胆红素(FBil)、0.2 mg/L结合型胆红素(CBil)和5 g/L血红蛋白(Hb)对检测无干扰,5种CRP快速检测系统的干扰率均<10%。参考区间验证结果显示各检测系统的数据均在厂方提供的参考区间内。结论 5种快速检测系统的主要分析性能能够满足临床需求,但5种CRP快速检测系统的结果与DADE系统之间存在一定的偏倚,在解释临床结果时应予考虑。     

2015—2019年上海地区25-羟基维生素D室间质量评价结果分析

目的分析2015—2019年上海地区25-羟基维生素D[25(OH)D]项目室间质量评价(EQA)结果,为提高25(OH)D检测质量提供依据。方法收集2015—2019年上海市临床检验中心(SCCL)25(OH)D项目的10次EQA结果,剔除离群值后计算各组均值(x)、标准差(s)和变异系数(CV)。结果参加SCCL 25(OH)D项目EQA的实验室数从2015年的41家增加至2019年的83家,5年内10次EQA的合格率分别为65.85%、74.70%、82.00%、83.67%、90.91%、87.50%、86.67%、91.89%、92.68%、92.77%。参评实验室的检测方法主要为电化学发光法和化学发光法,少数实验室使用酶联免疫吸附试验和液相色谱串联质谱法。在5年50个批号的EQA样本中,33个批次检测CV<20%,6个批次检测CV为20%~30%,其他批次检测CV均>30%。结论上海地区不同实验室25(OH)D检测结果仍存在较大差异,应加强实验室检测质量管理,推动25(OH)D检测的标准化,促进实验室间的结果互认。     

从贝叶斯公式看严重急性呼吸综合征冠状病毒2抗体血清学检测

病毒抗体的血清学检测,特别是使用免疫层析法的试剂不需要特别的仪器、设备就能完成检测,甚至普通人也可按试剂说明书自行完成检测。假设某个严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)抗体检测试剂盒的准确性为95%(作为筛查试验,检测的敏感性应>95%;作为诊断试验,检测的敏感性和特异性均应>95%^[1]),其意义是在已知患病的情况下,有95%的概率检测为阳性;在已知未患病的情况下,有95%的概率检测结果为正常。这种概率就是阳性预测值的概念。关于阳性预测值有多种算法,本文介绍一种较为简单的算法——贝叶斯公式。     

卫生行业与医药行业相关标准检出限的异同解析

当体外诊断试剂厂商仅按医药行业标准对某个定性检测项目声明了空白限(LoB)时,临床实验室应完成该项目检出限(LoD)的性能验证。文章对多个医学相关个行业标准中LoD、LoB的定义进行分析,并指出其在各文件中的异同。同时将定性项目中C50浓度、C95浓度与定量项目中LoD、LoB的相互联系进行归纳、整理。     

不同文件中多项回归分析线性验证异同分析

2019年,中国合格评定国家认可委员会(China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS)发布了CNAS-GL037《临床化学定量检验程序性能验证指南》,推荐采用多项回归分析来验证线性区间.而最为医学实验室所熟知的多项回归分析验证线性...     

国产抗丙型肝炎抗体检测试剂盒灰区范围的设置

目的设置上海地区临床实验室常用的4种国产抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体(简称抗HCV)检测试剂的灰区范围。方法收集抗HCV临床初检阳性样本656例,分别用荣盛、新波、科华和科美4家国产抗HCV检测试剂进行复检,分别计算初检不同S/CO值范围的复检率;选择抗HCV初、复检结果不一致的弱阳性样本338例,采用确认试验[重组免疫印迹法(RIBA)]进行确认,对RIBA结果为不确定的样本采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测HCV RNA。以RIBA和HCV RNA结果作为金标准,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,探讨其最佳临界S/CO值。以95%真阳性和95%真阴性S/CO值确定4种国产抗HCV检测试剂阴、阳性灰区范围。结果 4种国产抗HCV检测试剂的阴性复检符合率均90%,S/CO值均12.01;阳性复检符合率均95%。荣盛、新波、科华及科美4种国产试剂检测抗HCV的最佳临界S/CO值分别为1.31、2.48、3.22和4.32。分别以95%真阳性率和95%真阴性率确定4种国产抗HCV检测试剂的阳性和阴性临界值,得出荣盛、新波、科华及科美4种国产抗HCV检测试剂S/CO值的灰区范围分别为0.6~1.3、0.7~2.5、0.7~4.0和0.7~4.3。结论确认了上海地区4种常用国产抗HCV检测试剂的最佳临界S/CO值,为临床提供了4种抗HCV检测试剂的灰区范围。     

流式荧光点阵技术在乙型肝炎病毒基因分型中的应用

目的建立一种基于流式荧光点阵技术(又称液态芯片法)的针对乙型肝炎病毒(HBV)基因型B型和C型的检测方法。方法设计HBV B和C基因型的型特异性引物,其中正向引物的5'端作生物素化标记。在多重聚合酶链反应(PCR)扩增后将扩增产物与连接在不同荧光编码微球上的型特异性探针在同一体系中进行杂交,再用链霉亲和素-藻红蛋白进行标记,用Luminex多功能流式点阵仪进行检测。对经测序法基因分型的67例(B型24例、C型43例)样本进行检测,比较并确定方法的有效性。结果本研究所建方法与测序法结果一致的比例为94%(63/67)。在24例测序结果为B型的患者中有1例患者用自建液态芯片法检测显示B型和C型探针双阳性信号;43例测序法结果为C型的患者中有3例患者用自建液态芯片法检测为B型和C型探针双阳性信号。结论自建液态芯片法能准确地进行HBV基因分型,尤其是当患者为HBV混合型感染时,自建液态芯片法能进一步确定不同基因型,在临床应用时更具有优势。