肝细胞癌中TMS1、MBD2和DNMT1的关系及临床意义

目的观察肝细胞癌(HCC)中甲基化相关沉默目标-1(TMS1)、DNA甲基转移酶1(DNMT1)和DNA甲基化结构域2(MBD2)蛋白的表达情况,及TMS1基因启动子的甲基化情况,探讨3个基因的关系及临床诊断意义。方法采用免疫组织化学法(IHC)检测48例肝癌组织和48例对照肝组织中TMS1、MBD2和DNMT1蛋白表达水平的变化。采用甲基化特异性PCR(MSP)检测34例HCC患者、26例乙型肝炎患者和23例健康者血清中的TMS1基因甲基化情况。结果肝癌组织、正常肝组织中TMS1的阳性表达率分别为26.08%、97.92%,MBD2分别为18.75%、80.00%;DNMT1分别为77.08%、32.25%,TMS1、MBD2在肝癌组织中的阳性表达率均低于正常肝组织,而DNMT1阳性表达率高于正常肝组织,差异均有统计学意义(P0.05)。TMS1、MBD2与DNMT1的表达均呈负相关(P0.05)。TMS1蛋白表达水平与年龄、性别无相关性,而与肿瘤的TNM分期和分化程度相关(P0.05)。HCC组、乙型肝炎组、健康者组TMS1基因甲基化检出率为70.6%、50.0%和0.0%,差异均有统计学意义(P0.05)。HCC组、乙型肝炎组的甲基化检出率明显高于健康者组,并随着肿瘤分级、分期的增加而升高。结论 TMS1高甲基化可能是肝组织癌变的早期事件,TMS1、MBD2和DNMT1蛋白异常表达在HCC的发生、发展等过程中起着重要的作用,三者可作为肝癌早期诊断和判断预后的新生物学指标,并可成为HCC治疗的新靶点。     

10%中性缓冲福尔马林固定石蜡包埋DNA质量分析

目的 探讨经10%中性缓冲福尔马林固定的石蜡包埋淋巴结组织中DNA质量。方法 选择储存10年以内经10%中性缓冲福尔马林固定、固定时间6-24 h内的淋巴结活检标本,每年4例,提取DNA后检测DNA浓度及A260/A280比值,采用内参分子量标准对提取的DNA进行PCR扩增后行毛细管电泳DNA片段化分析。结果 10年间样本DNA浓度及A260/A280值无明显差异,而DNA片段长度有明显差异。结论 10%中性缓冲福尔马林固定石蜡包埋淋巴结组织储存5年之内的标本提取的DNA可用于目前大多数的基因检测平台,而储存5年以上的标本DNA片段化明显,不能满足检测要求。     

α-B crystallin在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的检测α-B crystallin在乳腺癌中的表达，并探讨其在乳腺癌中表达的意义。方法应用组织芯片及免疫组织化学法对180例乳腺浸润性导管癌、17例导管原位癌及20例正常乳腺组织中α-B crystallin以及雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、HER2和Ki67的表达进行检测；根据最近提出的乳腺癌分子分型进行分组，对α-B crystallin在不同分组中的表达及与其他临床病理特征的关系行统计学分析。结果①α-B crystallin在乳腺导管原位癌的阳性率为41.17%（7/17），浸润性导管癌的阳性率为67.22%（121/180），两组间差异有统计学意义(P＜0.05）；②在浸润性导管癌中，α-B crystallin在淋巴结转移组阳性率为83.33%（81/96），无转移组阳性率为48.81%（41/84），两组间差异具有统计学意义（P＜0.01，r=0.368?8)；③在分子分型各组中α-B crystallin的表达差异具有统计学意义（P＜0.05）；其中LuminalA组与HER2+组及三阴性组两两比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论α-B crystallin在乳腺浸润性导管癌中的表达明显高于导管原位癌，与淋巴结转移呈正相关，且在生物学行为更为恶性的HER2+组和三阴性组具有更高的表达水平，提示α-B crystallin蛋白可能参与了乳腺癌的浸润与转移过程。     

肾活检9825例临床病理分析

目的探讨山东地区肾穿刺活检患者病理类型的分布特点以及疾病谱的变迁。方法收集2014年1月至2018年10月共计9 825例肾活检患者的临床病理资料,对本地区肾脏疾病的临床病理特征进行回顾性分析。结果 9 825例病例中男女比例为1.22∶1,发病高峰年龄为40～60岁。其中原发性肾小球疾病7 524例,占所有病例的76.58%,常见的病理类型依次为膜性肾病(53.08%),IgA肾病(25.23%)和微小病变性肾小球肾炎(15.47%),膜性肾病构成比呈逐渐增加趋势。在继发性肾病中,最常见为狼疮肾炎(21.08%);其次为糖尿病肾病(18.70%)和高血压肾损伤(17.26%)。结论本地区肾脏疾病多见于中年人,以原发性肾小球疾病最常见,其中膜性肾病和IgA肾病是最多见的病理类型,膜性肾病的检出明显高于全国其他地区,且有增高趋势。继发性肾小球疾病以狼疮肾炎、糖尿病肾病及高血压肾损伤为常见。     

219例弥漫性大B细胞淋巴瘤免疫表型及遗传学特征分析

  目的  探讨国内弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）免疫表型分型及BCL-2和BCL-6基因异常的分布情况。  方法  应用组织芯片和免疫组织化学法及FISH技术对219例DLBCL的免疫表型及BCL-2和BCL-6基因异常进行检测,根据Hans法进行分型;并收集国内7家相关研究报道,进行综合分析。  结果  本组研究结果:219例DLBCL中,非GCB型（165例,75.3%）显著高于GCB型（54例,24.7%）（P < 0.001）。BCL-2基因异常共49例（25.8%）,其中t （14;18）5例（2.6%）均为GCB型;BCL-2基因扩增44例（23.2%）,GCB型4例（8.5%）,非GCB型40例（28.0%）,有显著性差异（P=0.013）。BCL-6基因重排共42例（22.1%）,GCB型7例（14.9%）,非GCB型35例（24.5%）,差异无统计学意义（P=0.189）。BCL-2基因扩增和BCL-6基因重排呈显著负相关（r=-0.180,P=0.013）。8组综合分析:1 259例中非GCB型（879例,69.8%）明显高于GCB型（380例,30.2%）（P < 0.001）;免疫表型中CD10和MUM1阳性率组间差异较小（P=0.047和P=0.048）,而BCL-6及BCL-2阳性率组间存在明显差异（P < 0.001）。  结论  我国DLBCL患者在主要免疫表型和遗传学特征方面具有独特性,对此值得进行深入研究。      

弥漫性大B细胞淋巴瘤C-MYC基因异常分析

  目的   探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL) MYC基因异常情况及其与BCL-2、BCL-6基因异常的关系。   方法   应用组织芯片和FISH技术对194例DLBCL的MYC、BCL-2、BCL-6基因异常情况进行检测, 并用免疫组织化学法检测CD10、BCL-6、MUM-1及Ki-67等蛋白标记物, 分析其相互关系。   结果   在164例MYC基因异常为38例(23.17%), 其中基因易位9例(5.49%), 基因扩增29例(17.68%); 同时存在MYC和BCL-6基因易位有2例, 未发现MYC和BCL-2同时易位或三者同时易位的病例; 资料完整(同时获得三种基因FISH结果) 的159例病例中, MYC基因扩增28例(17.61%) 与BCL-2基因扩增38例(23.90%) 呈显著正相关(r=0.291 6, P=0.000 4);MYC基因易位病例Ki-67高表达率(5/8, 62.50%) 明显高于非MYC基因易位病例(33/149, 22.15%, P=0.027 7), 2例MYC和BCL-6同时易位的病例均为Ki-67高表达, MYC基因扩增与Ki-67高表达无显著相关性。   结论   有关MYC基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的异常改变除基因重排外, 还有基因扩增等活化方式, 目前对其作用机制尚缺乏了解, 值得进行深入研究。      

不同固定液对肾穿刺活检组织固定及染色差异的比较

肾穿刺活检是诊断肾脏疾病的重要手段。目前开展肾脏病理的医院寥寥无几。山东省交通医院自2010年3月与济南齐鲁医学检验所合作接收来自全省的肾穿刺活检远程邮寄病理检验标本以来,截至2013年12月共接收3216例,前后选择4种固定液用于光镜标本的固定,对其染色结果进行比对分析如下。     

黏蛋白(MUC1、MUC2、MUC5AC和MUC6)在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的检测黏蛋白(MUC1、MUC2、MUC5AC和MUC6)在乳腺浸润性导管癌中的表达,并探讨其临床病理学意义。方法收集207例乳腺浸润性导管癌标本,应用组织芯片以及免疫组化等技术对黏蛋白家族成员M UC1、M UC2、M UC5AC和M UC6进行检测,并对其与临床病理学特征的关系进行分析。结果 M UC1在89.4%的被检测病例中表达。MUC1高表达的乳腺癌病例更倾向于具有低组织学级别、雌激素受体(ER)阳性、无淋巴结转移等特点。MUC1的亚细胞定位,即胞浆伴胞膜表达与乳腺癌术后复发转移具有相关性。MUC2的阳性率很低,仅为4.3%。MUC5AC与MUC6在患者标本中的表达率分别是42.0%和22.2%。除了MUC5AC与低级别导管癌、ER阳性有关,以及MUC6与HER-2呈正相关外,与乳腺癌其他因素均无明显相关性。结论 MUC1在大多数乳腺浸润性导管癌中都有表达,而MUC2、MUC5AC及MUC6的表达率则相对较低。MUC1的异位表达可能是潜在的预后不良因素。     

毛细管电泳技术在T细胞淋巴瘤诊断中的应用

目的 淋巴瘤的发生被认为是B或T淋巴细胞被阻断在其分化过程中某一阶段而造成淋巴细胞的克隆性增生所致.多数淋巴系统增生性疾病通过组织形态学和免疫表型分析能够明确诊断,但对于T细胞淋巴瘤(T cell Lymphoma,TCL)的诊断,仅凭形态学与免疫表型分析难以明确.本研究旨在探讨毛细管电泳技术在TCL诊断中的应用价值.方法 回顾性分析2014-01-04-2015-06-30齐鲁医学检验所经形态学和免疫组织化学诊断的TCL和不能明确诊断的淋巴组织增生性病变共63例,利用毛细管电泳基因片段分析技术分析基因重排产物的克隆性.结果 25例TCL中,T细胞受体-G(T-cell receptor G,TCRG)、TCRB、TCRD基因重排的检出率分别为88.0%(22/25)、72.0%(18/25)和20.0%(5/25),三者联合检出率为96.0%(24/25).38例未明确诊断的淋巴组织增生性病变中,21例为多克隆性增生.结论 毛细管电泳基因片段分析对TCL的诊断能够提供遗传学的支持,并且对形态学及免疫组化不典型或疑难病例可以提供诊断方向,利于TCL的病理诊断及鉴别诊断.     

乳腺癌中不同克隆号HER-2抗体IHC与FISH检测结果比较

目的 3种不同克隆号人表皮生长因子受体2(HER-2)抗体的免疫组织化学(IHC)检测结果与荧光原位杂交(FISH)检测结果进行比较,为实验室选择合适的HER-2抗体提供依据。方法选择3种不同克隆号的HER-2抗体,对268例浸润性乳腺癌标本进行检测,并与HER-2基因的荧光原位杂交检测进行比较。结果 HER-2的3种抗体的结果分别为克隆号SP3IHC结果3+66例;克隆号EP3IHC结果3+53例;Polyclonal Her-2抗体IHC结果3+80例,差异有统计学意义(P0.05)。与FISH结果的一致性Kappa值分别为0.76、0.67、0.56。结论 HER-2的IHC检测以选择单克隆抗体优先,建议优先选择克隆号SP3抗体。