沃辛瘤35例临床分析

目的：探讨沃辛瘤的发病及临床诊治特点。方法：对近10年来收治的35例经病理证实的沃辛瘤患者的临床资料进行统计分析。结景：肿瘤全部发生在腮腺。多见于50～70岁的男性，平均年龄56．9岁，男女之比为10．7：1。肿瘤位于腮腺后下极31例，占88．5％。同侧多灶性或双侧发生4例，占11．4％。吸烟者占全部病例71．4％(25例)。治疗采用全腮腺或浅叶 肿物切除术，无复发病例。诘论：腮腺后下部淋巴结与其中的迷走涎腺组织是肿瘤发生的组织学基础，吸烟和高龄免疫功能改变可能是肿瘤发生的主要刺激因素，采用肿瘤与不同范围腮腺组织切除术可达治愈效果。     

人胚骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导分化及生物学特性检测

目的获得从人胚骨髓基质干细胞诱导分化的成骨细胞。方法采用5月龄人胚长骨,Hank‘s液冲洗骨髓腔,细胞成分经离心沉淀后以含质量浓度20％胎牛血清、2 mmol／L的L-谷胺酰胺、100 U／ml青霉素、100μg／ml链霉素的α-MEM培养液重悬,在37℃、体积分数5％CO2浓度,饱和湿度条件培养箱中培养,换液时去除未贴壁血细胞成分。传代后在培养液中加入钙化诱导剂(10-7 mol／L的地塞米松,500μg／ml的VitC,1μmol／L的β-甘油磷酸),对各代细胞进行形态学观察,绘制细胞增殖曲线,Vonkossa染色法检测钙化结节形成,比色法检测细胞中碱性磷酸酶含量。结果细胞形态为星形、多角形,带突触,核圆,居中,有2～3个核仁。细胞增殖曲线显示4～6代细胞增殖活性最强。Vonkossa染色显示有钙化结节形成,比色法可定量检测出各代细胞中碱性磷酸酶含量。结论人胚骨髓基质干细胞经定向诱导分化,形成具有典型生物学特征的成骨细胞。     

组织工程学中的种子细胞移植免疫学问题研究

组织工程是应用组织与器官修复与功能重建的的新兴交叉学科,是研究异基因种子细胞的来源与由此而产生的细胞移植免疫学问题,从其免疫反应发生的类型特点与检测方法,免疫耐受诱导与建立,以及降低异基因种子细胞免疫原性的方法等方面的问题。特别对采用组织工程方法,纯化细胞培养去除抗原呈递细胞和杂细胞的方法,以及通过酶消化使细胞表面抗原变性或减弱、深低温冻存降低细胞表面活性、添加生长调节因子对免疫反应产生抑制作用、采用微孔支架和微囊包被等对细胞起到免疫隔离作用、基因治疗技术等移植前细胞处理降低免疫原性的方法进行了进一步的探讨,展示了异基因种子细胞在组织工程研究中的应用前景。     

口腔光动力疗法研究进展

光动力学疗法(PDT)是20世纪70年代末形成的治疗新技术,近年来已从实验研究进入到临床应用阶段,其机理是建立在某些特定类型的细胞或生物体能选择性吸收光敏型的药物,在接受特定波长光照射后产生光敏效应的一种治疗方法.目前主要应用于体表和空腔脏器表面的浅表肿瘤的非手术治疗,由于发现光敏剂对肿瘤以外的多种病变组织和病原微生物具有选择件聚集以及新型光敏剂的开发,使光动力疗法在现代临床中应用领域不断扩大.从光动力治疗的效应机制、光动力治疗的光源与光敏剂以及在口腔医学领域中对头颈部肿瘤、黏膜病、口腔致病微生物感染的治疗等方面的应用研究进展进行了综述.     

口腔光动力疗法研究进展

光动力学疗法(PDT)是20世纪70年代末形成的治疗新技术,近年来已从实验研究进入到临床应用阶段,其机理是建立在某些特定类型的细胞或生物体能选择性吸收光敏型的药物,在接受特定波长光照射后产生光敏效应的一种治疗方法.目前主要应用于体表和空腔脏器表面的浅表肿瘤的非手术治疗,由于发现光敏剂对肿瘤以外的多种病变组织和病原微生物具有选择件聚集以及新型光敏剂的开发,使光动力疗法在现代临床中应用领域不断扩大.从光动力治疗的效应机制、光动力治疗的光源与光敏剂以及在口腔医学领域中对头颈部肿瘤、黏膜病、口腔致病微生物感染的治疗等方面的应用研究进展进行了综述.     

充填体底壁人工脱矿的光学相干断层成像观察

目的 采用光学相干断层成像技术(optical coherence tomography,OCT)观察充填体下窝洞底壁人工酸蚀脱矿模型的成像特点。方法 选用36颗牙面光滑、无釉质破损和色素沉着的人离体前磨牙,在牙冠颊面制备"长×宽"为"3 mm×3 mm"的,深度在0.6~1.0 mm的Ⅴ类洞,随机分为3组,每组12颗。实验A组窝洞底壁用格鲁玛酸蚀剂酸蚀2 min,实验B组酸蚀5 min,空白对照组不做酸蚀处理。各组样本牙窝洞均使用复合树脂充填,在充填前后采用OCT系统对窝洞底壁、充填体扫描成像,而后作充填后牙样本近远中向的X-ray投照平片观察窝洞底壁的酸蚀改变。结果 充填前窝洞OCT扫描成像显示空白对照组未酸蚀底壁釉质光滑,在表面强反射亮带下可以看到清晰釉质、牙本质层散射信息和釉牙本质界;酸蚀实验组形成窝洞底壁的明显脱钙背向散射层。窝洞充填后OCT扫描成像显示充填体可完整成像;未酸蚀底壁则显示有清晰底壁反射亮带,酸蚀底壁为光信号吸收无显像,二者具有明显不同的成像特点。X-ray投照平片未能发现底壁部位釉质密度改变。结论 OCT可以对牙充填体及其底壁牙体组织成像,酸蚀脱矿的牙体底壁与未酸蚀者有明显不同的成像特点。该方法 有助于判断充填体底壁早期继发龋的脱矿改变,与传统X-ray检测方法相比具有明显的优越性。?     

人胚胎骨骨膜来源成骨细胞的分离培养与生物学特性

背景：胚胎骨来源成骨细胞因其低免疫原性和高增殖与成骨活性有可能成为适用于骨组织工程方法异体骨组织缺损修复的种子细胞。冻存复苏后的生物学特点是否能进行进一步临床应用研究有待证实。 目的：建立人胚胎骨骨膜来源成骨细胞的分离培养、保存方法,观察骨膜来源成骨细胞生物学特点。 设计、时间及地点：细胞形态学与生物学特性实验研究,于2005-04/2006-05在天津市口腔医院细胞与组织工程实验室完成。 材料：细胞来源为5月龄自然流产胎儿,产妇及家属知情同意,无菌条件下取长骨骨膜组织。 方法：采用组织块法对成骨细胞进行原代培养,传代培养细胞液氮冻存3~6个月后,选择不同代次细胞复苏培养。 主要观察指标：通过形态学、超微结构,细胞增殖曲线,钙结节Von kossa法染色以及细胞内碱性磷酸酶定量检测与钙钴法染色确定其增殖与成骨活性。 结果：组织块法培养骨膜来源成骨细胞第6天即可获得原代细胞增殖,传代扩增细胞具有典型成骨细胞形态学和生物学活性。苏木精-伊红染色密集融合的成骨细胞与细胞外基质显示转化为脊样骨组织结构排列。经统计学分析定量检测成骨细胞碱性磷酸酶活性与细胞密度有线性正相关关系。液氮冷冻保存后复苏培养复层成骨细胞钙钴法碱性磷酸酶染色阳性率在45%以上,超微结构显示为高分化功能活跃成骨细胞。 结论：胚胎骨骨膜来源成骨细胞具有良好的增殖与成骨活性。深低温液氮冻存成骨细胞复苏后仍能连续传代增殖并具有良好的成骨代谢活性,能够体外借助细胞外基质形成骨样结构。     

体外连续传代培养人腮腺腺上皮细胞的观察

实验于2004-11/2005-03在天津市口腔医院中心实验室完成。取材于一成年人腮腺良性肿瘤切除后弃用的正常腮腺组织。首先制备鼠尾胶原,取成年大白鼠2只,无菌条件下抽取鼠尾肌腱筋膜,收集浸泡在500mL1g/L的冰醋酸中,铺被时将胶原冰醋酸溶液浸润培养板和培养瓶底壁,与盛有氨水烧杯一同放置在一无菌器皿中,在37℃温箱中保存72h。然后采用酶消化法从腮腺组织分离培养腺上皮细胞,以鼠尾胶原作培养底物,在1∶1DMEM/F12培养基中加入胰岛素、异丙基肾上腺素、氢化考的松等生长刺激因子,倒置显微镜下观察原代及传代细胞形态学特征。结果表明腮腺上皮细胞原代培养4d时成极性排列,形成大小不等的腺腔与导管样结构。腮腺上皮细胞传代培养在50d的培养周期中传代至F3代,F3代细胞液氮冻存后复苏成活。苏木精-伊红染色见细胞体积较大,胞质丰富核膜清晰,1～2个核仁,部分可见核分裂相,无异常核分裂相。     

口腔光动力疗法研究进展

光动力学疗法(PDT)是20世纪70年代末形成的治疗新技术,近年来已从实验研究进入到临床应用阶段,其机理是建立在某些特定类型的细胞或生物体能选择性吸收光敏型的药物,在接受特定波长光照射后产生光敏效应的一种治疗方法.目前主要应用于体表和空腔脏器表面的浅表肿瘤的非手术治疗,由于发现光敏剂对肿瘤以外的多种病变组织和病原微生物具有选择件聚集以及新型光敏剂的开发,使光动力疗法在现代临床中应用领域不断扩大.从光动力治疗的效应机制、光动力治疗的光源与光敏剂以及在口腔医学领域中对头颈部肿瘤、黏膜病、口腔致病微生物感染的治疗等方面的应用研究进展进行了综述.     

人腮腺细胞分离培养的初步观察

目的从人体腮腺组织分离培养获得具有体外增殖能力的涎腺细胞。方法取成人腮腺良性肿物切除的腮腺组织,将组织块在无菌条件下剪出小腺叶,剪成1 mm2大小碎块。用质量浓度10％的Ⅰ型胶原酶10 ml消化20 min,用质量浓度0．25％胰蛋白酶10 ml消化15 min。收集2次消化细胞悬液,离心获得细胞沉淀。以15 ml含用质量浓度10％胎牛血清、2 mmol／L L-谷胺酰胺、100μg／ml链霉素、100 U／ml青霉素、5μg／ml人胰岛素、5μg／ml氢化考的松、2μg／ml异丙肾上腺素的DMEM和F12培养基各占50％的培养液重悬细胞沉淀,计数细胞总量为2．5×105。在预先铺被鼠尾胶原的6孔板的3个孔中,每孔播种细胞悬液5 ml。培养板置37℃、体积分数5％CO2,饱和湿度条件培养箱中培养。