军团菌病常用治疗药物的敏感性研究

嗜肺军团菌是引起人类军团病的重要病原体,治疗军团病的首选药物是红霉素。近年来,新大环内酯类抗生素及喹诺酮类抗生素被推荐用于军团病的治疗。本文就嗜肺军团菌对大环内酯类和喹诺酮类药物的抗菌机制、药代动力学及其敏感性做一简要概述。     

荧光定量聚合酶链反应检测临床痰液标本中军团菌

目的建立快速、特异、敏感的TaqMan探针荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法,用于检测军团菌16SRNA基因。方法军团菌标准菌株购自美国标准菌种收藏所,临床痰标本取自南方医科大学南方医院257例病原不明肺炎住院患者。提取菌种DNA及临床痰标本DNA,通过对标准菌株及临床痰液标本DNA分别进行待考核试剂与16SrRNAPCR检测及测序,验证待考核试剂方法的敏感性、特异性。结果荧光定量PCR检测灵敏度为10cfu/mL,比16SrRNA定性PCR检测灵敏度381cfu/mL高38倍。257例病原不明肺炎患者的临床痰标本细菌培养检出嗜肺军团菌血清型1型1例。待考核试剂和16SrRNAPCR方法检测阳性率分别为8.95(23/257)和8.95(23/257),其中2例不符合,1例待考核试剂阳性16SrRNAPCR方法阴性,另一例16SrRNAPCR方法阳性,待考核试剂阴性。二者总符合率为99.22(255/257),其中阳性符合率为95.65(22/23),阴性符合率为99.57(233/234)。结论待考核试剂荧光定量PCR检测军团菌标准菌种敏感性强,特异性好,用于临床痰标本军团菌检测时假阳性率为4.35,与16SrRNAPCR方法及测序比较具有较好的符合性和等效性。     

军团菌选择性培养基及其应用研究

军团菌广泛存在于自然水系、湿地、沼泽以及人工水系中，革兰阴性杆菌，可引起人类军团菌肺炎以及庞蒂亚克热。主要经呼吸道感染，气溶胶是军团菌传播传染的重要载体。近年来，随着城市化的发展，空调、供水系统的广泛应用，军团菌病在城市中的影响越来越大。军团菌分离培养一直是军团菌检测的“金标准”，而培养阳性率的高低关键取决于培养基的选择。     

临床痰液标本军团菌检测方法研究

目的探讨荧光定量PCR、PCR-酶切分型及16SrDNA基因测序三种方法在检测临床痰液标本军团菌方面的应用价值。方法对274例肺部感染患者痰液标本作军团菌分离培养,荧光定量PCR、PCR-酶切分型及16SrDNA基因测序检测。结果274份痰液标本细菌培养均为阴性,经荧光定量PCR检出军团茵阳性13例（4．74％）,其中10例经PCR．酶切分型及165rDNA基因测序检测为军团菌阳性,其余261例检测为阴性。结论荧光定量PCR、PCR-酶切分型及16SrDNA基因测序均可用于临床痰液标本军团菌的检测,PCR-酶切分型是一套更合理的检测方法。     

实时荧光定量PCR检测痰标本中军团菌属

目的建立荧光定量PCR方法,用于检测军团菌属特异性16S rRNA基因,并探讨广州地区军团菌属感染状况。方法利用军团菌属特异性16S rRNA基因保守序列设计引物和探针,优化反应条件和反应体系,对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌及其他细菌进行检测,验证该方法的特异性、敏感性、重复性,对广东省中医院采集的532例肺部感染患者痰液标本进行检测。结果该方法检测军团菌属所有标准菌株均出现阳性信号,其他非军团菌属细菌检测结果均为阴性;检测灵敏度为102CFU/ml,临床检测532例肺部感染患者的痰液标本,荧光法检出军团菌阳性43例,阳性率为8.08%,16S rRNA PCR法加基因测序验证阳性率为7.71%,两者检测结果差异无统计学意义,表明其具有较好的符合性和等效性。结论 16S rRNA基因荧光定量PCR法检测患者痰液标本中军团菌属,具有快速、敏感、特异等特点,适用于临床军团菌属感染调查及快速检测。