两种DNA抽提方法的操作过程及影响因素分析

DNA是存在于细胞核和线粒体内，携带遗传信息，决定着细胞和个体遗传型的生物信息大分子。随着现代分子生物学研究的不断深入，聚合酶链反应、基因芯片、DNA分子杂交等分子生物新技术的发展，以DNA为材料的分子生物学实验广泛地应用于移植组织配型、法医学、基因诊断、基因克隆等医学领域。而DNA的提取质量直接影响后继的研究与应用，目前常见的方法有盐析法和吸附柱法。尽管各种商品化DNA抽提试剂盒步骤简单、操作方便，易于推广应用，但抽提过程中技术人员的正确操作、专业知识及实践经验对抽提质量有着至关重要的影响。我们实验室自2002年以来，对14000多名中华骨髓库造血干细胞志愿者捐献的血样进行了DNA水平的HLA分型，     

粒细胞特异性NA抗原的检测及临床意义

1 粒细胞特异性NA抗原1960年Lalezari等在研究中性粒细胞减少症的新生儿患者时,报告了第一例中性粒细胞抗体并将其相应的抗原命名为NA1(neutrophil antigen),这种抗体能够凝集50%的白种人粒细胞.     

宁夏回族HLA-A，B，DRB1基因座遗传多态性和单倍型分析

目的:研究宁夏回族自治区地区回族人群HLA-A,B,DRB1基因座的等位基冈及其组成的单倍型频率分布特征.方法:采集宁夏回族122名无关健康个体静脉血,应用聚合酶链反应一序列特异性引物方法对其HLA-A,B和DRB1基因座进行基冈分型.直接计数法统计基因频率,采用最大数学预期值算法计算HLA单体型频率.结果:122名宁夏回族个体的HLA-A,B,DRB1基因座分别检出14,29,13个等位基因.高频等位基因分别为HLA-A*02;HLA-A*11:HLA-A*24;HLA-A*03,HLA-B*35;HLA-B*46;HLA-B*13;HLA-B*51,HLA-DRB1*15;HLA-DRB1*09;HLA-DRB1*07;HIA-DRB1*12.高频单倍型分别为HLA-A*02-B*46:HLA-A*11-B*60;HLA-A*02-B*51;HLA-B*46-DRB1*09;HLA-B*13-DRB1*07;HLA-B*58-DRB1*17;HLA-A*02-B*46-DRB1*09;HLA-A*02-B*58-DRB1*17;HIJA-A*02-B*13-DRB1*12.结论:宁夏回族自治区回族人群HLA基凶座的等位基因和单倍型具有较高的遗传多态性.HLA-A*01-B*37,HLA-A*30-B813,HLA-A* 02-B*50,HLA-B*31-DRB1-10在该民族具有极强的连锁不平衡.     

西安地区回族中性粒细胞NA抗原基因分型

NA（neutronhilantigen）是人类粒细胞中最常见的中性粒细胞特异性抗原之一，分为NA_1和NA_2。其分型对研究民族遗传特性及粒细胞相关疾病有重要意义。国外目前对NA抗原多态性及其与疾病相关性的研究较多[2-7]。而国内所见文献报道甚少。我们参照国外文献，采用多聚合酶链反应一序列特异性引物（PCR－SSP）方法在DNA水平对中国西北地区回族人NA基因抗原多态性分布进行研究，现报道如下。1材料与方法1．1选择对象随机选取回族无血缘关系健康个体104例。1．2仪器与试剂PCR仪（UKHYBAID公司Omn－E自动扩增仪）；紫外照射仪（上海…     

西安骨髓库北方汉族人群HLA-DRB1高分辨多态性

目的了解西安骨髓库北方汉族人群HLA-DRB1基因高分辨多态性分布特点。方法从11755名北方汉族造血干细胞捐献者中随机抽取167名,采用PCR-SSP方法进行高分辨HLA-DRB1基因分型。结果共检出36种等位基因,DRB1*03、DRB1*07、DRB1*09、DRB1*16等未检出多态性,DRB1*03全部表现为0301,DRB1*07全部表现为0701,DRB1*09全部表现为090102,DRB1*16全部表现为160201。等位基因频率最高的前三位是DRB1*15(0.1677)、DRB1*09(0.1407)和DRB1*04(0.1317),等位基因高度集中,DRB1*15多态性以1501为主(87.5%),DRB1*04最具多态性,但很集中,27.27%表现为0405,36.36%表现为0406。结论西安骨髓库北方汉族人群中HLA-DRB1等位基因分布相对集中,多态性分布与白种人和黑人存在差异。     

新的HLA-A等位基因A~*0290的认定

目的确认1个中国人群中的HLA新等位基因。方法使用PCR-SSP和测序为基础的分型技术,分析确认HLA-A的新等位基因与A*02010101的差异。结果先证者HLA-A位点有1个等位基因的核苷酸序列与已知的HLA等位基因均不同,该基因和A*02010101的差异在第2外显子区域的292位碱基C>G,导致74编码子CAC>GAC,编码的氨基酸由组氨酸(His)变成天冬氨酸(Asp)。结论该基因为HLA新的等位基因,2005年10月被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA-A*0290。     

残余危险度在输血传播疾病中的应用

残余危险度是输血传播疾病中较常用的一项指标,反映了受血者经输用“合格”的阴性血而可能成为病毒感染者的危险度。本文介绍残余危险度的概念及计算,举例说明残余危险度的应用,简介世界各国开展残余危险度的研究情况及降低残余危险度的方法。     

西藏部分藏族人HPA、HNA-1血型抗原基因分型

人类粒细胞抗原 (ＨＮＡ)和人类血小板抗原 (ＨＰＡ)在临床输血和疾病相关性方面有着重要的意义。ＨＮＡ主要与输血相关急性肺损伤、发热性输血反应、新生儿同种免疫性粒细胞减少症等相关。ＨＰＡ与输血后紫癜、血小板输注无效、新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜相关。笔者对西藏 3个地区的部分藏族人ＨＰＡ、ＨＮＡ 1血型抗原进行了基因分型 ,报告如下。1　材料与方法1 1　样本来源　西藏阿里、那曲及拉萨地区的无血缘关系藏族随机个体 5 5人 ,静脉ＥＤＴＡ抗凝血 1ｍｌ。ＨＰＡ分型共做5 5例 ,ＨＮＡ 1分型共做 5 3例。1.2　材料　基因组…     

粒细胞特异性NA抗原的检测及其临床意义

1　粒细胞特异性抗原 NA概述　 1 960年 Lalezari等在研究中性粒细胞减少症的新生儿患者时 ,报告了第一例中性粒细胞抗体 ,这种抗体能够凝集 5 0 %的白种人粒细胞 ,并将其相应的抗原命名为 NA1 ( neutrophil antigen)。 1 974年Lalezari和 Radel发现了其等位基因 NA2 ,两者构成双等位基因系统。在二十世纪 70年代陆续发现了其它中性粒细胞所具有的粒细胞特异性抗原 :NB1、NB2、ND1和 NE1等 ,过去报告的 NC1 ,最近被证实和 NA2是同一抗原 [1 ]。在这些抗原中与临床关系最密切的是 NA抗原 ,分子基础较为清楚的也是 NA抗原 ,因此近来…