骨髓基质细胞亚群中多能性相关因子的表达和作用

目的通过检测体外培养人骨髓基质细胞(BMSCs)各细胞亚群中多能性相关因子Sox2、c-Myc和hTert表达水平的影响,探讨BMSCs各细胞亚群多能性和重编程能力的差异。方法采用有限稀释法克隆化培养BMSCs,从快速生长克隆、慢速生长克隆和混合培养BMSCs中各选择3个样本,免疫荧光染色检测Sox2、c-Myc和hTert表达,实时荧光定量聚合酶链反应检测Sox2、c-Myc和hTert mRNA表达,进行统计学分析。结果 Sox2在快速生长BMSCs细胞克隆为细胞核强表达,在其他各组为胞浆表达,Sox2 mRNA在快速生长细胞克隆表达显著高于其他各组(P<0.05)。c-Myc和hTert呈现相似的表达模式,在快速生长细胞克隆和混合培养BMSCs均为细胞核强表达,在慢速生长细胞克隆为胞浆表达,而三组间c-Myc和hTert mRNA表达水平均差异无统计学意义(P>0.05)。结论快速生长BMSCs细胞克隆中多能性相关因子Sox2表达高于慢速生长细胞克隆,提示细胞亚群的克隆形成能力可能与细胞多能性和重编程能力正相关,Sox2可能是细胞未分化性能的关键调控因子。c-Myc和hTert可能存在协同作用。     

细胞重编程及其影响因素

细胞重编程是指分化的细胞在特定的条件下反转恢复到全能性状态,或者形成胚胎干细胞系,或者进一步发生形成一个新个体的过程。重编程诱导体细胞为诱导性多能性干细胞,解决了种子细胞来源的问题。氧化应激、低氧和热处理等微环境改变可启动和诱导核心转录因子激活,启动重编程过程,促使已分化体细胞去分化为未分化状态的前体或干细胞。牙髓细胞和牙周膜细胞拥有干细胞性能,是牙再生的种子细胞。牙髓在受到外伤和炎症刺激时易处于低血低氧状态,低氧状态激活牙髓细胞重编程相关基因表达,恢复牙髓细胞再生能力。微环境改变使分化成熟的细胞去分化为未成熟的更原始细胞,为体细胞诱导多能干细胞提供了新的途径。本文就细胞重编、细胞重编程的作用因素、微环境对VI腔干细胞重编程的作用等研究进展作一综述。     

重编程相关因子在牙髓和牙周组织损伤修复中的表达和作用

目的:探讨重编程相关因子Oct-4、Sox2和c-Myc在大鼠牙髓组织和牙周韧带组织损伤修复过程中的表达及作用.方法:建立大鼠牙髓牙周联合损伤动物模型,HE染色观察4周后牙髓牙本质复合体及牙周附着装置修复情况,免疫组织荧光染色检测重编程相关因子Oct-4、Sox2和c-Myc在牙髓和牙周联合损伤修复动物体内模型的表达和分布.结果:HE染色显示,大鼠牙髓牙周联合损伤4周后,新生的牙髓牙本质复合体及牙周附着装置形成;免疫荧光显示,在体内牙髓牙周组织损伤修复的过程中,Oct-4、Sox2和c-Myc在牙髓及牙周损伤修复的新生组织均明显激活,Oct-4和Sox2呈现相似的表达趋势.结论:Oct-4、Sox2和c-Myc均参与体内牙髓牙本质复合体和牙周附着装置的损伤修复,Oct-4和Sox2呈现相似的表达趋势,提示Sox2和Oct-4可能存在协同调控作用,而c-Myc可能具备独立的功能.     

牙乳头/牙囊细胞交互作用对细胞多能性的作用

目的:研究细胞交互作用对细胞多能性的调控作用。方法:建立牙乳头(DPCs)和牙囊细胞(DFCs)体外共培养模型,二者单独培养的细胞为对照组。采用细胞计数、β-gal染色检测细胞生长和衰老情况;免疫荧光染色检测共培养条件下多能性相关因子Oct-4、Sox2和c-Myc的表达变化;通过ALP活性测试检测矿化诱导后的DPCs和DFCs的矿化能力。结果:共培养组的DPCs和DFCs的细胞数明显高于对照组(P<0.05);培养至第7代时,共培养组的DPCs、DFCs中与衰老相关的SA-b-gal表达较对照组明显减弱(P<0.05);Oct-4、Sox2和c-Myc在共培养组DPCs和DFCs中的表达明显强于对照组;共培养组的DPCs和DFCs经矿化诱导14、21 d后,其ALP活性均显著高于对照组(P<0.05)。结论:DPCs和DFCs可通过体外交互作用抑制细胞衰老、促进细胞的多能性相关因子的表达、提高细胞的矿化能力。