差异筛选肝癌凋亡细胞cDNA文库的简便方法

目的差异筛选人肝癌凋亡细胞ｃＤＮＡ文库。方法消减杂交和点杂交相结合的噬菌斑原位杂交法筛选ｃＤＮＡ文库，首先采用（－）ｃＤＮＡ探针杂交，挑取（－）的噬菌斑克隆，再用（－）和（＋）两种ｃＤＮＡ探针与初筛出的噬菌斑克隆杂交的差异筛选方法。结果得到４个充分孤立的噬菌斑克隆，其插入片段长度为１．５ｋｂ左右。结论该方法简便、快速，是差异筛选ｃＤＮＡ文库的一种较为可行的简便方法。     

ANTI-TUMOR ACTIVITY AND IMMUNE RESPONSES INDUCED BY HUMAN CANCER-ASSOCIATED MUCIN CORE PEPTIDE

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利播仃(Lipostn)肿瘤疫苗诱发BALB/c小鼠的抗肿瘤免疫作用Ⅰ——体液免疫

肿瘤疫苗是主动特异性免疫治疗肿瘤的一种重要手段。目前国际上采用提取或合成肿瘤相关抗原制成疫苗，并已进人临床Ⅰ／Ⅱ期应用，我们提取了一种特异性较好的肿瘤相关抗原。它在正常组织中很少表达，在腺瘤中表达很高．并和我室自制的新型佐剂组成了肿瘤疫苗，取名利播仃(Liposton)。用它免疫BACB／c小鼠诱发机体免疫功能。     

利播仃(Lipostn)肿瘤疫苗诱发BALB/c小鼠的抗肿瘤免疫作用Ⅱ——细胞免疫

前文阐述了利播仃肿瘤诱发BALB／c小鼠的体液免疫．激活B淋巴细胞，使其分泌高滴度、高特异性及有细胞毒的抗体。对于主动特异性免疫治疗肿瘤的疫苗来说，仅有此作用是不够的，必须能激活机体的免疫系统，发挥免疫功能，产生细胞免疫，对肿瘤细胞发起多方位的主动攻击。这就是肿瘤疫苗的主动特异性免疫治疗肿瘤的独特之处。     

癌相关抗原粘蛋白前体诱导人肿瘤引流区淋巴结的细胞毒作用

人肿瘤相关抗原可诱导宿主的细胞免疫反应已被证实。一些肿瘤粘蛋白也证实可诱发T细胞细胞毒作用。本研究是观察从胰腺癌细胞株提取的粘蛋白核芯肽诱导人肿瘤引流区淋巴结细胞的抗肿瘤免疫作用。4例乳腺癌、3例胃癌、3例结肠癌的肿瘤引流区淋巴结手术切除后立即在体外培养于含50μg/ml胰癌核芯肽及50单位IL-2的培养基中,观察其对多种癌细胞的杀伤效应(MMT法)。结果表明体外经胰癌核芯肽刺激后增殖的淋巴结细胞对多种肿瘤细胞有杀伤作用,如结肠癌、胃癌、胰腺癌及白血病细胞K562。本研究结果为以肿瘤粘蛋白核芯肽制备疫苗用于主动特异性免疫治疗或过继免疫治疗打下基础。     

肿瘤混合粘液核芯肽诱发小鼠免疫反应实验研究

我们采用凝胶过滤和密度梯度离心技术从胰腺癌细胞株SW1990细胞匀浆和细胞培养上清中提取了肿瘤粘液，用无水氧氟酸方法去掉糖链后获得粘液核芯肽，经PAGE和SDS-PAGE及免疫印迹分析表明．从细胞匀浆和细胞培养上清提取的粘液为同一成份。分子量为670kD，亚单位为28kD，以二硫链相连，     

磁珠—cDNA作为重复使用的cDNA探针合成模板的研究

~(32)P标记cDNA探针是分子生物学中的一项重要     

肿瘤疫苗(Lipostn)诱导肿瘤引流区淋巴结淋巴细胞的体外溶瘤作用

从12例胃癌患者，6例结肠癌患者引流区淋巴结中分离淋巴细胞，与肿瘤疫苗(Lipostn)中非佐剂部分在体外共培养扩增．借助MTT比色法及^61Cr释放实验研究了淋巴结淋巴细胞在Lipostn的刺激后对抗原表达阳性和阴性的传代肿瘤细胞系的杀伤效应。实验结果表明：(1)．肿瘤引流区淋巴细胞与在无分裂原的刺激下被Lipostn刺激，     

应用消减免疫法制备凋亡肝癌细胞相关蛋白的抗体

目的：探讨消减免疫法在分析肝癌细胞凋亡反应中瞬时表达的某些相关抗原分子的作用。方法：利用消减免疫法制备抗肝癌凋亡细胞相关抗原的抗体；用ＥＬＩＳＡ方法检测抗原、抗体反应。结果：应用消减免疫法制备的抗凋亡肝癌细胞相关抗原的多克隆抗体与肝癌凋亡细胞相关抗原的反应较强；与非凋亡肝癌细胞的抗原反应较弱。其抗原表位主要是蛋白质或多肽。结论：消减免疫法可用于分析肝癌细胞凋亡反应中瞬时表达的相关抗原分子；凋亡过程中有新的蛋白质表达，用该抗体可鉴定肝癌凋亡细胞新的表达蛋白