毒蛇咬伤抢救成功一例报告

毒蛇咬伤抢救成功一例报告第二医院急诊科马富玲，闫素英天津泌尿外科研究所姜埃利毒蛇咬伤在我国有明显的地区分布差异，南多北少。北方地区一旦发生毒蛇咬伤，常因解毒药物来源困难贻误抢救时机。我科收治五步蛇咬伤患者一例，抢救成功。报告如下。患者男性，３２岁，已...     

用糖基化磷脂酰肌醇B7-1锚定肿瘤细胞膜进行免疫治疗

目的 研制抗肿瘤免疫治疗的新疫苗.方法 用蛋白转化法将B7-1锚定在肿瘤细胞膜上,免疫C57BL-6小鼠后,一组小鼠取脾细胞进行T细胞扩增和细胞毒T淋巴细胞(CTL)功能检测,另一组小鼠进行肿瘤细胞接种试验.结果 用GPI-B7-1修饰的肿瘤细胞膜免疫小鼠后诱发了肿瘤特异性T细胞扩增和CTL.且该疫苗有一定的保护小鼠免受肿瘤细胞侵袭的作用.结论 GPI蛋白转化法为人类抗肿瘤免疫治疗提供了新的、有效的修饰肿瘤细胞膜的方法.     

差异表达新基因BQ135232 ORF的分子克隆与真核表达

 目的 研究差异表达新基因BQ135232的结构功能以及真核表达。方法 应用生物信息学方法分析BQ135232 mRNA基因序列，初步了解其基本性状，构建表达载体，转染真核细胞（CHO/dhfr-）。结果 BQ135232具备作为免疫原的基本条件，构建表达载体pcDNA3-BQ-ORF-GPI，成功转染CHO/dhfr-。结论 完成差异表达新基因BQ135232的真核表达，为后续的蛋白功能研究奠定基础。     

变异胰岛素基因在HepG2细胞系中的表达

目的了解变异的胰岛素基因(insulin/furin)在HepG2细胞系中表达及活性胰岛素的产生情况。方法构建含有insulin/furin的表达质粒p(G1RE)3BP-11×furin并转染HepG2细胞,RT-PCR和放射免疫分析法从mRNA和蛋白质水平观察转染后HepG2细胞中insulin/furin的表达和胰岛素的产生情况。结果HindⅢ和EcoR V双酶切验证质粒p(G1RE)3BP-11×furin,切下260bp和4700bp两个片段,回收260bp片段测序证实为insulin/furin;RT-PCR检测转染后的HepG2细胞有insulin/furin的表达,DNA测序证实为insulin/furin;培养基中可检测到胰岛素。结论含insulin/furin的真核表达质粒p(G1RE)3BP-11×furin转染HepG2细胞,insulin/furin成功地在HepG2细胞中表达,并产生有生物活性的胰岛素。     

膀胱癌差异表达基因BQ135232的全长克隆及意义

目的 克隆并鉴定膀胱移行上皮细胞癌(BTCC)的差异表达基因.方法 应用抑制消减杂交技术(SSH)构建膀胱癌和其正常上皮组织差异表达的cDNA消减文库,进一步利用斑点印迹杂交筛选出BTCC差异表达的基因, 对其中明显差异表达的BQ135232应用SMART RACE克隆全长,再应用免疫荧光原位杂交进行染色体定位,并应用Northern blot进行差异表达分析.结果 成功构建了人膀胱癌组织的cDNA消减文库,共含有376个阳性克隆和83个阴性克隆.随机挑出的100个阳性克隆中,76个克隆含有肿瘤差异表达的基因片段,对其进行同源性比对分析,其中有66个克隆为已知基因,其余的10个克隆代表5种未知基因.未知基因中BQ135232共有3个拷贝,染色体定位发现其位于第12号染色体近末端处.Northern杂交分析显示它在膀胱癌组织中高表达,而在正常膀胱组织中无明显表达.结论 本研究表明BQ135232是跟膀胱癌发生发展密切相关的新基因,它的成功克隆为阐明膀胱癌发生发展的分子生物学机制开辟了新的途径.     

葡萄糖、胰岛素调节(G1RE)3BP-1启动子活性的体外研究

 目的 探讨葡萄糖、胰岛素对(G1RE)3BP-1启动子活性的影响及意义.方法 采用脂质体转染法将含有(G1RE)3BP-1启动子的真核表达质粒p(G1RE)3BP-1Luc转染至人肝癌细胞系-HepG-2细胞中,6 h后分别加入不同浓度的葡萄糖、胰岛素,孵育48 h后,分别检测其报告基因荧虫素酶的活性.结果 荧虫素酶的活性随着培养基中葡萄糖的浓度增高而增加,随着培养基中胰岛素浓度的增多而减少.结论 (G1RE)3BP-1启动子在肝细胞中受葡萄糖的正调控、受胰岛素的负调控,若用于调控胰岛素基因的表达,将使糖尿病的基因治疗更安全更可行.     

新基因BQ135232生物信息学分析及免疫原性研究

目的 研究差异表达新基因的免疫原性,探索其在肿瘤免疫学治疗中的应用价值.方法 应用生物信息学方法,对新基因BQ135232进行分析,初步了解其基本性状;构建表达载体,转染真核细胞,并提取表达产物;表达产物冲击肿瘤患者DC,活化自体淋巴细胞,然后与自体肿瘤细胞共培养,观察杀伤效果.结果 新基因BQ135232位于第12号染色体上,其上有一个开放阅读框架(ORF),编码192个氨基酸肽链--BQ-ORF,BQ-ORF上有2处特异性抗原表位.成功构建表达载体pcDNA3-BQ-ORF-GPI,转染CHO/dhfr-细胞系.经G418,MTX筛选阳性克隆细胞株,提取表达蛋白产物.以提取表达蛋白产物冲击膀胱肿瘤患者体外培养DC,活化自体淋巴细胞,在与白体膀胱肿瘤细胞共培养体系中,可观察到肿瘤细胞变性、坏死.结论 新基因BQ135232表达蛋白具备一定的免疫原性,有可能成为肿瘤生物学治疗的一个新靶点.     

糖尿病性肾病的早期诊断在防危工作中的意义

本文对100例非胰岛素依赖型糖尿病病人的尿蛋白定性、定量、血、尿β2微球蛋白（β2－MG）、晨尿微白蛋白（MAlb）、球结膜、甲皱微循环（micro－circulation，MC）进行研究，证实了放免法测定尿MAlb是早期诊断糖尿病性肾病（DN）和判断疗效及预后的最灵敏的指标，血β2-MG次之。本组患者球结膜、甲皱微循环阳性率的改变优于视网膜，与预示糖尿病肾做血管病的MAlb，尿、血β2-MG增加呈正相关（r=0．532）。从对糖尿病性肾病的病理及早期诊断研究的结果来看，需要更改糖尿病患者10－20年后才发生DN的概念。据此，作者提出了糖尿病性肾病的早期诊断标准，并就糖尿病性肾病的早期诊断在防治，糖尿病进展至肾病中的意义加以讨论。