应用PCR技术检测恙螨体内恙虫病立克次体动态和经卵传递的研究

本文应用聚合酶链反应技术检测恙虫病立克次体实验感染的恙螨体内立克次体的动态变化，通过人工腹腔接种而感染的恙螨成虫，恙虫病立克次体至少能在其体内生存３６０天和经卵传递４代；通过未食幼虫叮咬病小鼠而感染的恙螨，经饱蚴、若蛹、若虫、成蛹和成虫阶段，恙虫病立克次体检测均呈阳性，至少能在成虫期体内生存２７０天和经卵传递１代。     

恙虫病立克次体的核酸研究进展

恙虫病立克次体(Rickettsia tsutsugamushi)属于立克次体属中的恙虫病立克次体群(scrub typhus group)。与其它立克次体一样,恙虫病立克次体由于其酶系不完整,只能在真核细胞内生长繁殖。过去,一般用小鼠或兔睾丸细胞进行繁殖传代,现多采用Vero、L929等传代细胞。然而,由于恙虫病立克次体繁殖特别慢,繁殖量少,因而单靠组织培养难以获得大量纯化的立克次体;此外,组织培养液不能加抗菌素,培养基易污染,消     

恙虫病东方体CMY株sta56基因片段序列分析

目的　了解恙虫病东方体 Ｃ Ｍ Ｙ 株与其它株的关系。方法　测定 Ｃ Ｍ Ｙ 株 ｓｔａ５６ 基因片段的核苷酸序列并与其它株相应序列进行比较。结果　在测定的３２４ｂｐ 序列中, Ｇ Ｃ 含量为４３５ ％ ; 与 Ｋａｒｐ 、 Ｇｉｌｌｉａｍ 、 Ｋａｔｏ 、ｋｕｒｏｋｉ、 Ｋａｗａｓａｋｉ 及 Ｓｈｉｍｏｋｏｓｈｉ 株相应序列的同源性分别为９１０ ％ 、８７３ ％ 、８７０ ％ 、８７３ ％ 、８６１ ％ 及７３８ ％ 。结论　 Ｃ Ｍ Ｙ 株与已报道的恙虫病东方体菌株不同, 与 Ｋａｒｐ 株有很高的同源性。     

应用酶切图谱对我国1978年和1990年登革4型分离株的分析研究

１９７８年７月广东省佛山发生解放后首次登革４型（Ｄ４）流行，当年１２月流行终止。时隔１２年后的１９９０年广州又突然暴发Ｄ４第二次流行。本研究应用酶切图谱对这两次的分离株进行分析。材料与方法试验所用的病毒株为Ｄ４－ＬＤ２（１９７８年佛山），Ｄ４－９０１９（１９９０年广州），Ｄ４－９０６４（１９９０年广州）及Ｄ１－ＬＤ２５（１９８５年广州），Ｄ２－ＬＤ１４（１９８６年海南），Ｄ３－ＬＤ１０（１９８２年徐闻）等登革热患者血清分离株。将上述毒株接种Ｃ６／３６细胞，提取ＲＮＡ方法按文献［１］。应用Ｌａｎｃ…     

恙虫病立克次体sta58主要抗原基因片段的克隆及表达

作者设计合成一对ＤＮＡ引物，经ＰＣＲ扩增出Ｋａｒｐ及ＣＭＹ株恙虫病立克次体ｓｔａ５８主要抗原基因片段，分别建立其无性繁殖系，构建了表达质粒ｐＢＶＲＫ５和ｐＢＶＲＣ４５，在国内首次应用大肠杆菌成功表达了恙虫病立克次体抗原。其意义在于为我国恙虫病立克次体研究提供特异性核酸探针，为恙虫病基因工程诊断试剂的研制奠定物质基础。     

恙虫病立克次体Sta58主要抗原基因片段的克隆

作者利用其采用ＰＣＲ技术从恙虫病立克次体基因组中扩增出Ｓｔａ５８主要抗原基因的部分片段，约１ｋｂ，克隆入质粒ｐＳＰ７２的ＢａｍＨＩ、ＳｍａＩ位点，建重组质粒ｐＳＰＲＫ９，又将ｐＳＰＲＫ９中的ＡｃｃＩ小片段约５００ｂｐ亚克隆至ｐＳＰ７２构建重组质粒ｐＳＰＲＫ７。以上无性繁殖系的建可为我国开展恙虫病立克次体核酸杂交研究提供特异核酸探针。     

用多聚酶链反应技术检测实验感染恙虫病立克次体的恙螨

作者首次采用多聚酶链反应技术检测感染恙虫病立克次体的媒介恙螨，包括成虫的幼虫。证实ＰＣＲ是一可用于恙虫病流行病学调查的新的敏感方法。     

恙虫病诊断新方法(Ⅱ):核酸分子杂交

核酸分子杂交（简称核酸杂交）是利用已知的核酸探针检验未知的核酸片段的技术。随着恙虫病立克次体分子生物学研究的深人，如St858，8t856等多个基因序列一的测定［‘·’j，为核酸杂交技术用于恙虫病立克次体的检测奠定了基础。核酸杂交以其特异及敏感性为主要特点，加上它一次可检测很多份标本，因此尤适用于流行病学调查。1原理［3］通过高温或其它条件可使核酸的双链解为单链（变性），使半数双链分子变为单链的温度即解链温度（Tin）。Tin受核酸分子中碱基成份、溶液中单价阳离子及变性剂浓度的影响。计算公式为：Tin二sl．5＋0．50…