基于量子点免疫层析技术的新型冠状病毒中和抗体检测方法建立

目的:建立简便、快速、低成本的2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)中和抗体检测方法。方法:基于量子点荧光免疫层析原理,建立新冠RBD IgG检测方法,并用新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)患者恢复期血清( ...     

4℃保存红细胞内皮型一氧化氮合酶表达情况的研究

目的鉴定红细胞(RBCs)中有无内皮型一氧化氮合酶(eNOS),探讨在4℃保存条件下,RBCs中的eNOS含量随保存时间变化的规律。方法采用免疫印迹(WB)和免疫荧光技术检测库存红细胞膜标本中有无eNOS;采用逆转录-PCR(RT-PCR)技术eNOS-mRNA库存红细胞中的检测。结果 RBCs中eNOS检测结果呈阳性。灰度分析结果表明:在RBCs保存35 d内,并不能引起eNOS含量的变化;而RBCs中并没有检测到eNOS-mRNA的存在。结论 RBCs含有eNOS;在库存血液35 d的保存期内,RBCs中的eNOS含量保持稳定。另外,在RBCs中未发现有eNOS-mRNA存在。     

柯萨奇B3病毒VP1基因在原核中的表达及其临床意义

目的：研究柯萨奇B3病毒（CVB3）VP1基因在大肠杆菌中的表达及其临床意义。方法：将柯萨奇B3病毒中国分离株VP1基因克隆入PQE-30载体,转导入大肠杆菌（Ml5）中,使CVB3的VP1基因在大肠杆菌中得到稳定的表达,采用NAT亲和方法纯化,间接ELISA方法做免疫学活性鉴定。结果：表达的VP1产物与抗柯萨奇B3病毒的兔抗CVB3（多克隆抗体）血清产生较强的免疫反应,与天然的CVB3蛋白抗原（病毒组织培养抗原）的抗原性近似。应用无关兔抗体对照呈阴性反应。应用表达的VP1产物作为抗原,对临床急性病毒性心肌炎患者血清进行了特异性IgM酶联免疫吸附试验检测,其结果与组织培养的CVB3制备的细胞蛋白抗原对上述患者血清的特异性IgM检测结果基本一致。结论：采用基因工程方法制备出的CVB3-VP1蛋白抗原产量高,纯化后免疫反应原性基本没有变化。试用表达CVB3的VP1基因工程抗原代替目前实验用有感染危险的病毒培养抗原的方法,快速、特异地检出CVB3的感染,为急性心肌炎的早期诊断和及时的临床治疗提供可靠的实验室诊断指标。