反应性氧代谢物清除剂逆转ROM对NK细胞抗K562细胞系体外抑制作用

为了探讨新型反应性氧代谢物(reactiveoxygenmetabolites,ROM)清除剂在NK细胞抑制K562细胞时作为免疫佐剂的作用,采用IL-2及PHA活化单核(MO)细胞,使MO细胞的ROM产量增加,观察NK细胞活性和K562细胞抑制率(KIR)的相应变化,然后在不同比例的MO NK K562细胞培养体系中加入不同浓度的ROM清除剂(硫普罗宁),定期检测ROM产量及KIR(每种检测均做3个复孔),同时应用不同浓度的二氢氯组胺(DHT)作为阳性对照。结果表明:在K562细胞、NK细胞混合培养体系中,当E/T=10/1时,加入IL-2/PHA后ROM的产量从33.17±25.02U/ml增至223.59±59.41U/ml(P<0.05),KIR从65.56%升至85.89%(P<0.05);当按E/MO=10/2、10/5、10/10三种比例加入MO细胞后,ROM产量随着MO细胞数量的增加而增加(ROM产量分别为389.79±43.83U/ml,456.74±42.77U/ml,601.42±21.92U/ml),而KIR则相反(KIR分别为82.36%,81.36%,48.09%);而在K562 NK MO IL-2/PHA混合培养体系中加入硫普罗宁、DHT后,当E/MO=10/2时,ROM产量从389.79±43.83U/ml分别降至-1.20±60.70U/ml和50.21±22.4U/ml(P<0.05),KIR则从82.53%分别升至96.09%和94.64%(P<0.05)。随着硫普罗宁、DHT浓度的增加,ROM产量逐渐减少。ROM产量与KIR呈负相关(r=-0.518)。当E/MO为10/5或10/10时,各浓度硫普罗宁及高浓度的DHT可使ROM产量减少(P<0.05),但KIR提高不明显(P>0.05)。硫普罗宁在提高KIR的效应方面与DHT相似(P>0.05),而在清除ROM方面,硫普罗宁较DHT为优(P<0.05)。结论:①MO细胞是ROM产生的最主要来源,其产生的ROM可使NK细胞的抗瘤(抗K562)活性下降;②新型ROM清除剂(硫普罗宁)可有效清除ROM,在一定程度上逆转ROM对NK细胞抗K562细胞的抑制作用,且在逆转ROM方面优于DHT,在提高NK细胞对K562细胞的抑制率方面效应强度与DHT相似,但毒副作用较低,有望替代DHT作为免疫佐剂用于白血病的过继性免疫治疗中。     

单核细胞影响NK细胞抗K562细胞活性的实验研究

目的探讨单核细胞(MO)呼吸爆发过程中产生的反应性氮代谢物(RNM)、反应性氧代谢物(ROM)的情况及其对NK细胞抗K562细胞活性的影响。方法在NK+K562混合细胞培养体系中,观察加入MO或/和IL-2/PHA前后RNM、ROM产量、KIR及TNF-β、IFN-γ产量的相应变化。再观察加入二氢氯组胺、硫普罗宁后上述各指标的变化情况。结果①在NK+K562混合培养体系中,加入IL-2/PHA后,KIR逐渐升高;当按E/MO=10/2、10/5、10/10比例加入MO后,RNM、ROM产量随着MO数量的增加而增加,而TNF-β、IFN-γ的产量和KIR反而降低。对K562细胞数量作偏相关分析,RNM与KIR的负相关系数大于ROM。②加入药物后,ROM产量明显下降,KIR和TNF-β、IFN-γ产量明显升高,硫普罗宁还降低RNM的产量,但二氢氯组胺无效。结论①MO可通过产生ROM、RNM降低NK细胞的活性,抑制NK细胞抗K562细胞效应;②RNM对NK细胞的影响可能比ROM更强。③硫普罗宁通过清除ROM、RNM,可逆转MO对NK细胞的抑制作用。     

中西医治疗年龄相关性黄斑变性研究进展

年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneratin.AMD),是威胁中老年人视功能的主要致盲眼病之一,病变在发展过程中可出现黄斑区色素脱失、增殖,玻璃膜疣,黄斑区脉络膜新生血管(CNV),视网膜色素上皮层脱离(PED),黄斑区反复出血等眼底改变从而导致视力下降或丧失,其发病率随着年龄的增...     

苯丁酸氮芥对淋巴瘤细胞凋亡信号通路的影响

目的:探讨苯丁酸氮芥对B细胞淋巴瘤细胞株A20细胞是否具有促凋亡效应及其在凋亡信号通路中的具体作用机制。方法:实验组使用终浓度为20μmol/L的苯丁酸氮芥处理A20细胞,对照组使用PBS处理A20细胞。使用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测细胞的凋亡情况,使用Western blot检测淋巴瘤细胞中Active caspase-3、Survivin、NF-κB和p AKT的表达,使用荧光定量PCR检测淋巴瘤细胞中Survivin mRNA的表达。结果:与对照组相比较,苯丁酸氮芥干预组的A20细胞FITC~+/PI~+凋亡细胞的比例显著增高,而Active caspase-3的表达显著上调(t=7. 384,P=0. 000),Survivin mRNA的表达显著降低(t=4. 384,P=0. 000),Survivin蛋白的表达显著降低(t=12. 360,P=0. 000),NF-κB蛋白的表达显著降低(t=5. 462,P=0. 000),p AKT的表达显著降低(t=7. 183,P=0. 000)。结论:苯丁酸氮芥促进淋巴瘤细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路、NF-κB和Survivin的表达有关。     

糖皮质激素冲击疗法治疗急性粒细胞缺乏症

急性粒细胞缺乏症(简称急性粒缺) ,起病急,病情危重,常并发严重感染或二重感染,内脏受损等。多家报道[1 ,2 ] 采用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG -CSF)有效,但疗效仍不尽人意,近年来我们采用了糖皮质激素(简称激素)冲击疗法急性粒缺,取得了良好的效果,现报告如下。1　资料与方法1·1　一般资料　1992年以来,我院收治急性粒缺42例,均符合国内统一诊断标准[3 ] ,其中1992 -0 8～1995 -0 6期间收治的10例作为空白对照组,1995 -0 7以后入院的患者,依入院顺序编号,按简单随机分组法,编入激素组和rhG -CSF组。至今,观察激素组16例,rhG -CSF组…     

左归丸对去势大鼠骨组织胶原蛋白表达的影响

目的探讨左归丸对去卵巢所致骨质疏松大鼠骨组织胶原蛋白表达的影响。方法实验分为假手术组、模型组、左归丸组,左归丸组灌胃左归丸,其余组给予等量生理盐水。给药12周后,采用酶联免疫吸附法测定血清中骨钙素(BGP)和尿中脱氧吡啶啉(D-Pyd)的含量,采用免疫印迹法测定股骨组织中Ⅰ型胶原(COL1)蛋白表达情况。结果与假手术组比较,模型组血清中BGP的含量降低(P0.05),股骨组织中COL1蛋白表达减弱,尿中D-Pyd的含量升高(P0.05);与模型组比较,左归丸组血清中BGP的含量升高(P0.05),股骨组织中COL1蛋白的表达增强,尿中D-Pyd的含量降低(P0.05)。结论左归丸可能部分通过影响COL1蛋白表达、影响BGP和D-Pyd含量,促进骨形成,抑制骨吸收,发挥抗骨质疏松症作用。     

反应性氧代谢物逆转剂对微小残留白血病的治疗作用

反应性氧代谢物(reactive oxygen metabolites,ROM)是在机体代谢过程中产生,包括单线态氧(IO2)、超氧阴离子自由基(O2)、过氧化氢(H2O2)、羟自由基(OH-)、脂质自由基(R·)和低氯酸(CCl3O2-·)等,其主要作用包括活化单     

反应性氮代谢产物对NK细胞抗K562细胞活性的影响

目的 探讨外源性、内源性反应性氮代谢产物(RNM)及其清除剂硫普罗宁(TIP)、还原型谷胱甘肽(GSH)、二氢氯组胺(DHT)对NK细胞抗K562细胞活性的影响.方法 体外合成外源性ONOO-,在NK+K562细胞培养体系中,观察外源性ONOO-及其清除剂对K562细胞抑制率(KIR)、肿瘤坏死因子β(TNF-β)和干扰素γ(IFN-γ)的含量及NK细胞活性影响.以白细胞介素2(IL-2)+植物血凝素(PHA)激活单核细胞(MO)呼吸爆发产生内源性RNM,在MO+NK+K562细胞培养体系中,观察内源性RNM对NK细胞活性的影响,然后加入RNM清除剂观察RNM和NK细胞活性的变化.结果 在NK和K562细胞培养体系中加入外源性ONOO-后,NK活细胞率从(93.17±2.57)%下降到(71.87±1.02)%(P＜0.01),KIR从(67.47±2.64)%下降到(43.44±2.87)%(P＜0.01);加入TIP、GSH和DHT后,NK活细胞率分别升高至(91.13±3.67)%(P＜0.05)、(88.03±1.46)%(P＜0.05)和(73.60±2.76)%(P＞0.05),KIR上升至(61.58±1.89)%(P＜0.05)、(60.68±2.07)%(P＜0.05)和(45.26±3.31)%(P＞0.05).以IL-2+PHA+NK+K562为对照,在NK+K562+MO混合培养体系中加入IL-2+PHA,RNM含量从(82.10±6.60)μmom/L增至(193.65±5.95)μmom/L(P＜0.01),KIR从(90.64±3.06)%下降至(61.29±2.22)%(P＜0.01);加入TIP、GSH和DHT后,RNM含量分别降低至(91.32±6.81)μmom/L(P＜0.05)、(84.66±5.99)μmom/L(P＜0.05)和(188.92±5.00)μmom/L(P＞0.05),KIR上升至(84.31±4.56)%(P＜0.05)、(81.65±3.09)%(P＜0.05)和(72.20±4.10)%(P＜0.05).结论 外源性ONOO-和MO呼吸爆发产生的RNM均可使NK细胞的抗K562细胞活性下降.TIP和GSH可通过清除RNM保护NK细胞,提高NK细胞抗K562细胞活性.     

整合性心理护理干预对血液透析患者抑郁状态的影响

目的 评价整合性心理护理干预措施对血液透析患者抑郁状态的影响.方法 采用贝克抑郁问卷(Beck Depression Rating scales)对血液透析治疗患者心理状况进行评估,了解其抑郁状态,并通过肾脏病生活质量短表(Kidney Disease Quality of Life Short Form,SKDQOL-SFTM)(1.3版)的第24个问题的回答情况对患者进行分层,A层为自我感觉获得医学支持较好的患者,B层为自我感觉获得医学支持较差的患者,然后对所有患者进行整合性心理护理干预,3个月后再度进行Beck评分,通过自身前后对照进行配对t检验,了解整合性心理护理干预前后患者抑郁状态的改善情况,通过独立样本t检验了解A、B两层患者抑郁状态的差别.结果 干预前B层患者的抑郁发生率较A层患者高(P<0.05),心理护理干预后两组患者的抑郁状态均有改善,但A、B两层患者进行整合性心理护理干预后抑郁状态的程度仍有差别.结论 整合性心理护理干预可改善血液透析治疗患者抑郁状态,但单纯心理护理干预和医学团队支持并不能完全解决患者的抑郁状态.