THE STUDY OF ESTROGEN AND PROGESTERONE RECEPTOR IN NASOPHARYNGEAL CARCINOMA

ＴＨＥＳＴＵＤＹＯＦＥＳＴＲＯＧＥＮＡＮＤＰＲＯＧＥＳＴＥＲＯＮＥＲＥＣＥＰＴＯＲＩＮＮＡＳＯＰＨＡＲＹＮＧＥＡＬＣＡＲＣＩＮＯＭＡＺｈｅｎｇＴｉａｎｒｏｎｇ郑天荣；ＬｉＪｉａｎｃｈｅｎｇ李建成；ＬｉｕＸｉｕｙｉｎｇ刘秀英；（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ...     

福安市恶性肿瘤死亡率10年变化趋势分析

本文通过对福安市恶性肿瘤死亡率10年变化情况进行比较分析,探索该市恶性肿瘤的流行趋势,为恶性肿瘤的病因学研究及制定卫生防治规划提供参考.     

胃癌中p16INK4a基因启动子高甲基化及其蛋白表达

目的探讨胃癌中p16^INK4a基因失活的主要分子机制及其与胃癌发生、发展的关系。方法采用甲基化特异性PCR技术检测62例胃癌和癌旁组织及10例慢性胃炎黏膜p16^INK4a基因启动子区CpG岛甲基化状态，用免疫组化EnVision两步法检测p16^INK4a蛋白的表达。结果62例胃癌和癌旁组织p16^INK4a基因启动子高甲基化率分别为51．6％（32／62）和19.4％（12／62），10例正常对照胃黏膜未发现高甲基化，胃癌组织p16^INK4a基因启动子高甲基化率高于癌旁组织和正常对照（P〈0．05）。58.1％（36／62）的胃癌组织p16^INK4a蛋白表达阴性，其中72.2％（26／36）的病例具有p16^INK4a基因启动子的高甲基化，p16^INK4a基因启动子的高甲基化与其蛋白失表达密切相关（P〈0.05）。结论胃癌中p16^INK4a基因启动子的高甲基化是p16^INK4a基因失活的主要机制，并可能是胃癌发生中的早期分子事件。     

甲状腺癌差异表达cDNA消减文库的构建

目的 应用抑制性消减杂交技术，构建人甲状腺癌与正常甲状腺差异表达的cDNA消减文库。方法 分别从甲状腺癌及正常甲状腺组织中提取总RNA，应用高效、灵敏的抑制性消减杂交技术，构建成功cDNA消减文库，再转染大肠杆菌进行文库扩增。结果 构建成功具有高消减效率的人甲状腺癌组织cDNA消减文库，文库扩增得到了400个克隆，随机挑取50个制备质粒，酶切分析均得到50bp-400bp大小插入片段，这些片段可能就是载有高度特异性的目的片段。结论 人甲状腺癌组织cDNA消减文库的建立为进一步克隆甲状腺癌特异性表达的新基因奠定了基础。     

大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶基因的克隆及其真核表达载体的构建

目的 克隆大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(CD)基因，构建真核表达载体，本研究拟探索该基因在肿瘤基因治疗中的应用基础。方法 根据GenBank数据库提供的CD基因核苷酸序列，设计并合成一对引物，采用PCR方法，从大肠杆菌基因组DNA中扩增出CD基因，并与pcDNA3．1定向连接，构建受控于人巨细胞病毒启动子的重组真核载体pcDNA3．1-CD，并用限制性内切酶、PCR和DNA测序进行鉴定。结果克隆了大肠杆菌CD基因，并构建了真核表达载体，经限制性内切酶酶切、PCR扩增和DNA测序证实了其正确性。结论 pcDNA3．1-CD真核表达载体构建成功。     

自杀基因联合放射对食管癌细胞株的实验研究

目的自杀基因具有能将无细胞毒性的前体药物转化为有细胞毒性作用的药物而使细胞死亡,通过观察大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶/氟胞嘧啶(CD/5-FC)自杀基因系统对食管癌EC109细胞杀伤效应及与放射联合应用对食管癌肿瘤细胞协同杀伤效应。方法采用PCR方法从大肠杆菌基因组DNA中扩增出CD基因;构建重组真核载体pcDNA3.1-CD;用脂质体转染法转染EC109细胞;观察CD/5-FC体系对EC109细胞的杀伤效应和旁观者效应及对放射的增敏效应。结果RT-PCR分析结果表明CD基因已转入EC109细胞并表达。离体实验证实5-FC对转CD基因后的食管癌细胞株有明显的细胞毒作用,含5%的转基因食管癌细胞加入5-FC后的细胞存活比率为41.8%±14.2%,低于对照组的94.6%±4.3%结果(t=3.14,P<0.05);加入10%的转基因细胞的存活比率为37.8%±4.4%,低于对照组的95.6%±5.4%结果(t=9.75,P<0.01)。CD/5-FC体系对肿瘤细胞放射增敏效果明显,加前药5-FC及放射组细胞存活曲线低于单纯加前药5-FC对照组或单纯放射对照组,重复测量数据方差分析结果显示F=11.50,P<0.01;治疗组分别与5-FC对照组及单纯放射对照组相比F值分别为4.11、10.53,P值分别<0.05、0.01。结论CD/5-FC体系的旁观者效应和放射增敏效果明显。     

人胃印戒细胞癌组织差异表达基因克隆的研究

目的:分离胃印戒细胞癌组织差异表达基因,探讨人胃印戒细胞癌发生的分子机制。方法:采用抑制性消减杂交技术(SSH),构建人胃印戒细胞癌组织cDNA 消减文库;随机挑选部分阳性克隆测序,与GenBank中的已知序列进行基因同源性分析,并进一步探讨基因功能。结果:成功构建高消减效率的人胃印戒细胞癌组织cDNA消减文库,并分离出多个差异表达基因片段:其中1 条与染色体序列相似,可能代表未知的新基因序列,已被GenBank 接收(注册号:CN446913);其他多为已知的肿瘤相关基因的部分片段。结论: 1 )SSH技术是分离差异表达基因的有效方法;2)胃印戒细胞癌的发生发展与多种基因表达异常有关;     

长乐市高发现场回顾与展望

21世纪恶性肿瘤仍严重威胁人民生命和健康,成为人类"第一杀手".我省是恶性肿瘤高发的省份之一,尤其是胃癌.我省在20世纪80年代建立了长乐胃癌高发防治现场,通过16年艰辛努力,在肿瘤控制上取得一定成绩,但与目标相比,仍有差距,为进一步搞好高发现场建设,对以往工作进行总结,以便进一步提高,取得更好成绩.     

E-钙粘附素和连接素在舌癌中的表达及其意义

[目的]探讨舌癌中E-钙粘附素、α-连接素和β-连接素的表达及临床意义.[方法]采用经病理证实的初诊舌癌病人45例.所有标本均制作HE染色片和采用SP法免疫组化检测α-连接素,β-连接素和E-钙粘附素,以Speiser标准判断阳性表达.[结果]α-连接素、β-连接素及E-钙粘附素在舌癌中阳性率分别为71.11%,71.11%和64.44%.α-连接素、β-连接素及E-钙粘附素的高分化鳞癌、有淋巴结转移的阳性表达均高于中、低分化鳞癌和无淋巴结转移者(P＜0.05).α-连接素和β-连接素及E-钙粘附素阳性表达在临床Ⅲ、Ⅳ期的表达比Ⅰ和Ⅱ期显著降低(P＜0.05).[结论]E-钙粘附素、α-连接素和β-连接素在舌癌中的表达有明显的相关性,三项指标可为一整体联合检测,与舌癌病理分级、转移、预后密切相关,对判断舌癌恶性程度,转移和预后的指标有参考意义.     

GM-CSF基因重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的：构建人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）基因的重组腺病毒载体，为进一步研究GM-CSF基因在肿瘤基因治疗中的应用提供实验基础。方法：采用PCR方法，从重组质粒pcDNA3．1-GM-CSF扩增出GM-CSF基因片段，通过穿梭质粒pShuttle，将带有CMV启动子的目的片段克隆入Adeno-X腺病毒DNA中，获得重组腺病毒DNA，通过脂质体转染HEK293细胞，经包装扩增后，获得重组腺病毒Adeno-X-GM-CSF，PCR鉴定，ELISA法检测表达产物。结果：含GM-CSF基因的重组腺病毒Adeno-X-GM-CSF构建成功，经PCR鉴定和DNA测序等证实了其正确性，重组腺病毒上清液中GM-CSF表达量达26ng／mL。结论：含GM-CSF基因的重组腺病毒构建成功。