荧光定量PCR法在重组逆转录病毒pLXSN-BDNF滴度测定中的应用

目的制备含大鼠脑源性神经营养因子（BDNF）基因的逆转录病毒，建立荧光定量PCR测定滴度的方法。方法扩增BDNF基因，构建重组质粒pLXSN-BDNF，将其转染包装细胞，经G418筛选、病毒浓缩后用荧光定量PCR法和克隆形成法测定滴度。结果经PCR、酶切和测序鉴定，BDNF基因成功插入逆转录病毒载体中，筛选得到稳定的分泌重组病毒细胞系。重组病毒100倍浓缩后经荧光定量PCR法和克隆形成法测定的滴度分别为6．92×10^6拷贝/ml和3．2×10^5CFU/ml，两种方法测得的结果差异有统计学意义（P〈0．05）。结论成功扩增BDNF基因，制备了重组病毒pLX—SN-BDNF，建立了荧光定量PCR检测滴度的方法，为基因治疗青光眼性视神经损伤的实验研究提供重要参考指标。     

泪点栓子对干眼病患者泪膜功能的影响

目的 评价一种新型泪点栓子对干眼病患者泪膜功能的影响.方法 采用美国产新型泪点栓子治疗62例(123只眼)确诊为干眼病的患者,询问治疗前后患者的主观症状、检查治疗前后的泪膜破裂时间、荧光素染色情况和泪液分泌量的变化.结果 泪点栓子治疗后干眼病患者主观症状明显减轻;治疗后泪膜破裂时间延长,与治疗前比较差异具有显著意义;治疗前和治疗后角膜上皮点状荧光素染色差异具有显著意义(P<0.05);泪液分泌量有所增加.结论 该新型泪点栓子用于治疗干眼病能限制泪液流出,重建泪液平衡,改善泪膜的稳定性,是一种有效的、可逆的治疗干眼病的方法.     

视网膜损伤：外泌体转录组学的研究进展

衰老、缺氧、高糖刺激等多种因素导致的视网膜损伤过程中,外泌体发挥着重要作用。外泌体是一种纳米级的细胞外囊泡,包含微小RNA、环状RNA等多种转录产物,广泛参与视网膜色素上皮细胞损伤、新生血管形成、视网膜神经节细胞和光感受器细胞凋亡等过程。通过转录组学分析外泌体对视网膜损伤及修复的调控机制,识别糖尿病视网膜病变、青光眼等眼科疾病相关分子生物标志物,寻找新的治疗靶点,已成为视网膜研究的热点。因此,本文对外泌体转录组学在视网膜损伤中的研究进展进行综述。     

两种方法纯化胎鼠脑室管膜下区神经干细胞的结果比较

目的 利用有限稀释法和连续传代法纯化体外培养的神经干细胞(neural stemcells,NSCs),并对2种方法纯化后的细胞纯度及增生能力进行比较.方法 机械分离孕龄14.5 d的胎鼠脑室管膜下区细胞,利用有限稀释法和连续传代法纯化NSCs,通过免疫细胞化学法鉴定纯度(Nestin阳性卒)及分化细胞的类型.将2种方法纯化后的第3代NSCs以相同的密度接种后连续培养6周,每周进行细胞计数,绘制生长曲线.结果 有限稀释法和连续传代法纯化NSCs的Nestin阳性率均高于原代NSCs(31.00%±0.02%),有限稀释法的Nestin阳性率(91.00%±0.03%)高于连续传代法(58.80%±0.02%,P<0.05).有限稀释法纯化NSCs的生长曲线一直处于增生趋势,而连续传代法的细胞前3周是上升趋势,以后趋于平缓(P<0.05).结论 有限稀释法能有效纯化体外培养的NSCs,并保持细胞良好增生能力及多向分化潜能,为基因治疗视神经损伤疾病提供大量种子细胞.     

神经干细胞移植和基因转染对视网膜神经细胞作用的研究现状

视神经在缺血、创伤、高眼压、炎症等各种损伤因子的作用下通常产生不可逆的损害，难以恢复。以往人们认为中枢神经系统损伤后，损伤的神经元逐渐由胶质细胞所代替，造成组织功能的永久缺失。其不能再生的原因除了中枢神经系统本身的性质外，更重要的是中枢神经系统损伤后其外部的微环境影响神经细胞再生。视神经作为中枢神经系统的一部分，损伤后也难以避免同样的命运。     

威海市医疗机构法定传染病疫情报告管理情况调查分析

目的 为了解医疗机构传染病疫情管理报告工作情况,提高传染病疫情监测信息报告质量,不断完善传染病疫情管理报告系统.方法 对威海市各级医疗机构门诊日志登记使用、法定传染病报告管理质量进行随机抽查.结果 法定传染病总体漏报率控制在7%以下;传染病的诊断符合、传染病报告及卡片填写等情况市级医疗机构最好,民营医疗机构最差.门诊日志登记使用情况,市级医疗机构使用率最高,而登记完整率较低.结论 加强医疗机构传染病疫情报告工作管理质量,增强医务人员法律意识,将法定传染病报告管理制度落到实处.     

1起甲型副伤寒暴发的调查

[目的 ]分析甲型副伤寒暴发疫情的流行病学特点及暴发原因。 [方法 ]运用描述流行病学的方法 ,分析 2 0 0 3年威海市 1起甲型副伤寒暴发疫情有关资料。 [结果 ]合计确诊 68例病人 ,全部为城镇居民。其中 ,2月 2 6日至 3月 2 0日发病 5 8例 ;在某快餐连锁店 (快餐店 )就餐者发病 5 3例 ;2 0～ 40岁发病 5 5例。患者均有 2～ 3周的持续高热。 [结论 ]食品从业人员中的健康带菌者污染自备水 ,从而污染加工的食物是引起本次甲型副伤寒暴发的主要原因     

威海市碘缺乏病防治现状与对策

威海市是我国沿海开放城市之一,地处山东半岛东部,北、东、南三面濒临黄海,西与烟台市接壤,属丘陵地带,辖荣成、文登、乳山三市和环翠区,有68个镇9个街道办事处,总人口247万。1995年经碘缺乏病本底调查被确定为碘缺乏病区,1996年实施了以全民食盐加碘为主的综合性防治措施,2001年对我市碘缺乏病防治效果及对策进行了评估研究。 一、我市碘缺乏病防治现状 1.五年来碘缺乏病防治效果 评估结果表明:     

重组逆转录病毒pLXSN-脑源性神经营养因子在小鼠胚胎细胞中的表达

神经干细胞移植是近年来治疗视神经损伤疾病新的研究方向之一,然而如何能够让干细胞在眼内移植后定向分化为视网膜神经节细胞,一直是个难题.     

威海市碘缺乏病防治现状调查

威海市是我国沿海开放城市之一 ,属丘陵地带 ,总人口 2 4 7万 ,1995年被确定为碘缺乏病病区 ,1996年始实施了以全民食用碘盐为主的综合性干预措施。为全面了解和掌握威海市碘缺乏病防治现状 ,更好地指导防治工作 ,为建立长期有效可持续运行的消除碘缺乏病工作机制提供依据 ,2 0 0 1年对全市进行了调查。1　材料与方法1 1　材料　 2 0 0 1年参照卫生部《实现消除碘缺乏病阶段目标评估方案》 ,以威海市地理位置重心点划分 5个区域 ,每个区域随机选取 2个镇 ,每个镇随机抽取 1所小学、5个村。每所小学抽取 8～ 10岁学生 80名、5年级学生 30名 ,…