尿激酶治疗急性心肌梗死的临床分析

急性心肌梗死 (ＡＭＩ)是临床常见的心脏病急症之一。溶栓方法能使ＡＭＩ的预后完全改观 ,可有效地限制和缩小梗死面积 ,降低病死率。我院 1998- 0 3～ 1999- 0 4,经静脉溶栓治疗ＡＭＩ12例 ,并与 10例采用常规疗法的患者进行比较 ,效果满意。报告如下。1　资料与方法1.1　临床资料所有病例均符合ＷＨＯ关于ＡＭＩ的诊断标准 ,均符合胸痛持续 >30ｍｉｎ ,含硝酸甘油不缓解 ,心电图至少 2个相邻导联 ,ＳＴ抬高≥ 1ｍｍ ,血清心肌酶明显升高。1.2　对象溶栓组 :共 12例 ,男 9例 ,女 3例。年龄 5 4～ 6 8岁 ,平均6 1岁。均无溶栓禁忌证 ,发病在…     

抗衰老中药筛选：进展与挑战

To provide a better service for senior health care,we summarized screening studies of traditional Chinese anti-aging materia medica(TCAM).We collected and analyzed literature of TCAM screening studies using the lifespan test and animal models of aging from 1984 to 2012.We found 26 screening methods for TCAM,and 153 single herbs or active ingredients of TCAM that have been screened out during the past 28 years.The cell lifespan test,the fruit fly lifespan test, and D-galactose aging model were the most widely used and intensively studied screening methods.However,the method for establishing the D-galactose aging model needs to be standardized,and the D-galactose aging model cannot completely be a substitute for the normal aging mouse model.Great success has been achieved in screening studies in TCAM.To further improve screening studies in TCAM,we suggest that the D-galactose aging model be incorporated into the lifespan test in the New Drugs of Traditional Chinese Medicine Research Guide.     

载体介导的RNA干扰技术抑制肝癌细胞中糖原合成酶激酶3β表达的研究

目的构建和筛选能高效、特异性抑制人GSK-3β基因表达的siRNA表达载体,探讨其对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法提取人L02细胞总RNA,RT-PCR扩增GSK-3β基因序列,克隆至pSEB-HUS真核表达载体,构建pSEB-G重组质粒。将设计、合成的3条靶向GSK-3β基因编码区的siRNA及阴性对照分别克隆至pSEB-G,构建siRNA表达载体pSEB-si1-G、pSEB-si2-G、pSEB-si3-G及pSEB-siN-G。将siRNA表达载体瞬时转染HepG2细胞,通过绿色荧光信号、RT-PCR和Western blot观察和检测其对GSK-3β基因的抑制效果,MTT实验和caspase-3活性分析检测其对HepG2细胞增殖和凋亡的影响。结果经双酶切及测序证实,所构建si RNA表达载体目的基因大小、序列与预期相符。瞬时转染HepG2细胞后,其中的pSEB-si1-G能使细胞中绿色荧光信号明显减少,可显著抑制GSK-3βmRNA的表达及蛋白的合成,并使HepG2细胞增殖明显降低,caspase-3活性显著升高。结论成功构建了靶向GSK-3β基因的siRNA表达载体,沉默GSK-3β能显著抑制HepG2细胞的生长并诱导其发生凋亡。     

星形孢菌素诱导小鼠T细胞中Caspase非依赖性细胞死亡方式的研究

目的:研究星形孢菌素(staurosporine,STS)诱导的小鼠T细胞中Caspase非依赖性细胞死亡方式,探讨T细胞死亡的分子机制。方法:在加入或不加Caspase抑制剂z-VAD-fmk(20μmol.L-1)情况下,检测STS(100 nmo.lL-1)刺激后小鼠T细胞的凋亡率,DNA ladder,线粒体膜电位变化以及凋亡相关蛋白AIF,细胞色素C和Bax等的变化。结果:STS诱导的小鼠T细胞凋亡中存在Caspase非依赖性细胞死亡方式,其DNA ladder改变与Caspase依赖性死亡方式不同,线粒体膜电位依然下降,AIF从线粒体转移到细胞质中要早于细胞色素C,且两者的转移需要Bax结合到线粒体上。结论:在STS诱导的小鼠T细胞死亡中,Caspase非依赖性死亡方式可能是Caspase依赖性死亡方式的替代途径,这对于维持T细胞的数量和保证免疫系统功能的正常发挥具有十分重要的意义。     

mTOR信号通路与衰老

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种进化上十分保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,能对氨基酸、应激、氧、能量和生长因子等信号作出应答,并将信号传导到下游,最终调节细胞的生长和增殖.近几年研究发现,降低无脊椎模式生物中TOR通路的活性可增加寿命,雷帕霉素可延长实验鼠的寿命,表明mTOR通路与机体衰老过程的调控具有密切关系研究mTOR通路与衰老的关系及其调节衰老的机制对延迟多种病理发展并最终延长人类寿命具有重要意义     

红景天苷对力达霉素诱导人二倍体成纤维细胞衰老的干预作用

目的:研究红景天苷对力达霉素导致DNA损伤后所诱导的细胞衰老的调节作用。方法:采用MTT法测定药物对人胚肺二倍体成纤维细胞2BS活力的影响;衰老相关的β-半乳糖苷酶染色法观察细胞衰老形态变化;流式细胞术检测细胞周期分布以及γ-H2AX蛋白表达变化;蛋白免疫印迹技术观察p53和p21蛋白表达水平变化。结果:较低浓度(低于0.1 nmol.L-1)力达霉素能够抑制2BS细胞增殖,诱导β-半乳糖苷酶染色率显著升高和G2/M期阻滞,并使DNA损伤相关的γ-H2AX蛋白以及p53和p21蛋白表达升高。红景天苷能够显著干预力达霉素诱导的上述细胞衰老样表型及相关分子信号变化。结论:红景天苷能够抑制基因毒药物所致DNA损伤及其诱导的细胞衰老。     

戊二酰亚胺类抗生素S-632A对D-半乳糖老化小鼠海马神经元Aβ及其相关蛋白表达的影响

目的:观察戊二酰亚胺类抗生素S-632A对D-半乳糖老化小鼠模型(DGAM)海马神经元β-淀粉样肽(β-amyloid,Aβ)及其相关蛋白表达的影响.方法:采用免疫组织化学染色和免疫印记方法,检测DGAM海马神经元Aβ、β-分泌酶(Beta-site APP cleaving enzyme,BACE)、内质网Aβ结合蛋白(Endoplasmicreticulum amyloid β peptide binding protein,ERAB)和早老蛋白1(Presenilin-1,PS-1)的表达水平,并观察应用戊二酰亚胺类抗生素S-632A对DGAM海马神经元的保护作用.结果:对照组小鼠海马神经元Aβ及其相关蛋白BACE,ERAB和PS-1表达量少,而DGAM小鼠海马神经元Aβ及其相关蛋白表达水平明显增加,与对照组比较差异具有高度显著性(P<0.01),S-632A组上述各种蛋白的表达结果与对照组接近.结论:DGAM小鼠海马神经元存在着Aβ及其相关蛋白BACE,ERAB和PS-1表达的上调,S-632A可明显改善模型动物中上述蛋白的异常表达,对小鼠神经元具有营养和保护作用.     

靶向USP2下调PD-L1表达的丹酚酸B抗肿瘤免疫作用研究

以程序性死亡配体1/程序性死亡受体1 (programmed cell death ligand 1/programmed cell death protein 1,PD-L1/PD-1)免疫检查点阻断治疗为代表的肿瘤免疫疗法在临床上取得了令人鼓舞的治疗效果。小分子肿瘤免疫治疗药物与免疫检查点抗体药物的联用,为肿瘤治疗提供了新策略。因此,研发能阻断PD-L1/PD-1免疫检查点相互作用的小分子药物是下一代肿瘤免疫疗法的新方向。本研究对丹酚酸B (salvianolic acid B, SAB)下调肿瘤细胞中PD-L1表达发挥抗肿瘤作用及机制进行了研究。利用Western blot、流式细胞术、PD-1/PD-L1相互作用分析SAB对结肠癌细胞RKO和前列腺癌细胞PC3细胞内和膜表面PD-L1蛋白表达水平的影响;荧光定量PCR检测SAB对PD-L1 mRNA的影响;细胞阻抗法和结晶紫法检测SAB对人类外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)杀伤肿瘤细胞的效果;表面等离子共振技术分析SAB与泛素羧基末端水解酶2 (ubiquitin c...     

戊二酰亚胺类抗生素S632最新研究进展

戊二酰亚胺类抗生素是由链霉菌产生的一类结构中含有酰亚胺环、具有多种生物学活性的微生物产物。近年来发现戊二酰亚胺类新抗生素S632具有显著的抗病毒、抗肿瘤、保护神经元等多种生物学活性,表明该类抗生素具有重要的理论研究价值和开发应用前景。文中从以下几个方面综述了抗生素S632的最新研究现状及进展,包括分子结构与理化性质、含量测定方法及内控质量标准、多种生物学活性(抗病毒、抗肿瘤、神经元保护作用、炎症反应的抑制作用),同时对S632的构效关系及其作用机制也进行了探讨。