以成纤维细胞作为饲养层供角朊细胞生长

体外角朊细胞培养已有多年的历史，随着人们对角朊细胞(Keratinocyte，KC)生长状况、结构功能及生物学特性的不断了解，培养技术日趋完善。比较成熟的是以NIH3T3细胞作为饲养层，有血清培养法和无血清培养法，前者可以培养出整张细胞膜片用于临床；后者用于对KC特性的实验研究，但3T3细胞作为异种细胞，存在伦理学问题及潜在的危害，因此本研究用成纤维细胞作为饲养层培养KC，旨在观察其促贴壁、生长和分化作用，为临床提供理论依据。     

大学生人际关系情况与网络成瘾程度之间的关系

随着科技的进步,互联网的普及程度迅速提高,它改变了现代人的生活方式、工作方式和交往方式。中国互联网络信息中心（CNNIC）于2014年7月发布了《第34次中国互联网络发展统计报告》［1］,报告中显示：截至2013年12月31日,我国网民规模达6．32亿,手机网民规模为5．27亿,20～29岁网民占据上网人群的30．7％。高校大学生是互联网使用最积极的群体。     

用于修复组织缺损的人真皮成纤维细胞体外培养

目的　体外培养人真皮成纤维细胞。方法　利用胶原酶消化法培养人真皮成纤维细胞 ,然后通过细胞形态学、免疫组织化学等方法进行分析鉴定。结果　培养的细胞为长梭形 ,并表达成纤维细胞波形蛋白、Ⅰ型胶原蛋白。结论　培养出高纯度的人真皮成纤维细胞 ,可作为填充材料修复组织缺损     

改良人脱细胞真皮基质对成纤维细胞Ⅰ型前胶原mRNA表达的影响

主要试剂和仪器：hoechst 33258购自美国Sigma公司，鼠抗人波形蛋白抗体、异硫氰酸荧光素（FITC）标记的抗小鼠IgG购自北京中杉金桥生物技术有限公司，逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）试剂盒购自大连宝生物工程有限公司，B肌动蛋白、Ⅰ型前胶原引物购自上海博亚生物技术有限公司。IX71型荧光显微镜购自日本Olympus公司，PCR扩增仪购自德国Eppendorf公司。     

壳聚糖-明胶-果胶仿生网络膜对间充质干细胞增殖和矿化的影响

目的：探讨采用壳聚糖、明胶和果胶制备的仿生网络膜对间充质干细胞（MSCs）增殖和矿化的影响,评价其用于构建组织工程骨的可行性。方法：采用仿生学方法,将壳聚糖、明胶和果胶按照一定比例制作成新型仿生网络膜。实验分为对照组（MSCs+常规培养基）、材料组（MSCs+网络膜+常规培养基）和材料+成骨诱导培养基（OS）组（MSCs+网络膜+OS培养基）。倒置相差显微镜下观察细胞形态表现,扫描电镜（SEM）观察细胞生长及细胞外基质分泌情况,MTT法检测细胞增殖情况（MSCs分为阴性对照组和材料组,分别以空白培养液和含材料的培养液培养）,茜素红染色检测细胞中钙无机物表达情况,实时聚合酶链反应（Real time-PCR）测定细胞中骨钙素（OC） mRNA和骨桥蛋白（OPN） mRNA表达水平。结果：网络膜材料呈半透明薄膜状,倒置相差显微镜下MSCs为短梭形,细胞成簇状聚集生长。SEM下观察,细胞培养第7天可见梭形细胞;培养第14天时细胞数量增多,以伪足状突起锚定于材料表面;培养第21天时,细胞聚集并分泌大量细胞外基质。材料组细胞增殖水平与阴性对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。茜素红染色,网络膜上细胞被染成橘红色。Real time-PCR法,材料组和材料+OS组MSCs中OC mRNA在接种后第7和14天时表达水平较低,第21天时其表达水平明显升高,达到峰值;OPN mRNA在第7天明显表达,第14天时表达水平达峰值,第21天略有下降;与对照组比较,不同时间点材料组和材料+OS组细胞中OC mRNA和OPN mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,而材料组与材料+OS组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：壳聚糖-明胶-果胶仿生网络膜具有良好的生物相容性,MSC在其表面可正常生长和增殖,在不加诱导剂的情况下可以诱导MSCs表达矿化相关的基因和蛋白。     

假性特发性甲状旁腺功能减退症误诊3年1例

1　病历报告患者 ,男 ,4 8岁 ,因全身抽搐 30min于 1999年 12月 5日急诊入院。患者 15min前开始抽搐 ,救护车到患者家 ,经仔细观察发现患者神志恍惚 ,焦虑、不安、定向失常 ,双侧腕及手掌指关节屈曲 ,指间关节伸直 ,膝关节及髋关节屈曲 ,双足呈强直性伸展 ,无牙关紧闭及双眼上翻 ,无口吐白沫 ,无恶心、呕吐 ,无二便失禁。既往体健 ,无体态畸形及智力障碍 ,3年前开始阵发性抽搐 ,在外院诊断为癫疒间 ,每次发作时静注抗癫疒间药物 ,平时在家未坚持口服药物。查体 :T 36 .8℃ ,P 90次 /min ,R 2 0次 /min ,BP 14 0 / 90mmHg ;神志恍惚 ,呼吸…     

ADM调控细胞生长的生物学性质及修复皮肤缺损的实验研究

目的:探讨高渗盐-NaOH消蚀法制备脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)调控成纤维细胞(fibroblast,FB)生长的生物学性质并进行皮肤缺损修复的动物实验.方法:用高渗盐-NaOH消蚀法制备得到人ADM,将人FB与ADM体外复合培养,免疫组化和透射电镜鉴定细胞生长和增殖情况;通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测FB Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达.同样方法制备大鼠ADM,观察其结构;制备SD大鼠全厚皮肤缺损的模型,将ADM移植到创面进行修复.术后2周、4周、6周对修复创面进行大体形态学和组织学观察.结果:人FB可以在ADM上贴附、生长和增殖;与培养板上的人FB相比,ADM内FB Ⅰ型、Ⅲ型前胶原mRNA的表达降低.鼠ADM三维结构完整,排列整齐;移植后6周,皮肤表面光滑韧性好;表皮,真皮交界处乳头状结构出现,表皮细胞分化良好,约7～8层细胞,真皮内胶原纤维排列整齐.结论:ADM具有良好的调控细胞生长的生物学特性,修复皮肤创伤效果好.     

两种不同培养体系培养人角朊细胞的特征

目的对比有饲养层的有血清培养体系(feeder layer，serum-containing medium，FSCM)和无血清培养体系(serum free medium，SFM)培养人角朊细胞(keratinocyte，KC)的特征。方法以两种不同培养体系培养人KC，比较24h细胞贴壁数、完全汇合时间和最终分化形式。结果KC在两种不同培养体系中的形态、24h细胞贴壁数和完全汇合时间无统计学差异。FSCM体系能促使角朊细胞发生终末分化；SFM体系内角朊细胞增殖较FSCM体系快，但未发生终末分化。结论有饲养层的有血清培养体系培养人角朊细胞形成复层膜片，适合临床应用；无血清培养体系培养人角朊细胞形成单层细胞，适合KC生物学性征的实验研究。     

构建独立学院形态学教学新模式的初探——以病理学课程示例

以数字切片为切入点,结合病理数字资源平台、BB教学平台和翰博尔远程教学系统,通过数字网络互动+数字切片为载体改革独立学院病理学教学手段和方法,然后推广到组织与胚胎学、病原生物学、口腔组织病理学等课程,提高学生自主学习能力,旨在培养学生独立思考、分析和解决问题的能力.     

乙型肝炎病毒携带者检测HBV-DNA的临床意义

传统的乙肝大、小三阳分型已不能适合现代医学发展的需要，随着分子生物技术的不断深入，HBV-DNA检测为乙肝病毒携带的诊治开创了新的局面。乙肝病毒指标阳性 肝功能正常可诊断为乙肝病毒携带，但如果结合HBV-DNA检测可明确病毒是否存在复制，这样HBV-DNA阳性而肝功能正常也应进行积极抗病毒治疗。笔分析了河北能源职业技术学院2001级、2002级入学新生中80例乙肝病毒携带检测HBV-DNA的结果，探讨检测HBV-DNA的临床意义。