Polo样激酶3在前列腺癌中的表达及临床意义

目的探讨Polo样激酶3(Polo-like kinase 3,Plk3)在前列腺癌组织中的表达情况及其临床意义。方法采用免疫组化技术检测68例前列腺癌组织及10例正常前列腺组织中Plk3的表达情况,分析Plk3表达与临床病理特征之间的关系,并通过对TCGA数据库中498例前列腺癌患者的Plk3表达值进行GSEA分析。结果 Plk3在前列腺癌组织中比癌旁组织中表达阳性率高,且差异有统计学意义(P=0.034);Plk3表达与前列腺癌的病理分级、临床分期、T分期、淋巴结转移和远处转移有关(P0.05),与年龄和Gleason score无关(P0.05);GSEA分析结果显示Plk3与前列腺癌的增殖和转移相关(FDR q0.05)。结论 Plk3在前列腺癌中表达增高,并促进前列腺癌的进展,其可能通过促进增殖和转移发挥作用。     

Sharpin蛋白在前列腺癌中的表达及其与Gleason评分、t—PSA关系的研究

目的探讨Sharpin蛋白在人不同前列腺癌细胞株中与前列腺癌组织中的表达及其与Gleason评分、血清PSA的关系。方法采用实时荧光定量PCR法,检测Sharpin在DUl45、PC-3和LNCaP3种常见的前列腺癌细胞株和RWPE．1正常前列腺上皮细胞株中的表达。同时采用免疫组织化学方法检测Sharpin在前列腺增生及前列腺癌组织中的表达,并探讨与临床病理特征的关系。结果Sharpin在3种前列腺癌细胞株中的mRNA水平（1．62±0．31,1．36±0．23,2．1±0．1）要明显高于正常前列腺上皮细胞RWPE-1（0．6±0．11）。免疫组织化学结果示Sharpin在前列腺癌组织中高表达,前列腺癌中的阳性表达率远远高于前列腺增生组织,平均染色得分也要远远高于前列腺增生组织。另外,Sharpin在前列腺癌组织中的表达与患者的Gleason评分和术前血清的t-PSA密切相关,均呈正相关（P〈0．05）。结论Sharpin可能是前列腺癌的肿瘤相关抗原,sharpin的表达可能具有评估前列腺癌患者病情、指导临床治疗方案的指导及判断预后及复发的作用。     

沉默前列腺特异性膜抗原促进前列腺癌LNCAP细胞上皮-间质转化及迁移、侵袭的研究

目的 利用RNAi技术沉默LNCAP细胞中前列腺特异性膜抗原（PSMA）表达并检测表达情况,检测沉默PSMA后LNCAP细胞迁移及侵袭等生物学行为的变化情况,以及LNCAP细胞中上皮-间质转化标志蛋白的变化情况。方法 培养LNCAP细胞,分为si-PSMA组,阴性对照（negative control siRNA）组,抑制剂LY294002组和LY294002+si-PSMA组,采用qRT-PCR和Western blot技术检测沉默PSMA后LNCAP细胞中PSMA的mRNA和蛋白表达情况,通过Transwell小室穿透实验检测LNCAP细胞迁移及侵袭能力改变,通过Western blot蛋白印迹法检测E-cadherin、β-cadherin、vimentin,snail等细胞上皮-间质转化标志蛋白的表达情况以及p-Akt(ser473)蛋白表达情况。结果 与阴性对照组相比,si-PSMA组PSMA的mRNA和蛋白表达水平都明显降低（P<0.05）,Transwell结果显示迁移及侵袭细胞增多（P<0.01）,LY294002组细胞迁移及侵袭下调（P<0.05）,...     

婆罗双树样基因4在人前列腺癌细胞和组织中的表达及其与临床预后之间的关系

 目的：评估婆罗双树样基因4（SALL4）在人前列腺癌细胞系和前列腺癌组织中的表达情况,并明确其表达水平和临床病理学参数间的关系。方法：用免疫荧光技术、RT-PCR和Western blotting检测SALL4在LNCaP、DU145、PC-3细胞系和RWPE-1正常前列腺上皮细胞系中的表达。同时用免疫组化方法检测SALL4在前列腺增生及前列腺癌组织中的表达,并探讨其与Gleason评分等临床病理参数的关系。结果： SALL4蛋白在细胞中主要表达于胞浆,在3种前列腺癌细胞株中SALL4蛋白表达水平要明显高于正常前列腺上皮细胞RWPE-1（P＜005）,而SALL4 mRNA表达水平在4种细胞系中无明显差异（P＞0.05）。免疫组化结果显示SALL4在前列腺癌组织中的表达水平明显高于增生和正常前列腺组织（P＜0.01）。SALL4蛋白表达水平与Gleason评分、前列腺癌临床分期、预后及组织前列腺特异抗原（PSA）表达密切相关,而与患者年龄、治疗前血清总PSA水平、前列腺体积及组织雄激素受体表达无明显相关性。结论：SALL4蛋白在前列腺癌中高表达,提示其在前列腺癌的发生、发展过程中可能起重要作用,有可能成为诊断前列腺癌新的肿瘤标志物及评估其恶性程度、进展和预后的参考指标。     

SHARPIN的研究进展

人类线性泛素链相关蛋白SHARPIN在哺乳动物体内广泛存在,主要分布于大脑、心脏和睾丸等器官细胞的胞质内,可通过线性泛素化调节介导NF-kB信号通路激活等途径对机体产生多种生理效应,特别是在炎症和免疫系统的发展中可能起着重要的作用。另外,SHARPIN与肿瘤发生、发展、转归的关系更成为近年来研究的热点,目前发现在多种肿瘤中SHARPIN表达均升高,但机制尚未明确。本文就SHARPIN的分子结构、与机体多种疾病发生发展的相关机制展开综述,并对SHARPIN未来的研究方向进行展望。     

抑制SHARPIN激活Rip1促进LNCaP-AI细胞坏死性凋亡

目的:探讨SHARPIN对去势抵抗性前列腺癌细胞LNCaP-AI坏死性凋亡关键因子Rip1的调控作用,以及对细胞坏死性凋亡的影响。方法:将LNCaP-AI细胞分为TNF-α+Z-VAD(caspase抑制剂)处理组与TNF-α+Z-VAD+Nec-1(Rip1抑制剂)处理组,应用MTS检测各组细胞的活力,研究坏死性凋亡机制在诱导LNCaP-AI细胞死亡中的作用。将LNCaP-AI细胞分为阴性对照组和SHARPIN干扰(si-SHARPIN)组,RT-qPCR验证抑制效率,通过免疫荧光等技术进一步探讨SHARPIN调控坏死性凋亡的具体分子机制。结果:与对照组相比,TNF-α+Z-VAD处理组的LNCaP-AI细胞活力下降28%(P0.05),而TNF-α+Z-VAD+Nec-1处理组的细胞在Rip1被抑制后,细胞活力无明显改变。在LNCaP-AI细胞中,通过siRNA抑制SHARPIN表达后,Rip1表达水平上调,同时,LNCaP-AI细胞坏死性凋亡比例升高。结论:LNCaP-AI细胞可通过坏死性凋亡机制诱导死亡,下调SHARPIN可能通过激活Rip1增强LNCaP-AI细胞坏死性凋亡。     

膀胱肾源性腺瘤八例报告并文献复习

目的:分析8例膀胱肾源性腺瘤的临床特点,以提高对该病的认知和诊疗水平。方法:回顾性分析2016年7月至2019年6月中山大学孙逸仙纪念医院收治的8例膀胱肾源性腺瘤患者的临床和病理资料。男5例,女3例。年龄55(33~71)岁。临床表现为血尿7例,尿路刺激征6例,无明显症状1例。合并疾病:7例膀胱炎,3例尿石症,2例膀胱癌,1例侵袭性结肠肠系膜纤维瘤,1例无其他合并疾病。5例有泌尿系手术史。5例发生于侧壁;5例单发;肿物平均直径为0.9(0.1~1.8)cm。膀胱镜下可见乳头状肿物,表面呈鲜红色,蒂不明显,乳头粗短,触之易出血;部分呈散在片状苔藓样改变。8例均接受经尿道膀胱病变黏膜电切术。结果:8例术后病理检查:镜下见膀胱黏膜组织呈慢性炎,间质水肿,肉芽组织增生,嗜酸性粒细胞浸润,上皮呈中肾样化生。8例均获得电话随访,平均随访时间17.1(2~38)个月,均未出现复发。结论:膀胱肾源性腺瘤确诊依靠病理检查,术中应切除完全,术后应密切观察,及时处理复发和恶变。     

沉默婆罗双树样基因4对前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡生物学行为的影响

目的:使用小干扰RNA(siRNA)抑制人前列腺癌LNCa P细胞中婆罗双树样基因4(SALL4)的表达并对抑制效果进行测定,检测沉默(SALL4)后LNCa P细胞增殖、集落形成及凋亡等生物学行为的变化。方法:培养LNCa P细胞,分为si-SALL4组、阴性对照组与空白对照组。Real-time PCR与Western blotting技术检测SALL4 mRNA与蛋白水平。采用MTS比色法观察各组细胞增殖能力的变化,采用集落形成实验观察各组细胞集落形成能力的变化,流式细胞术研究SALL4对细胞凋亡的影响,利用Western blotting方法检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达情况。结果:与阴性对照组相比,si-SALL4组SALL4 mRNA和蛋白表达水平、细胞增殖能力、细胞集落形成能力均明显降低(P0.05),而凋亡细胞明显增加(P0.05),Bcl-2的表达减弱,而Bax的表达增强。结论:通过siRNA技术沉默(SALL4)表达可抑制前列腺癌LNCa P细胞增殖和集落形成能力,促进细胞凋亡,其促进凋亡作用可能与Bcl-2及Bax表达有关。     

RAI14高表达促进前列腺癌骨转移并与不良预后相关

目的 探究RAI14在前列腺癌细胞系中的高表达与不良预后的相关性及其对前列腺癌骨转移的促进及机制。方法 通过对数据库进行生信分析筛选出与前列腺癌骨转移最密切的差异基因；通过PCR实验探究RAI14在前列腺癌细胞系中的表达情况并通过统计分析探究RAI1 4与无病生存率的关系；使用transwell迁移和侵袭实验、体外共培养实验探究RAI14对前列腺癌进展的影响；通过生信分析和western blot实验初步探究RAI14的下游信号通路；结果 生存分析和临床相关性分析筛选发现RAI14与前列腺癌骨转移关系最密切；RAI14在前列腺癌肿瘤细胞系中高表达，并且有着更低的无病生存率；体外功能学实验及生信分析均表明RAI14能够促进前列腺癌的骨转移；通过生信分析及WB实验发现RAI14通过激活AKT通路发挥作用。结论 RAI14在前列腺癌中高表达并可能通过激活AKT信号通路进而调控前列腺癌的骨转移；RAI14的高表达可能与前列腺癌不良预后相关。     

PSMA对JNK/SAPK通路的激活及对前列腺癌细胞凋亡的调控*

 目的：探讨前列腺特异性膜抗原(PSMA)是否通过c-Jun氨基末端激酶/应激激活的蛋白激酶(JNK/SAPK)通路对前列腺癌细胞凋亡进行调控。方法：利用前期研究中建立的高效阻断PSMA表达的shRNA慢病毒载体,阻断前列腺癌细胞中PSMA的表达作为实验的干扰组;同时利用构建的PSMA载体转染前列腺癌细胞,促进前列腺癌细胞中PSMA的表达作为阳性实验组;不做任何处理的细胞株作为空白组;加入JNK/SAPK抑制剂SP600125作为阴性对照。Western blotting及免疫细胞化学方法观察各组细胞p-JNK/SAPK的表达量,CCK-8法检测细胞生长情况、流式细胞术检测细胞周期及凋亡。结果：Western blotting及细胞免疫化学提示抑制PSMA表达后,p-JNK/SAPK表达水平下降;增强PSMA表达后p-JNK/SAPK表达水平上升;在SP600125作用下,3组细胞p-JNK/SAPK均处于较低水平,且彼此无明显差异。CCK-8法和流式细胞术检测细胞周期提示PSMA表达受抑制后细胞增殖能力下降,细胞S期百分比减少;增加PSMA表达,细胞增殖能力增强,S期百分比增加;在SP600125作用下,3组细胞增殖和S期百分比均处于低水平,无明显差异。在抑制PSMA表达组中,前列腺癌细胞的凋亡率明显升高;而在增强PSMA表达组,细胞凋亡率明显降低;加入SP600125后,细胞凋亡率均低于常规培养组。结论：PSMA通过上调JNK/SAPK信号通路对前列腺癌细胞的增殖、细胞周期及凋亡产生影响,但JNK/SAPK并不是唯一通路。