微量动态浊度法检测细菌内毒素方法的建立与验证

目的 建立使用微量动态浊度法检测细菌内毒素的方法，并进行验证。方法 采用动态浊度法鲎试剂，每孔样品和鲎试剂加样量25 μL，检测波长405 nm，预设OD值0.03，使用半孔酶标板检测，并经过4个实验室协作验证方法的准确度、重现性、线性和范围、耐用性以及重组新型冠状病毒疫苗、重组新型冠状病毒疫苗(5型腺病毒载体)、重组乙型肝炎疫苗、麻腮风联合减毒疫苗、双价肾综合征出血热灭活疫苗、四价流感病毒裂解疫苗共计6种疫苗的品种适用性。结果 高、中、低3个剂量组在4个实验室的共计24次试验总平均回收率分别为100.8%，150.0%，125.3%，RSD值分别为5.3%，11.0%，20.7%；标准曲线在0.01~10 EU·mL^-1内相关系数平均值为0.990，耐用度考察2个来源的鲎试剂对检测的影响符合规定；6个品种的共计18批样品的干扰试验回收率均在50%~200%，干扰试验符合规定。结论 建立了使用微量动态浊度法检测细菌内毒素的方法，该方法具有良好的准确度、重现性、线性和范围、耐用性，并且在6种生物制品中具有良好的品种适用性。该方法可用于常规样品的细菌内毒素检测。     

胆固醇的细菌内毒素检查方法研究

目的 为难溶性辅料胆固醇(供注射用)建立细菌内毒素检测方法。方法 通过筛选出适合溶解胆固醇的有机溶剂,并经过9种排除干扰的方法筛选,采用凝胶法和动态浊度法进行干扰试验,排除了有机溶剂和胆固醇对内毒素检查法的干扰,最终建立了胆固醇的细菌内毒素质量控制方法。检测条件：取胆固醇用无水乙醇配制成20 mg·mL-1溶液,用0.5 mg·mL-1聚氧乙烯(35)蓖麻油水溶液代替细菌内毒素检查用水稀释100倍,按内毒素检查法动态浊度法检测。结果 3批样品使用2个厂家的动态浊度法鲎试剂的回收率均在50%～200%,并且内毒素检测值均<0.1 EU·mg-1。如使用凝胶法,该品种只能使用1个厂家最高灵敏度的试剂进行检测。因此,胆固醇不建议使用凝胶法进行检测。结论 建立了胆固醇(供注射用)细菌内毒素动态浊度法检测方法,用于质量控制。     

中国药典2020年版细菌内毒素检查法补充方法应用研究

目的 为了促进中国药典使用者对新增的内毒素检查方法的理解,保障中国药典2020年版顺利执行,介绍重组C因子法和微量凝胶法起草背景、增订和应用的相关内容。方法 结合9251细菌内毒素检查法应用指导原则和重组C因子与微量凝胶法的研究,梳理2种方法相关内容。结果 结合内毒素检查法与鲎资源现状以及补充方法分类,讨论重组C因子法和微量凝胶法简介、应用现状及使用,详细介绍2种补充方法。结论按照中国药典的要求使用重组C因子法和微量凝胶法,可缓解鲎资源短缺带来的问题,保障注射剂的质量安全。     

中国甲型H1N1流感疫苗质量分析

目的 通过对甲型H1N1流感疫苗批签发中的检测数据进行分析和比较,了解我国甲型H1N1流感疫苗的总体质量状况.方法 按照各企业注册标准对甲型H1N1流感疫苗进行资料审查和全项检定,对关键项目检测结果进行分析和比较.结果 甲型H1N1流感疫苗批签发总体合格率为99.8%,有效成分血凝素含量在标示量的90%～103%范围内,甲醛、卵清蛋白和内毒素含量等安全性指标均符合规定.结论 我国甲型H1N1流感疫苗各项检测总体情况良好,能充分保证疫苗的安全性和有效性,中国食品药品检定研究院的独立检验和批签发对保证上市疫苗的质量发挥了重要作用.

Abstract：

Objective To analyze the laboratory testing data of 2009 pandemic influenza A (H1N1) vaccines during lot release procedure, thus to know the overall quality status of this vaccines.Methods National Institutes for Food and Drug Control(NIFDC) carried out the laboratory test according to the specifications of each manufacture, and the results was analyzed and compared between manufacturer and NIFDC. Results 99.8% of vaccines batches were released by NIFDC, haemagglutinin contents were between 90% to 103 % of labeled values, and testing results slightly differ between manufactures and NIFDC,other items related to safety were all meet specifications. Conclusion The quality of H1N1 vaccines in China were satisfying, the lot release and independent test by NIFDC play important roles to ensure the vaccines' quality.     

伤寒Vi多糖疫苗细菌内毒素检测

目的：建立动态浊度法检测伤寒Vi多糖疫苗的细菌内毒素。方法：参考《中国药典》三部（2010版）,采用动态浊度法对伤寒Vi多糖疫苗中细菌内毒素进行检测,并对标准曲线的可靠性和干扰试验进行验证。结果：本次试验内毒素浓度在0.03125~1.0 EU·mL^-1,r=-0.9972,具有良好线性关系。干扰试验样品回收率在50%~200%。伤寒Vi疫苗细菌内毒素限值确定为600 EU·mL^-1。样品的内毒素值从低于检测限到125.7 EU·mL^-1。结论：采用动态浊度法监控伤寒Vi多糖疫苗中的细菌内毒素是可行的。     

首批单核细胞活化反应检查法专用细菌内毒素国家标准品的建立与应用

目的 为《中华人民共和国药典》（2020年版）9301单核细胞活化反应检查法建立专用的细菌内毒素国家标准品,保障注射剂的质量安全。方法 通过生产制备、协作标定、均匀性考察等研究,建立了首批细菌内毒素国家标准品（单核细胞活化反应检查法专用）。结果 全国5家药品检验所使用3种方法进行协作标定,标定结果间经方差分析无显著性差异,加权平均值为每支152.0 EU,95%置信区间为每支136.2～169.5.0 EU,可信限率为10.96%。均匀性研究符合规定。待标品使用单核细胞活化反应检查法检测结果平均值为每支144.6 EU。最终确定待标品为细菌内毒素国家标准品（单核细胞活化反应测定用）,效价为每支150 EU。结论 建立了首批细菌内毒素国家标准品（单核细胞活化反应检查法用,批号：150608-202101）。     

WHO GPCL质量管理理念在细菌内毒素检测实验室的应用研究

目的研究GPCL质量管理理念在细菌内毒素检测实验室的应用,保障细菌内毒素检测的可靠性。方法从环境设施、仪器设备、数据处理设备、储存设施、标准物质、试剂、材料、外部能力验证、人员及其他共10个方面,将GPCL质量管理理念与细菌内毒素检测实验特点相结合,提出具体方法和参考经验。结果与结论构建了符合GPCL要求的细菌内毒素检测实验室框架。     

重组C因子法检测福沙匹坦二葡甲胺中细菌内毒素的方法学研究

目的 建立福沙匹坦二葡甲胺的细菌内毒素检测方法。方法 使用凝胶法、动态显色法、重组C因子法对福沙匹坦二葡甲胺进行方法学研究。结果 凝胶法在检测浓度范围内结果均为阳性结果，不符合凝胶法进行干扰实验的前提。动态显色法中，出现了不同稀释倍数回收率符合药典规定的情况下，内毒素检测结果差异极大（结果差异>200倍），使用了抗增液仍存在该问题。重组C因子法中，当样品浓度<0.062 5 mg·mL^-1即不存在干扰作用并且不存在上述问题，结果符合规定。结论 福沙匹坦二葡甲胺无法使用经典的凝胶法和动态显色法进行内毒素检测。重组C因子法经过方法学研究，可以用于福沙匹坦二葡甲胺的内毒素质量控制。