银杏内酯对急性肾损伤大鼠的保护作用及机制研究

目的探讨银杏内酯对急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)大鼠的保护作用及对肾组织中腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)及沉默信息调节因子(silent information regulator 1,SIRT1)通路的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组(Control组)、AKI组和银杏内酯低(2.5 mg/kg)、中(5 mg/kg)、高(7.5 mg/kg)剂量组,每组10只。除Control组经皮下注射生理盐水外,其余各组大鼠均经皮下注射庆大霉素80 mg/kg,6 d,1次/d,建立AKI模型后,Control组、AKI组经腹腔给予生理盐水,银杏内酯各剂量组经腹腔给予相应剂量药物,1次/d,共给药14 d。末次给药1 h后,收集各组大鼠血液、尿液后处死大鼠,取肾组织标本,用酶联免疫吸附法检测肾功能指标血清肌酐(Scr)、血清尿素氮(BUN)、血清炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及尿液中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤因子1(KIM-1)含量;用苏木精-伊红染色(HE)检测各组大鼠肾组织病理变化;以试剂盒检测肾组织氧化应激反应物超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;凝胶电泳迁移率转变分析法检测肾脏组织NF-κB活性;蛋白免疫印迹法检测肾组织pAMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达情况。结果与Control组相比,AKI组大鼠可见肾小管上皮细胞崩解脱落、空泡变性等病理损伤,Scr、BUN、NGAL、KIM-1含量、肾组织TNF-α、IL-6、MDA含量及NF-κB活性均明显升高(P0.05),肾组织SOD活性、pAMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达量明显下降(P0.05)。与AKI组相比,银杏内酯高、中、低剂量组肾小管病理损伤减轻,Scr、BUN、NGAL、KIM-1、TNF-α、IL-6、MDA含量及NF-κB活性均明显降低(P0.05),SOD活性、pAMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达量明显升高(P0.05)。与银杏内酯低剂量组比较,中、高剂量组肾小管病理损伤减轻,Scr、BUN、NGAL、KIM-1、TNF-α、IL-6、MDA含量及NF-κB活性均明显降低(P0.05),SOD活性、pAMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达量明显升高(P0.05)。结论银杏内酯可能通过激活AMPK/SIRT1通路,减轻肾脏氧化应激和炎性损伤,改善AKI大鼠病理损伤。     

黄芪总皂苷对心衰大鼠心肌细胞凋亡和线粒体膜电位的影响

目的研究黄芪总皂苷(ASTs)对心衰大鼠心肌细胞凋亡和线粒体膜电位的影响和机制。方法将大鼠分成对照组(normal)、心衰组(model)、AST低、中、高剂量干预组(10、20、40 mg/kg灌胃),每组12只,检测大鼠心功能指标。取大鼠心肌组织,TUNEL法检测细胞凋亡;黄嘌呤氧化酶法检测SOD活性;二硫代二硝基甲基苯法检测GSH-PX活性;硫代巴比妥酸法检测MDA含量;JC-1法检测线粒体膜电位;Western blot检测c-caspase-3、c-caspase-9、p-AKT、p-p38MAPK蛋白和线粒体、胞质中cyt-c蛋白表达水平。结果与对照组比较,model组大鼠LVSP、+dp/dt_(max)和-dp/dt_(max)降低(P0.05);细胞凋亡率和c-caspase-3、c-caspase-9蛋白水平升高(P0.05);SOD、GSH-PX活性降低(P0.05);MDA含量升高(P0.05);线粒体膜电位降低(P0.05);线粒体中cyt-c蛋白水平降低(P0.05);胞质中cyt-c蛋白水平升高(P0.05);p-AKT水平降低(P0.05);p-p38MAPK水平升高(P0.05)。与心衰组比较,AST-L、AST-M、AST-H组大鼠LVSP、+dp/dt_(max)和-dp/dt_(max)升高;细胞凋亡率和c-caspase-3、c-caspase-9蛋白水平降低;SOD、GSH-PX活性升高;MDA含量降低;线粒体膜电位升高;线粒体中cyt-c蛋白水平升高;胞质中cyt-c蛋白水平降低;p-AKT水平升高;p-p38MAPK水平降低;并且黄芪总皂苷作用浓度越大,对心衰大鼠模型影响也越大。结论黄芪总皂苷抑制心衰大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与提高线粒体膜电位和影响AKT、p38MAPK信号通路有关。