低温压力下斑马鱼 ZF4 细胞中 dnmt1 的作用研究 #br#

目的 探究低温压力下 DNA 甲基转移酶 1 ( DNA methyltransferase 1, DNMT1) 的作用。     

探讨青蒿琥酯和扶正化瘀方治疗血吸虫病肝纤维化对线粒体的影响

目的:比较青蒿琥酯(Art)和扶正化瘀方治疗血吸虫病肝纤维化对线粒体自噬的影响。方法:将80只C57BL/6雌性小鼠随机分为健康组、感染组、Art治疗组和扶正化瘀方治疗组,每组20只。感染组及治疗组小鼠感染日本血吸虫尾蚴16条。6周后,吡喹酮（300 mg/kg）2日疗法杀虫。Art治疗组采用每天100 mg/kg腹腔...     

低温下ZF4细胞miR-183-5p的作用研究

目的 探讨miR-183-5p在斑马鱼(Danio rerio)胚胎成纤维(ZF4)细胞低温适应中的表达情况与作用机制.方法 RT-qPCR检测ZF4细胞中miR-183-5p的表达,使用靶基因预测数据库Targetscan Fish预测miR-183-5p的靶基因,Turbofect转染试剂对miR-183-5p模拟...     

血吸虫病肝纤维化过程中Beclin1调节线粒体功能的初步研究

目的探索Beclin1在血吸虫病肝纤维化中与线粒体功能的关系。方法将40只C57BL/6雌性小鼠随机分为感染组和健康对照组,每组20只。感染组小鼠采用腹部贴片法感染日本血吸虫尾蚴20条/鼠。感染后10周,取两组小鼠新鲜肝组织,苏木精-伊红(HE)和Masson染色观察肝组织病变情况。蛋白质印迹(Western blotting)分析肝组织中Beclin1、p-Beclin1及电压依赖型阴离子孔道蛋白1 (VDAC1)的相对表达水平。荧光定量PCR检测肝组织中胶原蛋白Col 1a1、Co1 3a1,以及肝组织中参与线粒体柠檬酸循环反应的柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶、α酮戊二酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶mRNA的相对转录水平。取两组小鼠肝组织制备切片,电镜下观察线粒体形态。提取肝组织线粒体,利用细胞能量代谢仪依次检测加入复合物V底物二磷酸腺苷(ADP)、复合物V抑制剂寡霉素、解偶联剂FCCP、复合物Ⅱ和Ⅲ的抑制剂抗霉素A后5 min线粒体的耗氧率。结果HE和Masson染色结果显示,感染组小鼠肝脏形成肉芽肿,肉芽肿区域发生明显纤维化。Western blotting分析结果显示,感染组肝组织中VDAC1表达水平未发生改变;Beclin1和p-Beclin1的相对表达水平分别为0.65±0.05、0.78±0.03,均较健康对照组下降(P<0.05)。荧光定量PCR结果显示,感染组小鼠肝组织中Col 1a1、Col 3a1mRNA的相对转录水平分别为4.05±0.23、2.71±0.14,均较健康对照组上升(P<0.01);柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶、α酮戊二酸脱氢酶及苹果酸脱氢酶mRNA的相对转录水平分别为0.61±0.03、0.65±0.01、0.41±0.03、0.55±0.01,均较健康对照组下降(P<0.01)。电镜观察可见,感染组肝组织线粒体结构受损,嵴断裂。线粒体功能检测显示,加入复合物V底物ADP后,健康对照组和感染组耗氧率分别为(335±29)、(78±23)pmol/min,差异有统计学意义(P<0.01);加入复合物V抑制剂寡霉素后,健康对照组和感染组耗氧率分别为(80±2)、(31±6) pmol/min,两组耗氧率差异减小但仍有统计学意义(P <0.05);加入解偶联剂FCCP后,健康对照组和感染组耗氧率分别为(159±4)、(42±5) pmol/min,差异有统计学意义(P <0.01);加入复合物Ⅱ和Ⅲ的抑制剂抗霉素A后,两组耗氧率均降为0。结论血吸虫病肝纤维化过程中,Beclin1表达量下降,柠檬酸循环受到抑制,线粒体耗氧率进一步下降。线粒体复合物V是血吸虫病肝纤维化过程中线粒体活性调节的关键复合物。