免疫调节剂对致痫大鼠脑内神经元及小胶质细胞内谷氨酸和蛋白激酶C免疫反应的影响

为了探讨免疫调节作用对癫痫发病的影响与相关机制,应用免疫细胞化学技术研究免疫调节剂干预戊四氮(pentyle-netetrazol,PTZ)致痫时,大鼠脑内及培养的小胶质细胞内谷氨酸(Glu)和蛋白激酶C(PKC)的表达变化。结果显示:在体实验中大鼠大脑皮质及海马,Glu和PKC在生理盐水对照组(NS组)、戊四氮组(PTZ组)、左旋咪唑+戊四氮组(LMS+PTZ组)、地塞米松+戊四氮组(DEX+PTZ组)均有不同的表达,且二种物质变化趋势基本一致。其中PTZ组较NS组表达增强,LMS+PTZ组进一步增强,DEX+PTZ组较PTZ组和LMS+PTZ组明显减弱。离体实验中,PTZ作用小胶质细胞2h即可引起Glu和PKC表达增多,6h达峰值,12h表达有所减弱,且PTZ组Glu和PKC表达较NS组明显增多,免疫增强剂(levamisole,LMS)可进一步增强Glu和PKC的表达;免疫抑制剂(dexamethasone,DEX)则下调其表达。以上结果提示免疫调节剂可能通过作用于神经元和小胶质细胞内Glu和PKC的表达而共同影响癫痫的发病机制和发病状态。     

慢性癫痫大鼠海马内GABA_A受体γ_2亚单位的改变──原位杂交组织化学研究

将马桑内酯作腹腔注射诱发大鼠慢性癫痫动物模型。然后，对模型动物和对照动物海马组织进行ＧＡＢＡ_Ａ受体γ_２亚单位的原位杂交组织化学研究。结果表明，慢性癫痫动物海马回和齿状回内的ＧＡＢＡＡ受体γ_２亚单位ｍＲＮＡ较对照组明显减少。提示ＧＡＢＡＡ受体γ_２亚单位可能在癫痫发病机理中起一定作用。     

地塞米松对谷氨酸钠致痫大鼠脑电图及GABA免疫反应的影响

为了探讨糖皮质激素的抑痫效应 ,本研究用免疫细胞化学方法和脑电图仪观察了地塞米松对谷氨酸钠致痫大鼠脑电图以及 GABA免疫反应的影响。结果显示 :大鼠在注射谷氨酸钠前 3 0 min经腹腔注射地塞米松 ,能明显减轻严重的癫痫发作症状和脑电图中高电位的痫波发放 ,并使海马齿状回及大脑皮层 GABA阳性神经元表达明显增强。显微图象统计分析 :与致痫组相比 ,抑痫组 GABA阳性神经元平均光密度值增加 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 )。上述结果提示 :地塞米松具有抑制谷氨酸钠诱发癫痫的作用 ,其抑痫效应可能与增强 GABA的表达有关。     

脑缺血后大鼠海马及纹状体一氧化氮合酶阳性神经元的变化

夹闭大鼠双侧颈总动脉２ｈ后，用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶反应观察了大鼠海马及纹状体一氧化氮合酶阳性神经元的变化及神经损伤。结果显示：在缺血损伤严重的ＣＡ１区及齿状回一氧化氮合酶阳性神经元较正常动物明显增多并深染，而在同样严重受损的纹状体一氧化氮合酶阳性神经元较正常者明显减少。结合文献及本结果提示：一氧化氮在脑缺血所致的神经损伤中起着重要作用，而海马、纹状体的一氧化氮合酶阳性神经元本身可能具有不同的抗伤害机制．     

舌肌的GABA能神经支配-HRP逆行追踪和免疫组织化学结合法研究

用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪与免疫组织化学结合的方法研究大白鼠舌下神经核至舌肌的投射.结果在舌下神经核内观察到三种标记细胞:(1)HRP单标细胞;(2)GABA单标细胞;(3)HRP和GABA双标细胞.首次证实了舌下神经核中有GABA能神经元,并可投射至舌肌.     

谷氨酸钠和地塞米松对大鼠神经细胞代谢性谷氨酸受体1免疫反应性的影响

为了探讨糖皮质激素的抗痫效应，分别用成年大鼠以及培养的新生大鼠的神经细胞，在经谷氨酸钠和地塞米松处理后，进行免疫细胞化学染色。观察其代谢性谷氨酸受体1（mGLUR1)免疫反应性的变化，并对实验结果进行图像分析。结果发现：经谷氨酸钠致痫处理后，大鼠海马CA1区以及培养的神经细胞的mGLUR1免疫反应阳性细胞均较正常对照组增多，平均光密度值增加；再经地塞米松处理后，mGLUR1免疫反应阳性细胞则较致痫组减少，平均光密度值减少。上述改变经统计学分析均有显著性差异。结果提示：地塞米松可以抑制谷氨酸钠诱发的癫痫发作，其作用途径之一可能是通过抑制mGLUR1的表达实现的。     

大白鼠体感区皮质与皮质下结构间的传入、传出联系

将HRP注入大白鼠体感区皮质,用TMB法成色反应观察顺、逆行标记的神经元结构。结果表明:体感区皮质与皮质下结构间存在着广泛的传入、传出联系。作者认为,其主要机能意义可能是:①缝核、兰斑核和网状结构等参与大脑皮质的感觉及镇痛机制;②体感区皮质与躯体感觉性核团间存在着返馈回路,从而调节一级感觉传入信息。     

大鼠颞叶皮质谷氨酸能神经元至纹状体的投射

用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪与免疫细胞化学结合方法,对大鼠颞叶皮质谷氨酸(Glu)能神经元至纹状体的投射进行了研究。结果发现,将HRP注入一侧新纹状体后,从侧颞叶皮质Ⅲ～V层内可见3种不同的标记细胞:HRP单标记细胞、Glu单标记细胞和HRP与Glu双标记细胞,其中HRP单标记细胞及HRP与Glu双标记细胞以同侧略多。提示,大鼠颞叫皮质Ⅲ～V层的Glu能神经元有至双侧纹状体的投射,以同侧为主,此外尚有含其他神经递质的神经元也直接投射至纹状体。     

IL-1β对谷氨酸致痫大鼠大脑皮质、海马内NMDAR_1免疫反应变化的影响

为了进一步探讨 IL -1β在促进癫痫发作中的机制 ,用免疫组织化学方法比较了单纯用致痫量谷氨酸钠致痫的大鼠和预先向侧脑室注射 IL-1β再用阈下剂量的谷氨酸钠共同致痫的大鼠脑内 NMDAR1 免疫反应的变化。结果表明 ,IL-1β和谷氨酸钠共同致痫的大鼠大脑皮质及海马 CA3区 NMDAR1 免疫反应较对照组明显增强 (P<0 .0 5 ) ,与单纯用谷氨酸钠致痫的大鼠没有明显区别。如果预先给予 IL-1ra或 D-AP5则 IL-1β和谷氨酸钠的共同致痫效果不出现 ,脑内 NMDAR1 免疫反应与对照组比较未见明显增强 (P>0 .0 5 )。本实验结果表明 ,IL -1β具有促进癫痫发作的效应 ,这种促癫痫效应的发挥与谷氨酸受体具有协同作用 ,并与通道型 NMDA受体 R1 亚单位表达的增加有关