GMP法玻璃化冷冻人胚胎的效果观察

目的探索GMP法玻璃化冷人胚胎的可行性。方法选用IVF中多精受精的4-10细胞阶段的胚胎为研究对象，先后在玻璃化1液（10％乙二醇＋10％二甲亚砜）和玻璃化2液（20％乙二醇＋20％二甲亚砜＋0．3M蔗糖）中分别平衡1mim和0．5mim，然后用GMP管虹吸胚胎直接浸入液氮。其结果与常规的程序化慢冻进行比较。结果GMP法的存活率、胚胎完整率、卵裂球存活率比程序化慢冻法更高（分别为94．4％对73．9％，P〈0．01；79．6％对33．9％，P〈0．01；91．6％对67．8％；P〈0．01），但卵裂球完全死亡率更低（0％对10、4％；P〈0．01）。结论GMP法玻璃化冷冻人胚胎是可行的。     

不同病因对卵母细胞透明带、胚胎发育和妊娠结局的影响

目的:探讨女性不同病因对卵母细胞透明带、胚胎发育和妊娠结局等的影响。方法:回顾性分析因单因素不孕体外受精治疗的197个周期,以输卵管因素为对照组(n=145),比较多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)(n=25)、子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)(n=19)和不明原因不孕症(n=8)等各组的受精率、种植率、妊娠率以及透明带双折射性和透明带厚度。结果:平均获卵数PCOS组(17.9±1.9枚)显著高于其它各组(对照组:11.3±0.6枚,EMs组:9.4±1.2枚和不明原因组:13.1±2.9)(P<0.01),其它各组无统计学差异(P>0.05);PCOS组、EMs组和不明原因组受精率(83.66%、75.40%、77.12%)、优质胚胎率(57.26%、51.14%、59.30%)、种植率(25.53%、17.39%、29.40%)和妊娠率(52.38%、41.18%、42.86%)与对照组(80.13%、58.99%、28.76%、43.70%)间无统计学差异(P>0.05),但EMs组各项指标均低于对照组。透明带双折射值各组间差异极显著(对照组:7.13±0.28,PCOS组:4.97±0.55,EMs组:3.67±0.75,不明原因组:14.19±1.41)(P<0.01),其中EMs组透明带双折射值最低。受精当日透明带厚度EMs组显著高于其它各组(对照组:18.84±0.07,PCOS组:18.48±0.17,EMs组:19.75±0.24,不明原因组:18.98±0.26)。结论:EMs对受精率、妊娠率和透明带双折射值等的影响最明显,透明带的双折射值和厚度可在一定程度上反映不同病因对卵母细胞发育潜力的影响。     

毛囊闭锁三联征1例

患者,男,29岁。面部、腋窝反复丘疹、脓疱、囊肿、脓肿、瘢痕增生16年,累及颈项部、腹股沟、臀部、大腿根部6年,加重3月。皮肤组织病理示:表皮轻度角化过度、角栓形成,棘层增厚,上皮角延长,基底细胞层色素颗粒增生,真皮内胶原纤维增生、致密,真皮血管、毛囊周围少量单一核细胞为主的炎细胞浸润。分泌物细菌、真菌涂片示:G+球菌。分泌物细菌培养为无乳链球菌。药敏结果示对头孢拉定、强力霉素、氨苄霉素等敏感。诊断为完全型毛囊闭锁三联征。     

毛囊闭锁三联征1例

患者,男,29岁。面部、腋窝反复丘疹、脓疱、囊肿、脓肿、瘢痕增生16年,累及颈项部、腹股沟、臀部、大腿根部6年,加重3月。皮肤组织病理示:表皮轻度角化过度、角栓形成,棘层增厚,上皮角延长,基底细胞层色素颗粒增生,真皮内胶原纤维增生、致密,真皮血管、毛囊周围少量单一核细胞为主的炎细胞浸润。分泌物细菌、真菌涂片示:G+球菌。分泌物细菌培养为无乳链球菌。药敏结果示对头孢拉定、强力霉素、氨苄霉素等敏感。诊断为完全型毛囊闭锁三联征。     

水牛成纤维细胞核移植的研究

本研究对影响水牛耳部成纤维细胞核移植效果的因素进行了探讨。体外成熟 2 2h的水牛卵母细胞经显微操作去核后 ,将一个经传代培养的水牛耳部成纤维细胞注入到胞质内。经核移植的水牛卵母细胞用 5μM离子霉素激活处理 5min ,然后在含有 2mM 6 -甲二氨基嘌呤 ( 6 -DMAP)的培养液培养 3h。当成纤维细胞用DNA合成抑制剂Aphidicolin( 0 .4μg/ml)培养 1d或 2d再进行核移植时 ,其囊胚发育率 ( 2 .0 %和 0 )明显低于 ( p <0 .0 5)对照组 ( 4.9% ) ,虽然其分裂率 ( 6 0 .9%和 6 0 .5% )与对照组 ( 6 2 .9% )无明显差异 ( p >0 .0 5)。当成纤维细胞的培养代数由G5增加到G6和G7时 ,囊胚发育率亦随之下降 ( 5.3% ,2 .0 %和 1 .8% ,p <0 .0 5) ,但分裂率无显著差异 ( 6 8.0 % ,6 0 .9%和 6 0 .7% ,p >0 .0 5)。结果表明 ,在现有核移植实验条件下 ,水牛成纤维细胞的培养代数应控制在 5代之内 ,且不必用DNA合成抑制剂对其进行周期调控     

水牛精子胞质内显微受精技术的初步研究

本研究探讨了水牛精子胞质内显微受精技术的可行性及操作条件的改善对水牛ICSI结果的影响。结果表明 :1.将精子操作液中PVP的浓度从 10 %降低到 5 % ,注射后卵母细胞的存活率无显著差异 (10 0 %vs .97.8% ;P >0 .0 5 ) ,分裂率明显提高 (79.4 %vs.88.6 % ;P <0 .0 5 ) ,囊胚率有所提高 ,但无显著差异 (2 3.5 %vs .2 4 .2 % ;P >0 .0 5 )。 2 .显微注射时卵母细胞第一极体置于相当于时钟 6点的位置与 12点位置相比 ,分裂率无显著差异 (89.5 %vs.86 .2 % ;P >0 .0 5 ) ,但囊胚发育率明显提高 (43.4 %vs.2 7.5 % ;P <0 .0 5 )。 3.离心和不离心的卵母细胞注射后的分裂率分别是 94 .3%和 91.3% ;囊胚发育率分别是 2 3.4 %和 2 7.5 % ,差异均不显著 (P>0 .0 5 )。结论 :1.适当降低PVP的浓度可以促进水牛卵母细胞获得胚胎发育的能力 ,并且不会增加精子显微注射的难度。 2 .注射时水牛卵母细胞的极体位于 6点的位置 ,卵母细胞获得胚胎发育的能力高于 12点位置。3.水牛卵母细胞的低透明度不会影响显微受精的效果。     

水牛卵母细胞去核方法的摸索

本研究对水牛卵母细胞的去核方法进行了摸索。首先通过盲吸法去核,摸索水牛卵母细胞在体外成熟不同时间的成熟率和去核率;其次采用spindle-View系统去核,摸索用这种系统去核的最佳时间。水牛卵母细胞IVM16-18h与IVM 19-21h的成熟率之间有显著差别(43.0％vs58.2％,P<0.05),与22-24h组的成熟率之间有极显著差别(43.0％vs 68.8％,P<0.01).而去核率的情况刚好相反。随着卵母细胞成熟时间的延长,卵细胞的核与PB1的相对距离增大。在体外成熟18h,20h,22h,有较大比例(分别为72.6％、67.9％、64.0％)的卵母细胞中的核与PB1的位置较近,但当成熟时间增加到24h时,这一比例下降到57.6％(72.6％vs 57.6％,P<0.05),如采用Spindle-View系统去核则可消除成熟时间对去核率的影响,这些结果表明:1.水牛卵母细胞的成熟时间的延长不断提高,而去核率呈下降趋势;2.水牛卵母细胞成熟时间的延长会增加核与PB1的相对距离;利用Spindle-View系统可提高成熟时间较长的卵母细胞的去核率。     

蛋白激酶C激活剂对牛卵母细胞体外成熟的影响

近年来的研究证实,除cAMP依赖性蛋白激酶A外,另一在细胞信息传递过程中起重要作用的是磷脂/Ca~(++)依赖性激酶C(PKC)。在大鼠有报道表明,PKC在GnRH诱发卵泡内卵母细胞的成熟过程中起中介作用,因PKC的激活剂OAG、PMA及A23187可在卵母细胞成熟过程中模拟GnRH的作用。然而,在小鼠PKC的激活剂则证明对卵母细胞的成熟具抑制作用,PKC在牛卵母细胞体外成熟中的作用亦未见有报道。因此,本研究将通过测定牛卵母细胞成熟后的受精及早期胚胎发育能力来探讨PKC激活剂在牛卵母细胞体外成熟中的作     

308nm准分子激光联合CO2点阵激光及PRP用于稳定期白癜风治疗的临床效果分析

目的 探讨308 nm准分子激光联合CO2点阵激光及PRP用于稳定期白癜风治疗的临床效果.方法 简单随机选取2020年6月—2021年6月佛山市第一人民医院皮肤科60例稳定期非节段型白癜风患者,数字随机抽取分成3组,每组20例.1组采用二氧化碳点阵激光+308 nm准分子激光治疗,2组采用富血小板血浆(PRP)+308...     

培养液成分对胚胎体外发育的影响

牛体外受精、棱移植或转基因的早期胚胎需体外培养到桑椹胚或囊胚后才能非手术移植到受体母牛受孕。本文综述了体外培养液中能量培养基,血清、牛血清白蛋白（BSA）和聚乙烯醇（PVA）,生长因子、胞浆因子和细胞外基质分子,pH值,EDTA、NaN3和2,4-二硝基苯酚等对胚胎体外培养的影响。