维拉帕米逆转乳头状甲状腺癌对多柔比星抗性中的L-Ca~(2+)/calpain信号转导机制

目的:探讨维拉帕米逆转乳头状甲状腺癌对多柔比星抗性的L型钙离子通道/钙蛋白酶(L-Ca~(2+)/calpain)信号转导通路机制。方法:以培养2 d的人乳头状甲状腺癌TPC-1细胞为实验对象,首先以CCK-8分析法测定细胞存活率对维拉帕米和多柔比星进行配伍试验,确定合适的药物作用浓度及时间。然后将细胞分为空白对照组、多柔比星组、维拉帕米组和多柔比星+维拉帕米组。以全细胞膜片钳技术记录TPC-1细胞的L-Ca~(2+)通道电流,以Western blot法测定蛋白calpain 1及LC3的表达水平。结果:多柔比星组、维拉帕米组与空白对照组相比,LCa~(2+)通道电流密度减小(P0.05);多柔比星+维拉帕米组与多柔比星组相比,L-Ca~(2+)通道电流密度减小(P0.01)。多柔比星组、维拉帕米组与空白对照组相比,calpain 1蛋白表达减弱(P0.05);多柔比星+维拉帕米组与多柔比星组相比,calpain 1蛋白表达减弱(P0.05)。多柔比星组和维拉帕米组与空白对照组相比,LC3蛋白表达增强(P0.05);多柔比星+维拉帕米组与多柔比星组相比,LC3蛋白表达增强(P0.01)。结论:TPC-1细胞抗多柔比星可能与其自噬活性增强有关;维拉帕米能进一步增强细胞自噬活性,致自噬性细胞死亡,从而对抗TPC-1细胞对多柔比星的抗性,其机制可能与自噬的L-Ca~(2+)/calpain 1信号转导通路有关。     

吗啡与gp120致大鼠学习记忆障碍的作用及机制

 目的:探讨吗啡与gp120致大鼠学习记忆障碍的作用与机制。方法:4~6周的SD大鼠,侧脑室注射吗啡与gp120 V3环,Morris水迷宫评价空间记忆能力。TUNEL染色观察大鼠海马组织的阳性凋亡细胞数。Western blot法检测p-ERK的表达情况。结果:与对照组相比,100 μg/kg吗啡组、200 μg/kg吗啡组以及gp120 V3环组均能使大鼠的逃避潜伏期延长(P<0.05),目标象限停留时间以及穿越目标象限次数减少(P<0.05),海马区阳性细胞数增多(P<0.01),海马区p-ERK的表达增多(P<0.01);200 μg/kg吗啡+gp120 V3环组与200 μg/kg吗啡组或gp120 V3环组相比,逃避潜伏期延长(P<0.05),目标象限停留时间以及穿越目标象限次数减少(P<0.05),海马区阳性细胞数增多(P<0.01),海马区p-ERK的表达增多(P<0.01)。结论:侧脑室注射gp120 V3环可致大鼠学习与记忆障碍,吗啡能增强其效应,机制可能与增强海马区p-ERK的表达有关。     

阿尔茨海默病模型小鼠神经网络活动变异和认知功能障碍与其抑制性中间神经元缺失有关

鉴于阿尔茨海默病(AD)可导致认知功能减退和神经网络活动变异,Verret等研究了人类淀粉样前体蛋白(human amyloid precursor protein,hAPP)转基因小鼠(模拟AD的关键病变),发现hAPP小鼠的脑电图在振荡活动减弱期间显示出自发性癫痫样放电,表明神经网络同步性增强。因为这种振荡节律是由抑制性小清蛋白(parvalbumin,PV)细胞产生的,所以hAPP小鼠的神经元网络功能障碍可能是由于PV细胞受损所致。PV细胞富含中间神经元特异性的电压门控钠通道亚单位Nav1.1。     

自噬对HIV-1 gp120V3环介导的海马神经元L型钙离子通道电流的影响

 目的:观察哺乳动物雷帕雷素靶蛋白（mTOR）依赖性自噬信号转导通路对HIV-1 gp120V3环介导的海马神经元L-型钙离子通道电流的影响。方法：取出生1 d内的乳鼠海马神经元原代培养7 d后用于实验。实验分为2个平行实验组,即空白对照组、gp120V3组、自噬阻断剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）组和gp120V3+3-MA组;空白对照组、gp120V3组、自噬激动剂雷帕雷素（rapamycin)组和gp120V3+rapamycin组。以膜片钳技术记录海马神经元的L型钙离子通道电流。结果：gp120V3组及3-MA组与空白对照组比较,L型钙离子通道电流密度增大（P<0.05）;gp120V3+3-MA组与gp120V3组比较,L-型钙离子通道电流密度增大（P<0.05）;rapamycin组与空白对照组比较,L型钙离子通道电流密度减小（P<0.05）;gp120V3+rapamycin组与gp120V3组比较,L型钙离子通道电流密度减小（P<0.05）。结论：从电生理角度证明,自噬可能参与了HIV-1gp120V3环介导的海马神经元L型钙离子通道电流的改变。