大鼠下丘脑及邻近区域催产素免疫阳性神经元与垂体后叶的关系

本文运用免疫细胞化学PAP及ABC法,显示大白鼠下丘脑内OXT免疫阳性神经元,并于垂体后叶注射WGA-HRP,显示下丘脑中逆行标记细胞,结合免疫细胞化学方法,观察下丘脑及其邻近区域内HRP与OXT双标记细胞,证实下丘脑视上核、室旁核、穹窿前核和后核、血管周细胞群、下丘脑视前区、下丘脑前区及外侧区、背侧副细胞群内、室周部、第三脑室侧壁室管膜细胞下及室间孔部室管膜细胞下,均有OXT免疫阳性神经元,其中至少部分神经元可发出向垂体后叶的投射纤维。位于第三脑室侧壁室管膜下及室间孔部室管膜下的神经元,可能监测脑脊液中各种因素的变化,调节垂体后叶OXT的分泌,也可能直接通过共树突向脑脊液内释放OXT。     

P物质对大鼠下丘脑催产素及加压素免疫反应性神经元Fos癌蛋白 …

为研究Ｐ物质激活的下丘脑大细胞神经分泌神经元及其分布，将Ｐ物质注入大鼠侧脑室，用Ｆｏｓ癌蛋白免疫组织化学结合催产素或加压素抗血清免疫组织化学的双标记法，检测了下丘脑各大细胞神经分泌核区域激活的催产素及加压素免疫反应性神经元。结果表明：Ｆｏｓ免疫强化反应性的神经元主要见于第三脑室周围区及室旁核，在视上核及其他下丘脑大细胞神经分泌核区仅见到少数至少数Ｆｏｓ免疫反应性神经元。     

正常大鼠脑组织伽玛刀照射后Fos蛋白的表达及变化

目的:观察伽玛刀(γ-刀)照射正常大鼠脑部后,脑内神经元、神经胶质细胞和血管内皮细胞内Fos蛋白的表达及变化。方法:45只正常成年大鼠在脑部受γ-刀照射(100Gy),分别成活0.5h、1h、3h、6h、12h、1d、3d、7d、14d、30d至3个月后处死,灌流固定,冰冻切片,用抗Fos蛋白的免疫组织化学方法对切片进行观察。结果:在照射靶区和非靶区的大脑皮质等结构内的神经元、神经胶质细胞和血管内皮细胞均出现Fos阳性表达。Fos表达有二次高峰,第一次在3～24h之间,均为胞核染色;第二次在14天后,出现三种阳性细胞,第一种仅胞核染色,第二种胞浆染色,第三种胞核、胞浆均染色。结论:作者认为第一种者为正常反应细胞,第二种者为严重受损细胞,第三种者为中间状态细胞。     

大鼠下丘脑催产素及加压素样神经元与脑啡肽样传入纤维末梢的关系

用免疫组织化学ABC双标记法,显示大鼠下丘脑各大细胞神经分泌核团中催产素样免疫反应(OT-li)、加压素样免疫反应(VP-li)神经元、亮-脑啡肽样免疫反应(L-ENK-li)和甲-脑啡肽样免疫反应(M-ENK-li)纤维末梢,并对不同神经分泌核团内脑啡肽样传入纤维末梢与OT-li及VP-li神经元的关系加以分析。结果发现,L-ENK-li及M-ENK-li纤维末梢在下丘脑各神经分泌核团中,与OT-li及VP-li神经元均有一定程度的接触关系。L-ENK-li与M-ENK-li纤维末梢在第三脑室周、前连合核、背内侧和背外侧副核、穹窿前和后核的OT-li及VP-li神经元周围最密集,在视上核、室旁核次之,在血管周细胞群内的OT-li及VP-li神经元周围密度较低。这些神经分泌性核团内L-ENK-li纤维末梢,均较M-ENK-li纤维末梢密集。表明脑啡肽能传入纤维末梢,与视上核、室旁核及各神经分泌副核(除血管周细胞群外)中的OT-li及VP-li神经元,均有不同程度的接触关系。因此,脑啡肽能传入纤维末梢可能在大细胞神经分泌系统OT-li及VP-li神经元分泌活动的调节中,起较广泛的重要作用。     

大鼠前连合核神经元对渗透压和血管紧张素Ⅱ刺激的神经性反应——脑片电生理研究

在大鼠下丘脑离体脑片上,用电生理细胞外记录法研究了前连合核神经元的放电频率及其波形。实验观察到的前连合核自发放电神经元有不规则或规则的连续性放电活动,少数神经元有短阵性放电或不放电。这些神经元中的绝大部分可因脑片浸浴液中给予血管紧张素Ⅱ而被兴奋(放电频率增加),约1/3—1/2神经元对高渗透压刺激呈抑制性反应(放电频率减少),也有少数神经元可因高渗透压刺激而兴奋或无反应。前连合核的这些电生理特性大致与视上核、室旁核相似,也有一些与视上核、室旁核不同之处。对记录后的脑片进行组织化学及免疫组织化学染色的结果表明,记录部位在前连合核内,该部位有许多催产素样免疫阳性社经元。上述研究结果提示:前连合核的大细胞神经分泌神经元在水平衡的调节中起重要作用。     

用免疫组织化学方法显示电生理记录部位神经元的化学性质——离体脑片法研究

500μm厚的冠状脑片取自新鲜大鼠下丘脑前部。在人工孵育条件下进行电生理观察,看到前连合核和第三脑室前部室周区部分神经元的电活动可被人工脑脊液中加入血管紧张素Ⅱ所兴奋,被提高人工脑脊液中的Ca~(++)浓度所抑制。这些电生理反应与大细胞内分泌神经元的电生理特性一致。记录结束时,记录部位用记录电极中的染料标记,脑片浸泡固定4—8h,恒冷箱切片,用抗催产素和抗加压素抗体孵育,ABC反应。结果在记录电极尖端所在部位看到数量不等的催产素或加压素免疫阳性神经元。上述电生理和免疫组化结果表明,研记录到的部分神经元可能含催产素或加压素免疫反应物质。本文报告了用免疫组织化学方法显示离体电生理标本,特别是记录部位神经元的免疫化学特性的实验结果。     

大鼠下丘脑第三脑室周催产素样神经元与脑脊液关系的电镜研究

本研究用高浓度戊二醛灌注固定、包埋前ABC免疫酶染色方法,显示了大鼠下丘脑第三脑室周与脑脊液密切相关的室管膜内及室管膜下OT-LI神经元丛。结果发现:在室旁核后大细胞亚核水平,第三脑室腔的顶及底部常有一些OT-LI轴突终末突入第三脑室腔,与脑脊液相接触,其纤维来源不明;透射电镜下见:这些OT-LI轴突终末附于室管膜细胞之上或夹行于微绒毛之间,常与第三脑室室管膜形成一种类似突触的连接,绝大多数OT-LI轴突终末内含有大量线粒体,其轴突包膜均呈节段性增厚。在视前区至室间孔水平的第三脑室底部,可见到OT-LI神经元胞体突入室管膜细胞间,似部分与脑脊液直接接触,透射电镜下见此类OT-LI神经细胞仅隔一层极薄的室管膜细胞浆与脑脊液相接触。在第三脑室侧壁室管膜下常有较密集的室管膜下神经元树突丛,透射电镜下常见到紧贴室管膜下走行的OT-LI树突,而且往往有轴突与之形成轴-树突触。上述结果提示,室管膜下的OT-LI神经元及树突可能既接受脑脊液中各种信息物质的调控又受到一些传入神经轴突终末的突触性传入控制而实施其分泌活动;突入脑室腔的OT-LI辅突可能是脑脊液中OT的产生途径之一。     

电生理观察与免疫组织化学方法在脑薄片上的结合

<正> 对离体脑组织薄片进行电生理观察具有定位准确、不受长距离神经环路或神经内分泌因素影响以及给药剂量容易掌握等优点。为进一步了解记录电极邻近神经元和神经终末的化学性质,本组实验对完成了电生理观察并有记录电极尖端定位的下丘脑薄片(厚40-500μm)进行浸泡固定,恒冷箱切片10-15μm,融表涂有明胶的载片上,用抗催产素(OT)和抗加压素(VP)血清孵育,ABC反应之后,DAB或葡萄糖氧化酶法呈色,光镜下观察结果。记录电极尖端处有一直径大约数十微米的组织损伤区,周围可看到数量不等的棕黄色(DAB