抗血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa Fab抗体的原核表达及其生物活性

目的：研制抗血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa Fab抗体。方法：通过问接免疫荧光试验和血小板聚集抑制试验，选取鼠源抗血小板糖蛋白Ⅱb／Ⅲa单克隆抗体(mAb P140)。从分泌该mAb的杂交瘤细胞株(P140)中，克隆到抗体轻链基因和重链Fd段基因，构建原核表达重组质粒p3MH／P140x-Fd，并在XLI-Blu菌株中进行表达。采用钴亲和层析法对P140 Fab抗体进行纯化，用SDS-PAGE、ELISA和Western blot等方法，对P140 Fab抗体进行检测，并通过血小板聚集抑制试验，观察P140 Fab抗体的抗栓活性。结果：SDS-PAGE和Western blot表明，纯化的P140Fab抗体的相对分子质量(Mr)约为47000。ELISA的结果显示，P140 Fab抗体可与人血小板特异性结合。在体外ADP诱导的血小板聚集试验中，P140 Fab抗体对血小板聚集的抑制作用成剂量依赖性，IC50的平均值为16．85mg/L。结论：成功地研制出具有抗栓活性的抗血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa的Fab抗体。     

糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体拮抗剂在抗血小扳治疗中的应用及其研究进展

近年来，抗血小板药物在基础研究及临床应用方面取得了一些新的进展，尤其在心脑血管疾病的预防和治疗中疗效显著。新型的抗血小板药物正在不断进入临床试用，特别是抗血小板膜糖蛋白药物在广泛深入的研究之中。本文对近年来糖蛋白Ⅱb／Ⅲ a受体桔抗剂在抗血小板治疗中的应用及其研究进展进行了综述。     

验方治疗脓疱疮

脓疱疮亦称脓痂疹，俗称黄水疮。主要由金黄色葡萄球菌及链球菌感染所致，多发生于头面及四肢暴露部位。皮损初期为丘疹——水疱——脓疱，易破，流黄色稀薄之脓液，结黄色或灰黄色痂，中央无自愈倾向，向周围皮肤蔓延再发新疮易感染。每年夏季是本病的多发季节，特别是儿童多发此病。若治疗不及时，可并发多种严重疾病，如：肺炎、肾小球肾炎，败血症等。笔者在多年临床实践基础上，收集并反复验证治疗此病的验方，此方简单，疗效奇特。介绍如下。     

免疫紊乱在原发性肾病综合征发病机制中的研究进展

原发性肾病综合征(primary nephritic syndrome,PNS)患者的Th1/Th2及其相关细胞因子的失衡,可以对其高敏体质、低丙种球蛋白血症等并发症做出适当的解释.T调节细胞(Treg)、Th17的失衡导致相关细胞因子的紊乱,从另一角度解释了 PNS的发病机制.利妥昔布可有效治疗难治性肾病并使Treg...     

溴甲酚紫法检测血清白蛋白方法学评价

正血清白蛋白(albumin,ALB)是血浆中含量最多、功能最重要的一种蛋白质。它广泛地存在于人体的血液、淋巴、肌肉组织中,属于非专一性的运输蛋白,其含量的测定对临床疾病的诊断、治疗、预后判断都具有非常重要的意义,其测定结果的准确性也因此而受到广泛的重视。不同试剂在测定ALB时是否存在差异以及测定结果的可比性是一个值得关     

吸烟量对高血压患者血脂的影响

目的探讨吸烟量对高血压患者血总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响,为冠心病的防治提供依据。方法采用流行病学问卷调查表的形式,没有吸烟史的高血压患者99例和有吸烟史的高血压患者105例,并按吸烟史的情况进行调查,按吸烟量分为吸烟0、1、2、3级。对比分析4个等级组四项血脂水平。结果吸烟1、2、3级TC、TG、LDL水平显著高于吸烟0级(P<0.01),吸烟3级HDL显著低于吸烟0级(P<0.01)。结论吸烟与高脂血症有密切关系,是高血压病的危险因素之一,吸烟可影响高血压病的防治。     

疑似强直性脊柱炎患者HLA-B27检测与分析

目的通过对872例强直性脊柱炎(AS)疑似患者HLA-B27抗原的检测,分析HLA-B27抗原与AS的相关性及其临床意义。方法选取872例AS疑似患者外周血,采用流式细胞仪检测T淋巴细胞膜上的HLA-B27/B7抗原,并对患者的表达情况进行分析。结果 872例AS疑似患者男女比例为1.8∶1,HLA-B27抗原总阳性率为27.29%,,男女患者阳性率分别为32.50%和17.95%(P0.05),男女患者B27+/B7-单抗表达率(%)分别为39.16±42.79和20.96±33.86(P0.05),平均荧光强度分别为5.35±5.44和3.35±3.87(P0.05),差别显著。结论用流式细胞技术检测T淋巴细胞HLA-B27的有助于AS的诊断和鉴别诊断。     

抗血小板单克隆抗体重组质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达

目的:在原核细胞中表达抗血小板Fab抗体,为研制治疗性抗血小板抗体奠定基础.方法:从含有抗血小板抗体轻链基因和重链Fd段基因的克隆载体pGEM T-Easy上经双酶切获得抗体轻链基因和重链Fd段基因片段,将其以特定位点分别插入噬菌体抗体表达载体p3MH上,构建原核表达重组质粒p3MH/P140κ-Fd.转化E. coli XLI-Blu感受态细胞,并进行诱导表达,用ELISA方法进行鉴定.结果:血小板抗体轻链基因和重链Fd段基因片段准确插入p3MH载体,重组质粒在大肠杆菌表达的上清中含有与血小板特异性结合的Fab抗体.结论:在原核细胞中成功克隆并高效表达了可溶性的抗血小板Fab抗体.     

小切口单臂外固定支架治疗闭合胫骨骨折

我院1999年1月-2003年12月应用小切口单臂外固定支架治疗闭合胫骨骨折56例，取得满意疗效。现报道如下。     

人白介素22对刀豆蛋白A致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的建立小鼠急性肝损伤模型,分析和评价人白介素22在小鼠急性肝损伤模型中的保护作用。方法利用刀豆蛋白A致小鼠急性肝损伤模型,分析并评价模型效果。在此基础上将雌性小鼠随机分为正常组、保护组及模型组;保护组和模型组分别尾静脉注射重组IL-22蛋白和生理盐水6h后,尾静脉注射ConA致小鼠急性肝损伤,正常组尾静脉注射等量生理盐水。16h后检测小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）活性,同时取小鼠肝组织进行病理学检查。结果IL-22能明显降低小鼠血清的ALT、AST水平,减轻ConA对肝组织的病理损伤。结论IL-22对ConA致小鼠肝损伤具有保护作用。为进一步研究其保护作用机制奠定了基础。