减少新生儿产伤的助产技巧

目的 研究如何减少接产时新生儿的损伤。方法 该院2004年1月-2004年6月住院经阴分娩病人1691例，随机分为研究组826例，对照组865例。对研究组采用旋转法接生，在胎头缓慢娩出后，让其自然复位和外旋转，轻轻下压胎头，若前肩不能娩出，随即助产人员一手五指分开，置于胎头枕颈部，慢慢旋转胎头并轻牵胎颈，旋转的方向是保证旋转后胎儿面部朝下，同时双肩内收，此时不要在宫底加压。对照组采用传统下压胎头法接生，即在胎头娩出后，下压胎头及胎颈，使前肩从耻骨弓下先娩出，再托胎颈向上使后肩从会阴前缘娩出。观察两组新生儿产伤情况。结果 研究组826例中，新生儿锁骨骨折1例（发生率0．12%），臂丛神经损伤0例（发生率0）；对照组865例中，新生儿锁骨骨折10例（发生率1．16％），臂丛神经损伤3例（发生率0．35％），两组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论 旋转法接生操作简便易行，能减少新生儿产伤和出肩困难，可作为常规接产手法使用。     

模拟微重力对NIH-3T3细胞clock及bmal1基因表达的影响

目的探讨模拟微重力对NIH-3T3细胞节律基因clock与bmal1 mRNA表达的影响。方法 NIH-3T3细胞采用回转器分别回转培养6 h,12 h,18 h,24 h,30 h,36 h,42 h和48 h,同时设置1 G静置培养为对照组。Trizol试剂提取细胞总RNA,实时定量PCR法检测节律基因clock及bmal1 mRNA在各时间点的相对表达量。通过余弦法获取节律参数,并经振幅检验分析是否存在昼夜节律。结果 clock及bmal1基因mRNA的表达趋势相近。对照组clock与bmal1 mRNA相对水平呈现节律性表达,而回转组表达无节律性。回转组mRNA相对水平最大值出现于约6 h时间点,最小值出现在约18 h,而对照组分别出现于约18 h与24 h。与对照组比回转组的周期延长了约16 h。回转后clock与bmal1的峰值相位前移。结论 NIH-3T3细胞中clock与bmal1的表达存在同步化的转录特征。模拟微重力可影响clock与bmal1节律的周期长度及峰值相位。     

GFP mRNA在树突状细胞中的转染及其影响因素分析

目的:探讨绿色荧光蛋白(GFP)mRNA在树突状细胞(DC)中的转染及其影响因素。方法:选用gfp报告基因,在体外利用含T7RNA聚合酶的mMESSAGERNA转录试剂盒,合成含有帽子结构的GFPmRNA,通过酵母多聚A聚合酶加尾,制备结构完整的GFPmRNA。与此同时,从人的外周血液中分离单核细胞,并在体外经GM-CSF和IL-4刺激分化为DC。通过转染试剂介导将合成的GFPmRNA转染到DC内并使其表达。采用流式细胞术检测其转染效率和表达水平。结果:体外合成GFPmRNA,经转染试剂介导,实现了gfp基因在DC中的表达。不同的转染试剂、mRNA用量和细胞密度对mRNA的转染效率有较大的影响。采用Transmes-sengerTransfectionKit转染试剂,1μgGFPmRNA在200μLX-VIVO-15无血清培养基中的转染密度为2.5×109/L的DC,可获得较好的转染效果(转染效率达27%以上)。结论:在适当的条件下,通过mRNA转染DC可获得较高的转染效率。     

急性心肌梗死的护理体会

急性心肌梗死是心内科常见的危重病症，起病急、变化快、病死率高。准确及时的抢救，高质量的护理是降低病死率的重要环节。1995年正月～1996年6月共收治急性心肌梗死患者36例，将护理体会报告如下。1临床资料本组男21例，女15例，年龄48～82岁，平均住院43d。治疗结果：死亡2例，其它全部好转出院。2护理体会2．1吸氧吸氧的目的是提高患者的血氧含量，有利于梗死边缘区缺血心肌的供氧，从而限制梗死范围的扩大。应用商流量吸氧6～8／min，浓度为40％～60％，但要防止患者发生氧中毒。2．2生命体征的观察体温：由于急性心肌梗死患者出汗较多…     

足月分娩宫颈水肿和宫颈坚韧98例患者利多卡因涂抹的应用体会

目的:足月分娩中宫颈水肿和宫颈坚韧患者利多卡因涂抹的应用体会。方法:38例宫口开大2～3cm的宫颈坚韧肥厚患者随机分成观察Ⅰ组和对照Ⅰ组各19例,60例宫口开大4～9cm宫颈水肿的患者也随机分成观察Ⅱ组和对照Ⅱ组各30例。观察组均用利多卡因涂抹宫颈,对照组不用药。结果:观察Ⅰ组和观察Ⅱ组与相应的对照Ⅰ组和对照Ⅱ组相比,在总有效率、分娩方式、宫口开全时间均有统计学意义(P<0.01或P<0.05),而产后2h失血率无统计学意义(P>0.05)。结论:利多卡因涂抹在足月妊娠分娩时宫颈坚韧和宫颈水肿第一产程和第二产程中疗效显著、安全、方便。     

人扁桃体淋巴细胞的分离及其表型分析

目的建立人扁桃体淋巴细胞的分离培养方法，研究淋巴细胞的表型分布，为外周淋巴细胞的研究提供实验数据。方法通过临床外科手术摘除人的扁桃体组织，经过切割、刮细胞、裂解红细胞、过滤和Fieoll梯度离心等分离过程制备扁桃体混合淋巴细胞，通过荧光抗体标记和流式细胞术对混合淋巴细胞亚群的表型CD19、CD4、CD8、CD14、CD83进行分析。结果在所分离的细胞中，CD19表型的B淋巴细胞约占细胞总数的50％以上；T淋巴细胞约占30％，其中辅助T细胞(CD4)和溶细胞T细胞(CD8)分别占细胞总数的24％和7％，CD4／CD8值约为3；CD14表型的细胞(主要是单核细胞、巨噬细胞)约占总细胞数的20％以上。CD83表型的细胞(主要是成熟的树突细胞和部分B细胞)占总细胞数的7％左右：同时还观察到在体外培养过程中，混合淋巴细胞的形态和表型分布均发生一定的变化。结论本文研究和建立的扁桃体淋巴细胞的分离培养方法操作简单，制备的淋巴细胞具有较长的存活时间。通过表型分析证明，扁桃体淋巴细胞主要以B细胞为主，其次为T细胞。在培养过程中表现分布均发生一定的变化。     

可可毛色二孢菌对白木香产生倍半萜诱导作用

为了明确可可毛色二孢菌Lasiodiplodia theobromae对白木香产生倍半萜的诱导作用。采用气质联用（GC-MS）对可可毛色二孢菌PDA发酵液进行检测,发酵液中检测到茉莉酸类化合物（jasmonates,JAs）。利用固相微萃取-气质联用（SPME-GC-MS）检测发酵液处理后白木香愈伤中沉香倍半萜成分,发现其能够诱导白木香愈伤产生α-愈创木烯（α-guaiene）,δ-愈创木烯（δ-guaiene）,α-蛇麻烯（α-humulene）3种沉香倍半萜。推测可可毛色二孢菌可产生茉莉酸类物质,其作为伤害信号分子诱导白木香产生倍半萜。     

人IgG Fc基因的扩增及其在真核细胞中的分泌性表达

目的:通过扩增人IgG Fc基因并与人CD5基因信号肽序列融合,构建真核分泌型表达载体,实现在真核细胞中高效表达,为利用Fc基因制备融合抗原,研究抗原基因和抗原蛋白的免疫治疗奠定了基础.方法:从外科手术切除的扁桃体中分离人淋巴细胞,用Trizol试剂提取淋巴细胞的总RNA,通过RT-PCR方法从淋巴细胞中扩增人IgG Fc 片段的基因序列,并将其克隆到pMD-T18 质粒载体上.然后以上述含有Fc片段序列的质粒载体和含有人CD5基因的质粒为模板,通过重叠延伸PCR方法将Fc片段与CD5信号肽基因序列进行融合,并将其插入到pcDNA3.1A 真核表达载体上,构建成与CD5信号肽融合的Fc片段基因的分泌型表达载体.经磷酸钙介导转染293T细胞使其表达.结果:测序表明扩增的Fc基因序列与GeneBank发表的序列完全一致,Western blot检测结果表明,本实验构建的Fc基因分泌型表达载体能够在真核细胞进行高效分泌性表达,表达水平在转染后48小时可达50 μg/1×106细胞.结论:采用RT-PCR扩增了人IgG Fc cDNA 基因,经过与人CD5信号肽序列融合构建了分泌型表达载体,实现了在293T细胞中的高效表达,这为今后构建特定抗原基因与IgG Fc基因融合表达载体,研究DNA疫苗及Fc的生物佐剂提供了实验依据.     

十二指肠巨大溃疡急性穿孔修补术后Bancroft法旷置残端38例分析

目的探讨十二指肠巨大溃疡急性穿孔修补后用Bancroft法旷置残端的临床疗效。方法回顾性分析本院2003年8月至2007年1月应用穿孔修补后用Bancroft法旷置残端术治疗十二指肠巨大溃疡急性穿孔38例的临床资料。结果本组病例术后未发生残端瘘，无死亡病例。结论对十二指肠巨大溃疡不能切除时，用Bancroft法旷置是比较实用、有效、可靠的。     

人CD23基因的扩增及其在HEK 293T细胞的高效表达

目的建立一个有效表达CD23的系统。方法采用RT-PCR方法,从外周血淋巴细胞中扩增人的CD23cDNA基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3·1B上,构建成pcDNA3·1/CD23质粒表达载体;将pcDNA3·1/CD23质粒转染HEK293T细胞,通过流式细胞仪和Westernblot检测CD23在细胞中的表达情况。结果扩增的CD23cDNA序列与文献报道的一致;通过构建表达载体和转染细胞实现了CD23cDNA在293T细胞膜上的表达。转染效率达80%以上,并获得了较高水平的表达。结论扩增CD23cDNA基因,经过转染HEK293T细胞,实现了CD23在HEK293T细胞的高效表达。