α1,3半乳糖转移酶基因敲除巴马克隆猪与核供体巴马猪心、肺解剖学与组织学的比较

目的探讨α1,3半乳糖转移酶(GGTA1)基因敲除巴马克隆猪与核供体巴马猪心、肺解剖学与组织学发育变化的异同。方法选取GGTA1基因敲除巴马克隆猪2头(BM164和BM155)及核供体巴马猪1头(BMM2),利用大体解剖学和常规石蜡切片HE染色技术,对其心脏和肺脏进行解剖学与组织学比较研究。结果核供体成年健康巴马猪心脏呈倒置圆锥形,前缘凸,后缘短而直,心表面冠状沟和左右纵沟清晰可见;心壁结构完整,可分3层,心内膜较薄,心室内膜下有较多浦肯耶纤维,心肌排列紧密,横纹清晰,闰盘少且不清楚,心外膜较厚,无髓神经纤维明显。GGTA1基因敲除巴马克隆猪与核供体巴马猪相比较,心脏在解剖学与组织学构造上均未见明显差异。核供体成年健康巴马猪肺脏呈粉红色海绵状,质软而轻,富有弹性;肺脏小支气管软骨丰富,黏膜下层内气管腺明显,可见炎性细胞,细支气管黏膜皱褶呈指状向管腔凸起,周围有炎性细胞浸润,肺泡大小较一致,肺泡壁较厚,尘细胞少见。GGTA1基因敲除巴马克隆猪肺脏解剖学与组织学结构与核供体巴马猪基本一致。结论 GGTA1基因敲除巴马克隆猪与核供体巴马猪心、肺解剖学构造无明显差异,组织学结构正常,心、肺发育良好。     

GGTA1-/-五指山小型猪SLA I类基因分子特征及与HLA相似性分析

【摘要】 目的 明晰α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除（GGTA1-/-）的五指山小型猪SLA经典Ⅰ类基因分子结构特征及其与人HLA的相似性,对研究异种器官移植细胞性排斥反应具有重要意义。 方法 本研究采集6头祖代GGTA1-/- 五指山小型猪耳组织,利用RT-PCR对SLAⅠ类基因（SLA-1、SLA-3、SLA-2）扩增、克隆及测序,对序列进行BLAST分析,并采用生物信息学方法对SLAⅠ类基因分子结构特征及其与人HLA的同源性进行分析。 结果 测序分析表明,共获得6条等位基因序列,其中3条为已公布的等位基因（SLA-2*1102、SLA-3*0401、SLA-3*0403）,另3条为新等位基因(SLA-1*0401wz01、SLA-1*wzs01、SLA-2*wzs01)。五指山小型猪与人HLA同源性为70.5%~72.1%。 SLA-1*0401wz01、SLA-1*wzs01、SLA-2*wzs01、SLA-2*1102和SLA-3*0401的CD8+分子识别的关键结合域与人HLA氨基酸序列比对,均仅在位点225、228处发生了突变（T→S、T→M）,其它位点高度保守。SLA-2*wzs01和SLA-2*1102与人HLAⅠ类基因NK细胞抑制性受体（killer inhibitory receptor,KIR）结合区氨基酸同源性较高,在NKTA-1亚型结合域内仅有1个氨基酸差异,而在NKTA-2 和NKTA-3亚型结合域内有2个氨基酸差异。 结论 从免疫细胞介导的异种排斥反应角度出发,GGTA1-/- 五指山小型猪SLAⅠ类基因氨基酸序列与人HLA高度相似,可作为未来猪-人异种器官移植的良好供体之一。