人IFN—γcDNA逆转录病毒载体的构建及其在Lewis肺癌细胞的稳…

应用分子克隆技术构建了含８４３ｂｐ的全长人ＩＦＮ－γｃＤＮＡ的逆转录病毒表达载体Ｎ２／ＩＦＮ，采用磷酸钙共沉淀方法转染包装细胞ΨＣＲＥ和ΨＣＲＩＰ，并能得到较高滴度的含病毒颗粒上清。然后应用ΨＣＲＩＰ细胞培养上清的复制缺陷性病毒颗粒感染Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞（ＬＬＣ），经过Ｇ４１８筛选克隆得到了一株能稳定分泌ＩＦＮ（６４００Ｕ／ｍｌ）的克隆，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹证实ＩＦＮ－γ基因已插入ＬＬＣ基因组。结     

TIMPs抑制肿瘤细胞的浸润

组织金属蛋白酶抑制剂（ＴＩＭＰｓ）家族至今已被命名的有ＴＩＭＰ－１和ＴＩＭＰ－２，分别与９２－ｋＤ和７２－ｋＤＩＶ型胶原酶优先地结合，形成１：１的复合物。实验结果表明，在体外，两者均可以抑制肿瘤细胞的浸润；在体内，多次静脉注射ｒＴＩＭＰ，可以抑制某些恶性肿瘤的浸润和转移。将ＴＩＭＰｓ的ｃＤＮＡ导入某些肿瘤细胞，可以使这些细胞的恶性表型发生逆转。     

E—cadherin及相关指标的临床病理学意义

恶性肿瘤具有从原发灶向其他部位转移的特点 ,而转移过程中的许多环节都与肿瘤细胞的黏附特性发生改变有关。在原发病灶肿瘤细胞脱离相邻细胞后经血或淋巴转移 ,这预示着肿瘤细胞与黏附相关的分子发生了变化 ,这些分子包括整合素(ｉｎｔｅｒｇｒｉｎ)、选择素 (ｓｅｌｅｃｔｉｎ)、ＣＤ44和钙黏附蛋白 (ｃａｄｈｅｒｉｎ)等。上皮性钙黏附蛋白 (Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ)是一种分子量为 12 0ｋｄ的穿膜糖蛋白 ,其胞浆部分直接与某种ｃａｔｅｎｉｎ或另一种ｃａｔｅｎｉｎ相连 ,两者所构成的复合体再通过某种ｃａｔｅｎｉｎ与肌动蛋白细胞骨架相…     

人IFN－γcDNA逆转录病毒载体的构建及其在Lewis肺癌细胞的稳定表达

应用分子克隆技术构建了含８４３ｂｐ的全长人ＩＦＮ－γｃＤＮＡ的逆转录病毒表达载体Ｎ２／ＩＦＮ，采用磷酸钙共沉淀方法转染包装细胞ΨＣＲＥ和ΨＣＲＩＰ，并能得到较高滴度的含病毒颗粒上清。然后应用ΨＣＲＩＰ细胞培养上清的复制缺陷性病毒颗粒感染Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞（ＬＬＣ），经过Ｇ４１８筛选克隆得到一株能稳定分泌ＩＦＮ（６４００Ｕ／Ｍ）的克隆，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹证实ＩＦＮ－γ基因已插入ＬＬＣ基因组。结果表明，该逆转录病毒载体系统能有效地介导基因转移，并能使目的基因在靶细胞稳定表达。结果为肿瘤基因治疗及制备新型肿瘤疫苗奠定了基础。