心室辅助装置引发血管性血友病因子损伤的检测方法研究

目的由于血液成分血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)的机械损伤现象发现和研究较晚,至今仍然定义模糊且缺乏相关的评价标准,非常不利于心室辅助装置(ventricular assist device,VAD)的创新设计与发展。本文通过研究分析,提出检测vWF受高剪切应力损伤的实验方法。方法人血作为基础血样,离心式血泵BPX-80剪切前后的猪血作为测试血样,通过免疫印迹法,将电泳分离的vWF转移到膜上,然后用特异性抗体检测膜上vWF多聚体的分子量分布情况,根据vWF分子量的灰度值比值,定量分析vWF多聚体的机械损伤,整个实验过程包括制胶、电泳、转印、免疫反应和显色5部分。结果得到条带清晰完整且容易区分的vWF分子量分布图。其中健康人血vWF高分子量、中分子量、低分子量区域的灰度值比值与文献中健康人血vWF的实际比值相一致。BPX-80血泵剪切猪血中高分子量vWF与未经剪切的猪血高分子量vWF灰度值的比值随时间呈下降趋势,表明BPX-80血泵剪切对猪血中vWF的降解情况。结论成功设计并建立了vWF多聚体分析实验方法,为此后制定vWF机械损伤的标准化体外评价方案提供重要参考。