幼兔缺血预处理在心肌保护第二窗期对未成熟心肌Bcl-2基因mRNA表达的影响

目的　观察幼兔心脏缺血预处理 2 4h对未成熟心肌缺血 /再灌注后Bcl -2mRNA表达的影响 ,探讨未成熟心肌保护第二窗形成的作用机理。方法　 18只 3～ 4周龄幼兔 ,随机分为 3组 ,每组 6只 :Ⅰ组 ,正常对照组 ;Ⅱ组 ,缺血 /再灌注损伤组 ;Ⅲ组 ,缺血预处理组。建立活体心脏缺血 /再灌注损伤模型 ,Maclab/8s系统监测左心室发展压 (LVDP)、左室压上升及下降最大速率 (+dp/dtmax,-dp/dtmax)变化 ,原位免疫杂交 (ISH)方法检测心肌细胞内Bcl-2mRNA的表达。结果　缺血再灌注前 ,各组间LVDP、±dp/dtmax无显著性差异 (P >0 .0 5) ;再灌注 1h后 ,Ⅱ组的LVDP、+dp/dtmax和 -dp/dtmax恢复率分别为 (42 .81± 12 .56) %、(3 0 .67± 16.2 2 ) %和 (2 9.49± 10 .13 ) % ;Ⅲ组LVDP、+dp/dtmax及 -dp/dtmax恢复率分别为 (84.15± 13 .56) %、(69.49± 10 .3 6) %和 (58.3 7± 12 .45) % ,两组间有显著性差异 (P <0 .0 1)。Ⅱ组、Ⅲ组Bcl -2mRNA表达阳性细胞面积百分数分别为 (8.3± 2 .5) %、(76.3±13 .5) % ,两组间有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　缺血预处理可上调Bcl -2mRNA表达 ,参与未成熟心肌保护第二窗的形成 ,促进未成熟心肌缺血 /再灌注后心室功能恢复     

兔高动力性肺动脉高压模型的建立

目的： 研究通过幼兔长时间体－肺循环分流，建立高动力性肺动脉高压模型方法的可行性。 方法： 将1月龄幼兔正中开胸，行左颈总动脉与主肺动脉吻合，形成持续左向右分流。3个月后通过彩超证实吻合血管通畅性，并测定其肺动脉收缩压（PASP）、肺动脉舒张压(PADP)、平均压(MPAP)，观测肺小动脉病理变化、管壁厚度指数(TI)、面积指数（AI）。 结果： 分流组3个月后，21只形成肺动脉高压。分流血管阻断前、后PASP、PADP、mPAP明显高于对照组（P＜0.05）。肺组织病理检查示肺小动脉管壁增厚、管腔狭窄，与对照组比，TI和AI 明显增加（P＜0.05）。 结论： 幼兔经体－肺循环分流手术3个月后，可形成与临床先心病病理生理相接近的高动力性肺动脉高压。该模型稳定、可靠、经济。     

氧相关HRE启动子控制下表达hVEGF165基因重组2型腺相关病毒的获得及鉴定

目的包装及鉴定低氧反应元件（HRE）启动子控制下缺氧诱导目的基因hVEGF165基因表达的2型重组腺相关病毒。方法磷酸钙三质粒共转染方法将pAAV—HRE9-VEGF165、pAAV—Rep／cap、pHelper质粒转染HEK293T细胞，制备2型重组腺病毒相关病毒（rAAV2）。分离培养S—D大鼠心肌细胞，转染rAAV，细胞固定后做免疫细胞荧光染色，检测细胞内血管内皮细胞生长因子（VEGF165）蛋白的表达。结果pAAV—HRE9-VEGF165质粒经测序鉴定，结果与NCBIGenBank公布的人VEGF165 eDNA核苷酸序列（AB021221）完全一致，含HRE启动子及目的基因hVEGF165的2型重组非复制型腺相关病毒包装成功，可感染原代培养的大鼠心肌细胞，缺氧可诱导VEGF165蛋白表达。结论成功包装并鉴定了rAAV—HRE9-hVEGF165载体，可有效转染心肌细胞，VEGF165基因的适时表达，为缺血性心肌疾病的“分子搭桥”治疗提供了更可能的安全性。     

心室内监测管内径与其所测血流动力学指标的关系——小动物心内监测模型

目的 :观察不同内径测压管对左心室血流动力学指标的影响 ,建立一种较稳定的在体心脏血流动力学指标监测方法。方法 :健康中国大耳白兔 32只 ,随机分为 4组 ,每组 8只 ,每组再分为 2个亚组 ,A1 、B1 、C1 、D1 4个亚组分别用内径 1. 30mm ,1 .0 0mm ,0 . 6 8mm ,0 . 5 0mm监测管经左颈总动脉插管到左心室 ;A2 ,B2 ,C2 ,D2 4个亚组分别用内径为 1. 30mm ,1. 0 0mm ,0 . 6 8mm ,0. 5 0mm监测管经左心室.心尖部插管到左心室 ;连续监测血流动力学指标 :左心室收缩压 (LVSP)、左心室舒张末压 (LVEDP)、左心室发展压 (LVDP)、左心室压力变化率 (±dp dt)。结果 :1 A1 亚组组内比较插管后 5min和 2h后各项血流动力学指标差异有显著性 (P <0 . 0 5 ) ;其他亚组内比较插管后 5min和 2h后各项血流动力学指标差异无显著性 (P >0 . 0 5 )。 2 使用相同内径测压管亚组间比较插管后 5min各项血流动力学指标差异无显著性 (P >0. 0 5 )。 3 B1 (B2 )、C1 (C2 )、D1 (D2 )亚组间的 2h内各项血流动力学指标差异有显著性(P <0 .0 1)。结论 :测压管内径对心室血流动力学指标有明显影响 ,建立良好而稳定的心室血流动力学指标监测 ,其管内径不得 <1. 0 0mm。     

前列腺素E1减轻未成熟心肌缺血/再灌注损伤的研究

目的探讨前列腺素E1(PGE1)对未成熟心肌缺血/再灌注损伤后血管内皮细胞的保护作用机理.方法 24只幼兔随机分为3组,每组8只.Ⅰ组为正常对照组,Ⅱ组为缺血/再灌注损伤组,Ⅲ组为给药组(缺血前静脉注射前列地尔10μg/kg).建立在体心肌缺血/再灌注损伤模型,Maclab/8s多功能生理仪监测左心室血流动力学变化,电镜观察心肌血管内皮细胞的超微结构变化.结果再灌注60min后,Ⅲ组左室发展压(LVDP)恢复率及左室压上升及下降最大速率(±dp/dtmax)恢复率(74.5%±13.6%,83.2%±15.3%)显著高于Ⅱ组(42.4%±12.3%,34.8%±11.5%),P＜0.01;Ⅱ组诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性升高,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性下降;与Ⅱ组比较,Ⅲ组eNOS活性明显升高而iNOS活性变化无显著差异.电镜观察Ⅱ组血管内皮细胞水肿明显,基底膜不完整,Ⅲ组内皮细胞轻度水肿,损伤轻.结论 PGE1能够提高eNOS活性,通过一氧化氮途径保护未成熟心肌血管内皮细胞的完整性,减轻未成熟心肌缺血/再灌注的损伤.     

β2-肾上腺素能受体基因转染改善慢性缺氧兔心肌细胞收缩功能及细胞保护作用

长期慢性缺氧可刺激交感神经,血中儿茶酚胺(CA)水平持续升高,导致心肌细胞β-AR脱敏及活性改变[1].本研究旨在观察β2-肾上腺素能受体(β2-AR)基因转染对慢性缺氧心肌细胞收缩功能及细胞凋亡的影响.     

未成熟心肌缺血再灌注损伤后L-精氨酸的保护作用

目的：用幼兔体内心脏缺血再灌注损伤模型，研究小剂量L-精氨酸对未成熟心肌的保护效果。方法：24只新西兰幼兔(3～4周龄)随机分4组，每组6只：正常对照组；缺血／再灌注组；L-精氨酸组；L-硝基精氨酸甲酯组。测定各组的心室血液动力学指标、血浆肌酸激酶和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)、心肌组织中总一氧化氮合酶(NOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及eNOS(eNOS=总NOS-iNOS)活性。结果：L一精氨酸组左心室收缩压(LVSP)、心室内压力变化率(&;#177;dp／dt)、左心室舒张压(LVDt，)恢复明显高于缺血／再灌注组和L一硝基精氨酸甲酯组(P&;lt;0．05)；L-精氨酸组左心室舒张期末压(LVEDP)明显低于缺血／再灌注组和L-硝基精氨酸甲酯组(P&;lt;0．05)。L-精氨酸组的血浆肌酸激酶和LDH低于缺血／再灌注组和L-硝基精氨酸甲酯组(P&;lt;0．05)。缺血／再灌注组、L-精氨酸组、L-硝基精氨酸甲酯组总NOS高于正常对照组(P&;lt;0．05)；L-精氨酸组eNOS高于正常对照组、缺血／再灌注组、L-硝基精氨酸甲酯组(P&;lt;0.05)。4组iNOS差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：小剂量L-精氨酸能改善缺血／再灌注损伤后未成熟心肌的左心室血流动力学指标，这种保护作用是通过提高eNOS活性实现的，而与iNOS活性无关。     

袖状肺叶切除术联合肺动脉成形术后护理

肺癌外科治疗的公认原则是最大限度地切除肿瘤组织及最大限度地保留健康肺组织。然而,当肿瘤距离肺叶支气管开口较近,术前或术中探查证实肿瘤侵犯肺动脉,采用肺叶切除已不能彻底切除肿瘤,而患者又不能接受全肺切除时,肺叶袖状切除术联合肺动脉成形术则为最佳选择,该法既能较完整切除肿瘤,又能最大限度地保存肺功能,符合肿瘤外科治疗原则[1]。回顾总结我科2002年1月~2004年3月间施行的15例行肺叶袖状切除术联合肺动脉成形术的临床资料,现将护理报道如下。1临床资料我院2002年1月~2004年3月,共完成肺癌手术患者185例,其中15例行肺叶袖状切除术…     

外源性HGF基因转染对肺动脉高压兔肺血流灌注及肺动脉压力的影响

目的: 探讨外源性肝细胞生长因子(HGF)基因转染高动力性肺动脉高压家兔后促进侧支肺血管生成、改善肺血流灌注、降低肺动脉压力的可行性。方法: 将肺动脉高压兔随机分为对照组、空病毒组和HGF基因转染组; HGF 基因转染组经气管内滴入法转染Ad-HGF, 对照组和空病毒组分别气管内滴入同体积PBS液和Adeno-Null; 4周后, 通过MacLab/8s多功能生理仪行血流动力学检测, 通过抗FⅧ+α-SMA抗体免疫荧光双标检测肺小动脉密度、FITC-lectin灌注+抗α-SMA荧光双标记了解肺血管灌注情况。结果: 气管内给药4周后, HGF基因治疗组含平滑肌细胞的小动脉密度较肺动脉高压对照组和空病毒组(12.5±2.7)/mm²明显增多(P<0.05); HGF组肺血流灌注获得有效改善, 而肺动脉高压对照组和空病毒转染组肺血管仍处于狭窄甚至闭塞状态; HGF治疗组肺动脉平均压明显低于肺动脉高压对照组和空病毒转染组(P<0.05)。结论: 肺动脉高压模型动物经气管滴入法转染外源性HGF, 可以促进肺侧支血管生成, 增加肺灌注并有效降低肺动脉压力。     

氧自由基在缺血预处理对未成熟心肌延迟性保护机制中的作用

目的　探讨氧自由基 (OFRs)在缺血预处理 (IP)对未成熟心肌延迟性保护 (第二窗 )机制中的作用。方法　 3～ 4周龄的幼兔 30只 ,随机分为 5组 (n =6 ) :Ⅰ组 ,正常对照组 ;Ⅱ组 ,缺血 再灌注损伤组 ;Ⅲ组 ,单纯IP组 ;Ⅳ组 ,IP +L -精氨酸 (L -arginine ,30 0mg kg)组 ;Ⅴ组 ,IP +L -硝基精氨酸甲酯 (L -NAME ,10mg kg)组。建立幼兔活体心脏缺血预处理及缺血 再灌注损伤模型 ,监测左心室血流动力学变化 ,化学比色法检测心肌一氧化氮合酶 (NOS) (iNOS eNOS)活性 ,同时测定SOD活性及MDA含量。结果　缺血预处理 2 4h后 ,各组间的LVDP、±dp dtmax无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;缺血 再灌注 6 0min ,Ⅱ组和Ⅳ组的LVDP、+dp dtmax、-dp dtmax恢复率低于Ⅲ组和Ⅴ组 (P <0 .0 1)。缺血前 ,Ⅲ组和Ⅴ组的iNOS活性高于Ⅱ组和Ⅳ组 (P <0 .0 5 ) ;再灌注 6 0min ,Ⅲ组和Ⅴ组的eNOS活性高于Ⅱ组和Ⅳ组 (P <0 .0 5 )。缺血前和再灌注末 ,Ⅲ组和Ⅴ组的SOD活性高于Ⅱ组和Ⅳ组 (P <0 .0 5 )。结论　OFRs对IP延迟性心肌保护起到了“触发物”的作用 ,而iNOS的升高可能仅是炎性反应标记物 ,eNOS活性的升高可能是形成第二保护窗 (SWOP)的原因之一 ,外源性NO取消了SWOP的形成 ,可能与其清除了OFRs有关。