健康人骨髓CD34~+造血干/祖细胞衰老与年龄的相关性研究

目的探讨增龄过程中健康人CD34~+造血干/祖细胞(CD34~+HSC/HPCs)衰老的变化过程。方法由重庆医科大学附属第一医院血液科骨穿室提供正常人骨髓9例,将其分为青年组3例(女性31岁、男性26岁、男性28岁)、中年组3例(男性59岁、男性57岁、女性52岁)和老年组3例(男性70岁、男性70岁、女性62岁)。提取骨髓单个核细胞(BMNCs)后,免疫磁性细胞分选法分离纯化CD34~+细胞群,流式细胞术检测细胞纯度,台盼蓝染色检测细胞活性,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色观察各年龄组阳性细胞百分比;造血干/祖细胞混合集落培养比较各年龄组CD34~+造血干/祖细胞形成混合集落能力。结果分选前每106个BMNCs中CD34~+细胞群比例为(1. 31±0. 54)%;免疫磁性分选后每106个细胞中CD34~+细胞群比例为(92. 5±0. 39)%。各年龄组人骨髓CD34~+造血干/祖细胞存活率可达99. 1%以上。人骨髓CD34~+造血干/祖细胞的SA-β-gal染色阳性率出现明显的随增龄变化趋势,老年组明显高于中年组及青年组。CD34~+造血干/祖细胞形成的干细胞混合集落能力随年龄增加降低。结论随年龄增加人骨髓CD34~+造血干/祖细胞出现明显衰老,表现为造血增殖能力下降,可能是造成一些老年人血液学疾病的原因。     

芹菜素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后TLR4/NF-κB表达的影响及神经保护作用

目的探究芹菜素对局灶性缺血再灌注后脑组织Toll样受体4(TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)的表达和神经细胞凋亡的影响及神经保护作用。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血(90 min)再灌注(24 h)模型。将70只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组和芹菜素(10、25 mg·kg-1)组。观察芹菜素对神经功能缺损评分及梗死体积的影响,HE染色检测脑组织形态学改变,采用免疫组化法检测缺血核心区皮质和海马CA1区TLR4、NF-κBp65的表达,透射电镜观察缺血核心区皮质和海马CA1区神经元超微结构改变,ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6浓度,TUNEL染色检测细胞凋亡。结果与模型组比较,芹菜素组能明显改善大鼠神经缺损症状,缩小梗死体积,减轻鼠脑病理形态学改变,减少TLR4、NF-κBp65阳性细胞表达,减少血清中TNF-α、IL-6的释放及细胞凋亡数(P<0.05,P<0.01)。结论芹菜素对局灶性缺血大脑能产生神经保护作用,降低神经细胞凋亡,其机制可能与抑制脑组织内TLR4、NF-κB表达有关。     

芍药苷激活2型大麻素受体保护脑缺血再灌注大鼠海马神经元

目的探究芍药苷通过激活2型大麻素受体(CBR2)对脑缺血再灌注大鼠神经的保护作用。方法 144只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、溶媒组、10mg/kg芍药苷组、40mg/kg芍药苷组、CBR2选择性拮抗剂3mg/kg AM630组、40mg/kg芍药苷联合3mg/kg AM630组、CBR2选择性激动剂3mg/kg HU308处理组。线栓法制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型。观察芍药苷对神经功能缺损评分、梗塞体积、脑水肿的影响;采用HE染色观察脑组织病理形态学改变;采用免疫组织化学染色法观察芍药苷对海马区环氧合酶2(COX-2)和caspase-3表达的影响。结果芍药苷能显著改善脑缺血大鼠神经功能评分,降低梗塞体积及缺血侧脑含水量,减轻脑组织病变,抑制海马区caspase-3和COX-2的表达;但预先注射AM630可显著拮抗芍药苷的脑神经保护作用。结论 CBR2可能参与芍药苷对脑缺血再灌注大鼠海马神经元的保护作用。