RAM7,一种新的核蛋白分子在小鼠中枢神经系统的表达

Notch信号途径参与动物多种组织和器官尤其是神经系统的发育调节。 RBP-Jκ是 Notch信号途径中的关键分子 ,RAM7是近年通过酵母双杂交技术发现的与 RBP-Jκ相互作用的蛋白。本实验表达 RAM7C-末端 60 k D的多肽片段 ,并制备特异性的多克隆抗体 ,检测 RAM7在小鼠中枢神经系统的分布。结果显示 :RAM7主要呈细胞核染色 ,在中枢神经系统中广泛分布 ;尾壳核、丘脑室旁核、下丘脑室旁核、室周核等核团内没有 RAM7阳性神经元 ,但存在着一定数量的 RAM7阳性神经纤维 ;另有相当多 RAM7胞浆染色的细胞和神经元以及一些胶质细胞 ,局限在脑室和脑室周围的神经组织中。RAM7分子的分布对其可能的生理功能有一定的提示作用     

针对S基因的siRNA或shRNA表达框对HepG2.2.15细胞中HBV基因表达和病毒复制的抑制作用比较

目的 化学合成针对乙型肝炎病毒（HBV）S基因的siRNA，同时制备针对相同区段的shRNA表达框，并比较二者对HepG2．2．15细胞中HBV基因表达和病毒复制的抑制作用。方法 化学合成针对HBVS基因的带有FITC标记的siRNA，设计合成带有FTrc标记的引物，PCR扩增含有RNA聚合酶Ⅲ启动子H1序列和shRNA编码序列的表达框，并对扩增产物进行纯化，将等摩尔数siRNA和shRNA表达框分别用脂质体转染稳定表达HBV的HepG2．2．15细胞，转染1d后流式细胞仪检测转染效率，转染3d后RT-PCR检测靶基因mRNA的水平，用SDS-PAGE、Westem blot及间接免疫荧光染色检测HBsAg的表达。收集转染前和转染后1、3、5和7d的细胞培养上清，检测HBsAg水平，同时用荧光定量PCR方法检测HBV　DNA的含量。结果成功制备了针对HBVS基因的shRNA表达框，将其与等摩尔数siRNA分别转染HepG2．2．15细胞后，RT-PCR证实细胞中HBV　mRNA水平降低，SDS-PAGE、Westem blot及间接免疫荧光染色检测到HBsAg的表达受到抑制，细胞培养上清中HBsAg和HBV DNA含量下降。与siRNA相比，shRNA表达框对HBV的抑制作用虽然起效较慢，但持续时间更长。结论shRNA表达框和siRNA均可明显抑制HBV的转录和表达，与siRNA相比，shRNA表达框能够更持久地抑制靶基因的表达。     

产房助产士护理存在的风险因素以及防范措施

目的产房助产士护理存在的风险因素以及防范措施。方法选择收治的560例产妇给予探讨,平均分组,参考组选择一般护理干预;实验组选择护理风险管理,对比两组的临床成效方法。结果经过分析,实验组远远强于参考组,结果差异明显,具有临床对比价值。结论对于产妇采取护理风险管理,能够降低不良事件率,提高患者满意度,改善生活质量,确保母婴安全,适合临床广泛应用。     

ERCP在十二指肠乳头癌诊断及治疗中的价值

目的 观察ERCP在十二指肠乳头癌诊断及治疗中的价值。方法 对14例十二指肠乳头癌病人的内镜表现、病理分型及行支架治疗效果进行统计分析。结果 14例经内镜诊断的十二指肠乳头癌均为病理证实，经支架引流术后病人的退黄显效率60．41％、支架平均引流186d，6个月支架阻塞率55．80％。结论 ERCP是诊断和治疗十二指肠乳头癌的有效方法。     

老年前列腺癌患者中预测活检阳性率的相关参数分析研究

目的:为了评估老年前列腺癌患者中相关的参数包括年龄、家族史、前列腺体积、前列腺特异性抗原(PSA)、游离前列腺抗原(FPSA)、游离前列腺抗原(FPSA)/总前列腺抗原(TPSA)、PET-CT或者ECT检查阳性率在预测前列腺穿刺活检率的价值.方法:患者资料是从2008年7月～2013年10月期间我院被初步诊断为老年前列腺癌患者162例,在前列腺活检前行PET-CT或者ECT检查.逻辑回归分析来评估各参数的相关的风险性.建立回归方程式通过逐步回归的各项参数来评估阳性活检的结果,通过ROC分析使用接收区域的方式来评估预测价值.PET-CT或者ECT检查检测的肿瘤发生的准确率和活检结果的比较用卡方检验.结果:在这些患者中通过活检检测出前列腺癌的有60例患者(36.9％).U分析显示各项相关参数在患者诊断中均是影响因素,其中AUC值为0.8657.PET-CT或者ECT检查结果提示有前列腺癌或者有骨转移提示的患者为120例.统计结果提示影像学表现与活检结果之间并没有相关性,肿瘤的影像学表现并不是显著的预测因素.预测活检结果最为准确的参数是FPSA/TPSA(P=0.002).结论:各项参数在老年前列腺癌患者诊断中均是影响因素,合并各项参数的因素要比依靠单一参数而言可以明显提高预测活检率的准确性.确诊老年前列腺癌诊断上单纯通过PET-CT或者ECT检查上是有疑问的,影像学技术提供的诊断结果与PSA化验和活检结果比较更没有意义.     

乙状结肠畸胎瘤一例

乙状结肠畸胎瘤一例孟艳玲患者女，３９岁。因左下腹阵发性胀痛伴排便不规则１６个月就诊，近２月加重，时有大便带血及排便困难。查体：左下腹有压痛及反跳痛，未扪及包块，肠鸣音亢进，余皆正常。大肠镜检查见：进镜约１６ｃｍ见有一巨大球样肿物阻塞肠腔，贴紧右侧壁，...     

老年患者的饮食疗法及护理

随着医学模式的转变及责任制护理的广泛开展，饮食护理越来越得到人们的重视。但老年患者的饮食护理不同于普通患者。人到老年，抗病能力下降，因此极易患各种老年性疾病。常见的老年性疾病有冠心病、中风、高血压、慢支、肺气肿、糖尿病、神经衰弱、腰腿痛、颈椎病、胃溃疡及癌症等。     

重组腺病毒介导的转录因子Runx3在神经胶质瘤细胞中的表达及其亚细胞定位

目的:制备含有融合Flag标签的Runx3基因的复制缺陷型重组腺病毒,感染神经胶质细胞瘤U251,观察外源Runx3在细胞中的表达及亚细胞定位.方法:用PCR的方法扩增Runx3基因,并将Flag标签蛋白的编码基因与RUNX3基因进行融合,构建腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV-Runx3,经Kpn Ⅰ/Xho Ⅰ双酶切鉴定并测序.利用电转化方法将经Pme Ⅰ线性化的pShuttle-CMV-Runx3穿梭载体导入BJ5183重组细菌,获取重组腺病毒质粒Ad-Runx3,再将经Pac Ⅰ线性化的Ad-Runx3重组病毒骨架质粒转染293A包装细胞,包装并扩增病毒.利用该病毒感染神经胶质细胞瘤U251,用免疫印迹法观察外源Runx3在细胞中的表达,用间接免疫荧光法观察其在细胞内的定位.结果:构建并包装表达Runx3蛋白的重组腺病毒,用重组腺病毒感染U251细胞后,经免疫印迹和间接免疫荧光法检测,可见外源导入的Runx3蛋白在细胞核内的特异性定位.结论:成功制备了含有融合Flag标签的转录因子Runx3基因的重组腺病毒,感染U251细胞,在细胞中观察到该分子表达后定位于细胞核中,为研究Runx3在神经胶质瘤发生中的作用奠定了实验基础.     

利用免疫磁珠分离鉴定miRNA靶基因的方法研究

目的:利用免疫磁珠分离鉴定miRNA靶基因,建立一种经济、有效、快捷的miRNA靶基因鉴定方法.方法:直接提取细胞总RNA后加入生物素标记的miRNA分子共孵育,而后利用免疫磁珠分离与miRNA结合的mRNA,或将生物素标记的miRNA分子瞬时转染HeLa或HepG2细胞,48 h后裂解细胞并在离心后应用链霉亲和素磁珠分离与miRNA特异性结合的mRNA.将分离获得的mRNA反转录获得cDNA,并以其为模板,以特异性引物和Oligo(dT)进行PCR扩增,而后经过克隆测序,通过生物信息学方法比对测序结果,鉴定miRNA的靶基因.结果:利用已知的let-7靶基因证实了上述方法的有效性,并通过该方法鉴定出let-7的一个新的靶基因.结论:建立了免疫磁珠分离鉴定miRNA靶基因方法,为miRNA靶基因的研究提供新的实验学方法.     

哈尔滨市城乡人群囊虫病血清流行病学调查

哈尔滨市城乡人群囊虫病血清流行病学调查纪奎滨１佟淑芬１刘岩琳１李明玉１杨晓杰１任力１王文峰１孟艳玲１姚月梅２邹立华２１．黑龙江省哈尔滨市卫生防疫站（１５００１０）２．哈尔滨市职工医学院近年来哈尔滨市囊虫病患者有明显增多趋势，为准确掌握哈尔滨市城乡居民...