人胚胎生殖细胞移植于梗死心肌后不同时期心肌特异转录因子GATA-4的表达

目的:探讨人胚胎生殖细胞(hEGCs)移植入急性心肌梗死大鼠心肌组织后,移植细胞早期心肌特异转录因子GATA-4的表达。方法:取5~10周人胚胎生殖腺嵴和背侧肠系膜,进行人EG细胞的组织块原代及传代培养,以传四代的人EG细胞为移植细胞。40只SD大鼠随机分为两组,移植组将获得的人EG细胞移植到急性心肌梗死大鼠的梗死心肌边缘;对照组用同样的方法给急性心肌梗死大鼠注入PBS。于移植后1天,1、2、4周处死大鼠,用免疫组化方法检测心肌特异转录因子GATA-4在移植细胞的表达。结果:移植后1天,1、2、4周移植组均有移植细胞稳定存活,GATA-4的表达在移植1天时呈弱阳性,1周及2周时呈阳性,4周时强阳性;对照组均未检测出移植细胞及心肌细胞转录因子。结论:随着移植时间的延长,移植细胞GATA-4表达呈增强趋势,移植后4周表达强度最大。     

野生型和突变型RASSF1A基因对人肝癌细胞生长的影响

目的　探讨野生型 /突变型RASSF1A基因的表达对人肝癌细胞株QGY 770 3在体内外生长的影响。方法　构建突变型RASSF1A基因的真核表达载体 ,通过脂质体介导的基因转染法将野生型 /突变型RASSF1A基因的真核表达载体及空载体转染肝癌细胞株QGY 770 3 ,G418筛选稳定表达株 ,并以逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)和Westernblot进行鉴定。通过细胞生长曲线、软琼脂集落形成试验和裸鼠致瘤性试验对各稳定表达株的生物学行为进行检测。结果　成功建立稳定表达野生型和突变型RASSF1A基因的肝癌细胞株。以转染空载体的QGY 770 3细胞为对照 ,野生型RASSF1A基因的表达可明显抑制肝癌细胞在体外的生长 ,显著降低肝癌细胞在软琼脂中形成的克隆数目 (P <0 .0 1)和大小 ,显著减慢裸鼠皮下瘤的生长速度和重量 (P <0 .0 1)。突变型RASSF1A基因的表达对肝癌细胞的生长影响不大。结论　野生型RASSF1A的重表达有助于QGY 770 3恶性表型的逆转 ;野生型RASSF1A基因是一个肝癌相关的抑癌基因。     

人胚胎成纤维细胞对人胚胎生殖细胞生长的作用

目的：研究人胚胎成纤维细胞对人胚胎生殖细胞（EG细胞）生长的作用。方法：采用组织块体外培养法体外培养人EG细胞,不添加任何细胞因子,利用源于胚胎组织自身的成纤维细胞作为饲养层,收集培养3d和9d的上清液,用抗体夹心ABC-ELISA法定量检测其白血病抑制因子（LIF）、干细胞生长因子（SCF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的含量。培养的细胞用免疫细胞化学法进行SSEA-3、OCT-4的检测。结果：培养9d的上清液中3种因子均含量为LIF55．25pg／ml、SCF90．39pg／ml、bFGF26．06pg／ml．均高于培养3d相应的平均含量。培养的细胞SSEA-3、OC-4呈强阳性表达。结论：上清液中LIF、SCF和bFGF的含量与胚胎成纤维细胞的生长呈正比,胚胎成纤维细胞能分泌这些细胞因子,以维持EG细胞体外增殖并抑制其分化。