粘附蛋白单抗解除烧伤休克大鼠微静脉白细胞的粘附作用

目的运用白细胞粘附分子LFA-1单抗和血管内皮细胞粘附分子ICAM-1单抗预防烧伤休克,探讨微静脉白细胞粘附和嵌塞于毛细血管的作用机理.方法30只体重为190-220gWistar大鼠,随机分为盐水组、LFA-1单抗组、ICAM单抗组及LFA-1和ICAM-1联合组.麻醉大鼠,一侧颈动脉和颈静脉分别插管,盐水组和单抗组按0.2mL/100g体重在烫伤前15min分别从肌肉注入盐水和单抗.用80℃热水烫伤大鼠腰部以下躯体30s,复制烧伤休克模型,按Gray法制备大鼠脊斜肌活体微循环观察标本,用装备有Leitz长距离镜头的显微电视放大装置观察微循环的变化,电视测微仪测量细静脉的口径和血管长度、白细胞粘着数选择60μm长度的微静脉进行定量,用红细胞跟踪相关仪测量血流速度,依公式流量＝流速/1.6×3.14×口径2/4,计算出血液流量,观察存活时间.结果烧伤后1h盐水组大鼠微静脉粘着的白细胞开始增多,烧伤后3h更加明显达(14.4±2.5)个(/60μm,下同);LFA-1组粘附的白细胞数较盐水组少,烧伤后3h为(4.3±1.0)个;而ICAM组粘附的白细胞数更少,烧伤后3h为(1.2±1.5)个;LFA-1和ICAM联合组则接近正常水平为(0.8±0.6)个,4组动物烧伤后各时间点白细胞粘着数变化有显著性差异.烧伤后1h各组大鼠V3的流速有不同程度的减慢,盐水组下降得最快联合抗体组下降得最慢,烧伤后各组动物的血管口径变化不大,故血流量的变化与血液流速基本一致.烧伤后1h各组动物血压都有所下降,烧伤后3h下降更为明显,而盐水组下降的幅度最大,盐水组、LFA-1组、ICAM-1组和联合单抗组动物的存活时间分别为(7.6±1.6)h、(11.9±3.0)h、(17.1±7.3)h和(17.3±6.8)h,单抗组动物存活时间明显比盐水组长,联合单抗组存活时间最长,且有一例存活超过24h.讨论烧伤休克早期,白细胞大量附壁滚动,进一步粘着于微静脉和嵌塞于毛细血管,这不仅带来微循环的紊乱,还可能释放出TNF、自由基,溶酶体酶、白三烯等炎症介质,引起组织细胞损害和器官功能障碍,因此解除白细胞的粘着和嵌塞对防治烧伤休克有着重要的意义.微循环的研究表明,烧伤休克在血压下降之前血流的切应力尚无明显变化,但此时已有明显的白细胞附壁粘着,提示有白细胞-内皮细胞粘附力的增加,但休克时LFA-1的表达量并不一定增加而可能通过构型的改变使粘附功能增强.本实验应用LFA-1和ICAM-1单抗预防烧伤休克时微循环障碍,结果表明LFA-1和ICAM-1单抗都能减少微静脉白细胞的粘着嵌塞,后者好于前者而两者联合使用得到更满意的结果.单抗还能提高血流速度和增加血流量,减缓动物血压的下降趋势,对保护烧伤休克的组织器官起到积极的作用.从而延长动物的存活时间.但仍不能存活24h.结论使用粘附蛋白单抗能阻断微静脉白细胞与内皮细胞的粘附,减少白细胞嵌塞于微静脉和毛细血管,达到改善烧伤休克微循环和保护组织细胞的作用,从而延长动物的存活时间.