线粒体能量代谢和DNA复制对小鼠卵子体外成熟、受精及发育的影响

目的 探讨胞质线粒体的氧化磷酸化（OXPHOS）活性或线粒体DNA复制在卵子成熟、受精和胚胎发育过程中的作用。方法 通过在小鼠体外成熟培养液中引入不同浓度的羰基氰4-(三氟甲氧基)苯腙 (FCCP, 10 nmol/L和100nmol/L)或2′,3′-双脱氧胞苷(ddC,10μmol/L和100μmol/L),抑制线粒体OXPHOS活性或线粒体DNA复制,统计分析各组卵子的体外生发泡破裂（GVBD）率、核成熟率、受精率及囊胚形成率,以分析线粒体功能抑制对卵子成熟、受精和胚胎发育的影响。 结果 线粒体OXPHOS活性和DNA复制功能在卵子和胚胎中所发挥的作用并不完全相同。FCCP抑制线粒体OXPHOS活性可显著降低卵子的核成熟率和囊胚形成率;但对卵子的GVBD的发生率和受精率无显著影响。而ddC抑制线粒体DNA复制不影响卵子的体外成熟和受精,但可显著抑制囊胚的形成。 结论 OXPHOS活性主要影响卵子成熟及胚胎发育;线粒体DNA复制则主要影响胚胎发育;而线粒体功能抑制不影响卵子的成熟启动和体外受精。     

子宫内膜息肉摘除术后两种内膜准备方案临床结局的比较

目的：比较子宫内膜息肉摘除术后,应用促性腺激素释放激素激动剂降调节激素替代治疗（GnRH-a+HRT）和激素替代治疗（HRT）进行内膜准备的临床结局。方法：回顾性分析2018年7月至2019年7月在温州医科大学附属第二医院生殖中心子宫内膜息肉摘除术后3个月内行HRT或GnRH-a+HRT方案的患者,比较2组患者的基本情况,囊胚移植情况以及妊娠结局。结果：HRT组患者56例,取消移植1例;GnRH-a+HRT组患者53例,无周期取消。2组患者基本情况差异无统计学意义（P＞0.05）;2组不孕因素差异无统计学意义（P＞0.05）;2组间囊胚移植日子宫内膜情况、囊胚移植情况差异无统计学意义（P＞0.05）;2组间HCG阳性率、胚胎着床率、临床妊娠率、多胎妊娠率与早期流产率差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：HRT方案与GnRH-a+HRT方案均能获得较好的妊娠结局。     

抑制线粒体氧化磷酸化活性对卵子体外成熟、受精及发育的影响

目的:通过建立氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OXPHOS)活性抑制模型,分析线粒体能量代谢在卵子成熟、受精和胚胎发育过程中的作用。方法:卵子体外成熟培养液中引入10和100 nmol/L羰基氰4-(三氟甲氧基)苯腙[carbonyl cyanide p-(tri-fluromethoxy)phenyl-hydrazone,FCCP],以特异性抑制线粒体OXPHOS活性,分析卵子线粒体膜电位强度、三磷酸腺苷含量以及线粒体DNA拷贝数,以验证FCCP效应;检测卵子的活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量、纺缍体和染色体结构完整性,并统计分析卵子体外生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)率、核成熟率、受精率及囊胚形成率。结果:FCCP(10和100 nmol/L)处理组与对照组相比,卵子的核成熟率(55.8%和47.3%,vs.62.9%)、纺锤体/染色体结构完整率(37.9%和34.7%,vs.61.9%)、ROS水平(0.67和0.59,vs.0.94)和囊胚形成率(57.9%和41.8%,vs.68.3%)均有显著降低(P<0.05);而FCCP处理对卵子的GVBD发生率和体外受精率均没有显著影响(P>0.05)。结论:线粒体能量缺乏显著降低卵子的核成熟率、ROS生成、纺锤体/染色体结构完整率和囊胚形成率,但对卵子的GVBD发生率和受精率没有显著改变。     

利用基因组编辑技术治疗唐氏综合征探索性研究进展

唐氏综合征（Downsyndrome,DS）又称21三体综合征,是最常见且严重危害人类健康的染色体病之一,患者的主要表现为智力低下、特殊面容、生长发育障碍并伴随多系统疾病或其他异常。其主要致病原因是患者细胞内多了一条21号染色体。近年来,随着二孩政策的实施、医疗福利的改善,具有生育需求的高龄女性越来越多,然而随着女性生育年龄的增加,DS的发病率明显升高。DS虽非致死性染色体疾病,但DS患者需要特殊照顾和额外的医疗费用,造成了沉重的社会和经济负担。DS至今尚无有效治疗方法,目前临床上主要采取产前筛查和有创性产前诊断来降低DS患儿的出生率,但存在假阳性,较易引发并发症。DS的诊治已成为临床医学中亟待解决的重大问题。基因编辑技术能在活细胞中有效、准确地编辑致病基因,并能实现对特定DNA片段的敲除、插入等,以此为基础从染色体水平上探索治疗DS的新方法,使异常的三倍体细胞（21号染色体）恢复至正常的二倍体细胞有望实现。鉴于此,本文现就利用基因组编辑技术治疗DS的探索性研究进展作一综述。     

BMI对早卵泡期超长方案多囊卵巢综合征患者辅助生殖结局的影响

目的 探讨不同BMI对采用早卵泡期超长方案的多囊卵巢综合征(PCOS)患者行体外受精-胚胎移植(IVF-ET临床结局的影响。方法 选取2016年9月至2020年9月温州医科大学附属第二医院生殖医学中心收治的行IVF-ET的942例(976个周期)PCOS患者为研究对象,并以同期本院收治的1 258例(1 298个周期)男方或输卵管因素导致不孕的非PCOS患者为对照。根据BMI将PCOS患者与非PCOS患者分为低体重组(BMI<18.5 kg/m²组)、正常体重组(18.5 kg/m²≤BMI<24 kg/m²)、超重组(24 kg/m²≤BMI<28 kg/m²)和肥胖组(BMI≥28 kg/m²)4个亚组。分析比较PCOS患者4个亚组及相同BMI下PCOS患者与非PCOS患者一般情况、实验室及临床结局的差异。结果 随着BMI上升,PCOS患者实验室结局出现明显恶化,临床结局中超重儿出生率上升。PCOS与非PCOS各亚组实验室结局比较,P...     

Ü卵子体外成熟对胞质线粒体DNA拷贝和功能的影响

目的 研究卵子体外成熟（IVM）过程对胞质内线粒体的数目、功能及卵子质量的影响,进而探讨IVM卵子低发育潜能的可能机制。方法 实验小鼠随机分为IVM组和体内成熟（IVO）组;应用Real-time-PCR、免疫荧光和荧光-荧光素酶测定法,分别检测IVM和IVO来源卵子的线粒体DNA（mtDNA）拷贝数、线粒体膜电位强度、ATP含量、线粒体分布、胞质ROS水平、卵子骨架和染色体结构。 结果 相对于IVO卵子,IVM卵子的mtDNA拷贝数显著降低;而胞质ROS生成和纺锤体及染色体结构异常率则显著增加。胞质线粒体分布模型和氧化磷酸化活性在IVM和IVO卵子间差异无显著意义。结论 非生理性IVM过程显著抑制了胞质mtDNA的复制,并增加了ROS生成和纺锤体和染色体结构异常,继而可能影响卵子细胞质的成熟进程,这可部分解释IVM卵子低发育潜能的机制。     

精子形态对年轻女性新鲜单囊胚移植助孕结局的影响

目的 探讨精子形态对年轻(≤35岁)女性行新鲜单囊胚移植助孕结局的影响.方法 回顾性分析2019年1至12月在温州医科大学附属第二医院生殖医学中心行新鲜单囊胚移植的年轻女性患者690例,根据男方精子形态正常率分为正常组157例、精子轻中度畸形组256例、精子重度畸形组277例,比较3组患者实验室结局、妊娠结局和新生儿结...     

受精方式、女方年龄、生育史和取卵数对体外异常受精的影响

目的:探讨人卵子体外受精后单原核(PN)和多原核胚胎形成的影响因素,为提高正常受精率探寻可行的方法。方法:回顾性分析1 004个IVF周期和250个ICSI周期,共计15 364个卵细胞资料,研究胚胎原核形成与体外受精方式、女方年龄、生育史、获卵数的关系。结果:①ICSI周期的1PN率明显高于IVF周期,而3PN和4PN形成率则明显低于IVF(P<0.05)。②当女方年龄>35岁时,1PN、3PN和4PN形成率均显著高于年龄≤35岁者(P<0.05);当女方年龄在28￣35岁时2PN(正常受精率)生成率最高(P<0.05),此年龄段的患者施行ICSI时3PN生成率也最高(P<0.05)。③女方无生育史的1PN形成率上明显高于有生育史患者(P<0.05)。④获取6￣10枚卵组,2PN形成率明显高于1￣5枚卵组和>20个卵组(P<0.05);而对于1PN、3PN、4PN形成率,获11￣15枚卵组明显高于其他获卵数组(P<0.05);而在获卵数>20枚时ICSI组2PN(正常受精率)生成率显著降低。结论:人体外受精正常与否受到受精方式、女方年龄、生育史和取卵数目等因素的影响,因此,在进行辅助生殖技术(ART)时应综合考虑这些因素,有助于提高正常受精率,降低异常受精率。     

卵泡抽吸获得未成熟卵母细胞经体外成熟后成功分娩一例报道

病例 患者,女,30岁,继发不孕4年,诊断为多囊卵巢综合征(PCOS),两次人工授精失败.基础内分泌检测卵泡刺激素(FSH)5.96 IU/L,黄体生成素(LH)14.82 IU/L,雌二醇(E2)106 pmol/L,泌乳素(PRL)9.44 nmol/L,睾酮0.63 nmol/L.达英35治疗一周期后检查LH为8.61 IU/L.男方精液常规示中度弱精子症,形态学检查示中度畸精子症.     

剖宫产史对体外受精-胚胎移植治疗结局的影响

目的：探讨剖宫产史对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗结局的影响。方法：回顾性分析2019年1月至2019 年12月温州医科大学附属第二医院育英儿童医院生殖中心接受IVF-ET的患者,根据患者的分娩史分为仅有阴道分娩史组（292例）和剖宫产史组（311例）,比较2组胚胎植入成功率及治疗结局等。结果：剖宫产史组的胚胎植入成功率低于仅有阴道分娩史组（P ＜0.05）。2组间的流产率、双胎率、异位妊娠率差异无统计学意义（P ＞0.05）。2组间早产、死产、出生体质量、出生缺陷、胎盘前置和产后出血等指标差异无统计学意义（P ＞0.05）。结论：剖宫产史影响了IVF-ET再妊娠的胚胎植入成功率,但剖宫产史对患者的流产率等治疗结局无明显影响。