应用逆转录聚合酶链反应鉴别呼吸道合胞病毒亚型

目的为了使鉴别呼吸道合胞病毒（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｃｙｔｉａｌｖｉｒｕｓ，ＲＳＶ）Ａ、Ｂ亚型的方法更为简单、特异、有效。方法根据ＲＳＶＧ蛋白编码基因的核苷酸序列设计一套引物，其中Ｐ１为亚型间通用的引物，Ｐ２和Ｐ３分别为Ａ、Ｂ亚型特异性引物。将这些引物用于同一逆转录聚合酶链（ＲＴＰＣＲ）反应，Ａ、Ｂ亚型株的扩增产物分别为２７７ｂｐ和８６３ｂｐ，根据ＰＣＲ产物的大小即可鉴别所测毒株的亚型。用这一方法对ＲＳＶ原型株和９株我国分离株进行亚型鉴定。结果分离株８株为Ａ亚型，１株为Ｂ亚型，分型结果与单克隆抗体检测和基因序列分析完全相符。结论ＲＴＰＣＲ方法鉴别呼吸道合胞病毒亚型具有快速、简便、敏感、特异等特点，适用于ＲＳＶ临床标本的亚型分型及流行病学研究     

合胞病毒感染后血清中抗F和G蛋白特异性IgG抗体反应

为深入了解婴幼儿呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）感染后特异性保护抗体的反应，探明ＲＳＶ感染后血清保护性抗体的类型及其相互关系；以表达呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）Ｆ和Ｇ蛋白的重组痘苗病毒为抗原，用间接免疫荧光法检测３３例ＲＳＶ感染后婴幼儿双份血清中抗ＲＳＶ的Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体反应。结果表明，１岁以内婴幼儿ＲＳＶ感染后，血清中Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体有不同程度的升高，但Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体反应明显低于Ｆ蛋白；１岁以后，机体对ＲＳＶ感染的抗Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体反应较１岁以前明显增强。说明婴幼儿ＲＳＶ感染后，机体抗ＲＳＶ的Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体反应受年龄因素的影响，尤其以Ｇ蛋白更为显著。     

我国部分地区呼吸道合胞病毒地方株磷蛋白基因序列分析

目的 了解我国呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）地方株的Ｐ（Ｐｈｏｓｐｈｏｒｐｒｏｔｅｉｎ,Ｐ）蛋白基因状况和变异特征。方法 选取不同地区具有不同流行特征的６株ＲＳＶ地方株,以提取的病毒ｍＲＮＡ为模板进行逆转录－聚合酶链扩增（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增、目的基因的克隆及序列测定分析。结果 地方株和同亚型原型株之间Ｐ蛋白核苷酸序列及推导出的氨基酸序列同源性均超过９５％;不同亚型间存在较大差异,核苷酸全序列同源性低于８５％,尤其在３′端非编码区及中间变异区。由氨基酸序列推导出的疏水性分析图显示,Ａ、Ｂ亚型中间变异区存在疏水性的不同,这为解释Ａ、Ｂ亚型间Ｐ蛋白电泳迁移率的不同提供了一种可能。结论 我国ＲＳＶ地方株与原型株之间的Ｐ蛋白无论在核苷酸水平还是在氨基酸水平均存在一定的变异。这些结果对于了解我国ＲＳＶ地方株的基因状况提供了有益的     

北京地区呼吸道合胞病毒分离株的亚型监测

北京地区呼吸道合胞病毒分离株的亚型监测邓洁耿学辉钱渊朱汝南刘成贵陈惠中黄荣妍孙晓鸥王之梁为了解北京地区呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）的亚型分布情况，我们从１９９０年１１月到１９９６年１月期间，在首都儿科研究所附属儿童医院共采集毛细支气管炎和肺炎住院患儿咽拭...     

呼吸道合胞病毒地方株SH蛋白基因序列分析

目的 :分析我国呼吸道合胞病毒 (RSV)地方株SH蛋白基因的遗传特点、变异特征。方法 :从本室保存的不同年份、不同地区、不同流行特征的呼吸道合胞病毒地方株中抽取 7株 ,分别用RT PCR扩增其SH蛋白基因并克隆到PTZ18R载体中进行了序列测定和分析。结果 :我国RSV地方株间SH蛋白基因相比较变异的部位及形式很相似 ,地方株间核苷酸全序列的同源性为 97.0 %～ 10 0 %。结论 :RSV在我国不同地区的不同流行特征与SH蛋白基因的变异无明显关系     

我国部分地区呼吸道合胞病毒分离株的亚型鉴定

为了解我国部分地区呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）的亚型分布情况，采用单克隆抗体和免疫荧光技术，对近年来从北京、广州、南京、长春、和ＲＳＶ感染爆发流行的津冀地区分离出的共１００株ＲＳＶ进行了亚型鉴定。结果：其中９７株为Ａ亚型，３株为Ｂ亚型。提示：近年来这些地区无论是南方还是北方流行的ＲＳＶ主要为Ａ亚型；津冀地区流行性喘憋性肺炎的爆发流行也与Ａ亚型有关。     

5株呼吸道合胞病毒地方株F蛋白基因序列分析

目的呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）Ｆ蛋白是ＲＳＶ感染免疫中最重要的病毒蛋白，为了解我国ＲＳＶ地方株Ｆ蛋白的基因状况和变异特征，随机选取北京、广州、长春和河北四个地区具有不同流行特征的ＲＳＶ地方株（Ａ亚型）５株，进行ＲＳＶＦ蛋白全基因的核苷酸序列分析。方法以提取的病毒ｍＲＮＡ为模板进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增、目的基因的克隆及序列测定，对地方株及原型株的序列进行比较分析。结果地方株Ｆ蛋白基因与原型株Ａ２株有很高的同源性，核苷酸全序列的同源性为９５．１％～９６．１％，氨基酸同源性为９６．７％～９７．４％。核苷酸有义突变率为２２．６％～２５．９％。３非编码区的核苷酸序列比蛋白编码区变异显著。河北地方株（Ｅ７３株）在３非编码区有６个核苷酸的插入。Ｆ２亚单位的氨基酸变异高于Ｆ１亚单位。在北京地方株（ＺＨＳ１３株）Ｆ１亚单位内，由具有中和能力单克隆抗体所识别的抗原表位区中存在一个氨基酸的变异。结论我国ＲＳＶ地方株与原型株之间的Ｆ蛋白基因尽管存在一定的变异，但仍有很高的同源性。地方株间Ｆ蛋白的核苷酸、氨基酸变异的位置及形式很相似，提示我国ＲＳＶ的不同流行特征可能并非由于Ｆ蛋白的基因变异所致。     

北京地区正常人群血清中呼吸道合胞病毒F和G蛋白…

以表达呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）Ｆ和Ｇ蛋白的重组痘苗病毒作为抗原，用间接免疫荧光法检测北京地区不同年龄组正常儿童及成人血清中ＲＳＶ Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体。其结果表明：成人及产妇静脉血中有中等滴度的ＲＳＶ抗体及较低水平的Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体。初生婴儿脐带血中的ＲＳＶ Ｆ和Ｇ蛋白ＩｇＧ抗体水平同母亲静脉血中的一致，表明属母传抗体。婴幼儿ＲＳＶ抗体水平在生后６个月内迅速降低，６个月以后抗体的滴     

应用逆转录—聚合酶链反应鉴别呼吸道合胸病毒亚型

目的 为了使鉴别呼吸道合胞病毒（ｒｅｓｐｉｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｃｙｔｉａｌ ｖｉｒｕｓ，ＲＳＶ）Ａ、Ｂ亚型的方法更为简单、特异、有效。方法 根据ＲＳＶ Ｇ蛋白编码基因的核苷酸序列设计一套引物，其中ＰＩ为亚型臆通用的引物，Ｐ２和３分别为Ａ、Ｂ亚型特异性引物。将这此引物用于同一逆转录－聚合酶链（ＲＴ－ＰＣＲ）用的引物，Ｐ２和Ｐ３分别为Ａ、Ｂ亚型株的扩增产物分别为２７７ｂｐ和８６３ｂｐ，根据ＰＣＲ产物