骨髓转化生长因子-β1与巨核细胞转化生长因子-β1Ⅲ型受体变化在特发性血小板减少性紫癜发病中的意义

目的探讨骨髓转化生长因子-β1(TGF-β1)及臣核细胞转化生长因子(TGF-β1)Ⅲ型受体(TGF-β1RⅢ)变化在特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病中的意义。方法收集急性ITP28例(AITP组)、慢性ITP16例患儿(CITP组)和20例相对正常儿童骨髓;采用Percoll密度梯度及免疫磁珠法分离骨髓巨核细胞;ABC-ELISA法检测TGF-β1水平;原位杂交法检测TGF-β1RⅢmRNA表达情况。结果AITP组与CITP组骨髓TGF-β1水平及巨核细胞TGF-β1RⅢmRNA表达均明显高于对照组(P<0.05),且CITP组明显高于AITP组(P<0.05)。结论检测ITP患儿骨髓TGF-β1水平及巨核细胞TGF-β1RⅢ表达情况对于研究ITP发病机制及早期分型有重要参考价值。     

重组人白细胞介素11对两种血小板减少症患儿骨髓巨核系祖细胞的作用

目的研究重组人白细胞介素11（recombinant human interleukin 11，rhIL-11）对慢性特发性血小板减少性紫癜（chronic idiopathic thrombocytopenic purpura，CITP）与再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA）患儿骨髓巨核系祖细胞（megakaryocyte progenitor）体外生长的影响。方法收集17例CITP患儿及14例AA患儿骨髓，对照组为骨髓检查三系造血功能正常、排除血液系统疾病儿童10例。无血清培养各组骨髓单个核细胞（mononuclear cells，MNC），培养体系中包含血小板生成素（TPO）、可溶性补体结合（SCF），IL-3，rhIL-11，或TPO，SCF，IL-3。培养第14天，用流式细胞仪测定CD41^＋细胞率，CD41结合的碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（alkaline phosphatase—anti—alkaline phosphatase，APAAP）桥联酶标技术鉴定半固体培养的巨核细胞集落形成单位（megakaryocyte colony forming unit，CFU—MK）和巨核细胞爆式集落形成单位（megakaryocyte burst forming unit，BFU—MK）。结果rhIL-11联合TPO等细胞因子，可促进对照组、CITP组CFU—MK和BFU—MK生成（P〈0．01），提高CD41^＋细胞率（P〈0．01）；但对AA组，CFU—MK和CD41^＋细胞率无明显的作用（P〉0．05）。结论rhIL-11联合TPO等细胞因子，可促进CITP患儿骨髓巨核系祖细胞在体外无血清培养条件下的增殖，提示rhIL-11具有治疗CITP的潜在价值，但对AA患儿的骨髓巨核系祖细胞生成并无明显的效果。     

体外无血清培养骨髓巨核祖细胞对ITP早期分型的临床意义

目的:探讨体外无血清培养骨髓巨核祖细胞对特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)早期分型的临床意义.方法:分别检测27例急性ITP(急性组)、14例慢性ITP(慢性组)患儿和10例骨髓检查造血功能正常、排除血液系统疾病儿童(对照组)的骨髓巨核细胞标化计数、体外无血清培养的骨髓巨核细胞集落形成单位(colony forming unit-megakaryocyte,CFU-MK)和骨髓巨核细胞爆式集落形成单位(burst forming unit-megakaryocyte,BFU-MK),并进行比较.结果:急性组骨髓巨核细胞标化计数高于对照组(P＜0.01),且CFU-MK、BFU-MK均明显高于慢性组和对照组(P＜0.05,P＜0.01);慢性组骨髓巨核细胞标化计数高于对照组(P＜0.05),CFU-MK、BFU-MK与对照组比较差异均无统计学意义(均为P＞0.05).慢性组2例BFU-MK缺如.结论:在体外无血清培养的条件下,因去除了血小板抗体的影响,急性ITP及慢性ITP患儿的骨髓巨核祖细胞均呈增生活跃,但在集落形成数量方面则出现明显差异,说明急性ITP及慢性ITP患儿的病理生理过程存在差异,因此,可应用体外无血清培养骨髓巨核祖细胞来观察BFU-MK、CFU-MK的形成差异来进行ITP的早期分型,对治疗方案的选择有重要的指导作用.     

rhIL-11诱导转录因子GATA-1和NF-E2在Dami细胞的表达

目的探讨重组人白细胞介素11（rhIL-11）对巨核细胞白血病细胞株Dami内转录因子GATA-1和NF-E2表达的调节作用。方法用rhIL-11（50ng／ml）刺激Dami细胞1、2、4h，Western blot和RT-PCR法分析rhIL-11诱导Dami细胞GATA-1、NF-E2mRNA表达水平。结果rhIL-11可诱导Dami细胞GATA-1、NF-E2mRNA表达，1h后作用下降。结论rhIL-11可能通过诱导GATA-1、NF-E2表达调控巨核细胞生成。     

骨髓TPO与TGF-β1、TGF-βRⅢ的改变及其相关性在儿童ITP发病中的意义

目的 　探讨骨髓内环境中的血小板生成素 (TPO)、转化生长因子 β1 (TGF -β1 )及巨核细胞中转化生长因子 β1 的Ⅲ型受体 (TGF -βRⅢ )在儿童特发性血小板减少性紫癜 (ITP)发病中的意义。方法 　收集 2 8例急性ITP(AITP)患儿、16例慢性ITP(CITP)患儿和 2 0例相对正常儿童的骨髓 ;用Percoll密度梯度及免疫磁珠法分离骨髓巨核细胞 ;采用双抗体夹心ABC -ELISA法检测TPO、TGF -β1 水平 ;采用原位杂交法检测TGF -βRⅢ的表达情况。结果 　①AITP组与CITP组骨髓TPO的水平均高于对照组 ,且CITP组明显高于AITP组 (P <0 .0 5 ) ,但三组之间无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;②AITP组与CITP组骨髓TGF -β1 的水平及巨核细胞TGF -βRⅢ的表达均明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,且CITP组明显高于AITP组 (P <0 .0 5 ) ,三组之间有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;③除CITP组骨髓TPO与TGF -β1 的水平呈正相关关系外 (r =0 .65 3 ,P <0 0 5 ) ,其余两组均无明显相关性 (P >0 .0 5 )。结论 　检测ITP患儿骨髓TPO、TGF -β1的水平及巨核细胞TGF -βRⅢ的表达情况对于研究ITP的发病机制以及早期分型和判断预后有重要参考价值。     

重组人白血病抑制因子体外诱导人巨核细胞白血病DAMI细胞株凋亡与P73蛋白表达

目的探讨重组人白血病抑制因子(rh-LIF)诱导人巨核细胞白血病DAMI细胞株凋亡和P73蛋白表达,探讨其作用机制。方法应用锥虫蓝拒染法、CCK-8法观察不同质量浓度(1～40μg/L)rh-LIF作用6、12、24、48h后对DAMI细胞株增殖及活力影响,用流式细胞仪测定早期凋亡指标Annexin V,免疫组织化学法检测用药前后P73蛋白表达变化。结果低质量浓度(1、2μg/L)rh-LIF对DAMI细胞增殖无明显抑制,诱导凋亡作用不明显,P73蛋白阳性表达低(P>0.05);当质量浓度>5μg/L时其作用随培养时间延长及药物质量浓度增加而增强(P<0.05)。结论低水平rh-LIF对DAMI细胞增殖无明显抑制,高水平rh-LIF抑制DAMI细胞增殖并诱导其凋亡,用药后P73蛋白阳性表达有明显增高。     

小儿胸膜肺母细胞瘤1例报道

1临床资料 患儿,女,3岁11个月,以“咳嗽伴胸闷气喘10d”为主诉于2013年1月3日入院。患儿3a前曾在外院诊断“左肺囊肿”行手术切除,术后未定期复查。10d前开始咳嗽,伴胸闷、气喘,无胸痛、咯血。     

8例郎格汉斯细胞组织细胞增生症患儿Birbeck颗粒的超微结构观察

目的探讨郎格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)病损区郎格汉斯细胞(LC)及其中Birbeck颗粒的超微结构,为研究Birbeck颗粒的来源、形态、空间结构提供依据。方法透射电镜观察8例儿童LCH患者病变区LC及Birbeck颗粒的超微结构。结果 8例LCH患儿病损区均可见典型LC,其中6例LC中可见Birbeck颗粒,大部分位于胞浆中,部分位于细胞膜内侧,与细胞膜相连续,细胞膜外也可见Birbeck颗粒样结构存在;典型Birbeck颗粒呈棒状、网球拍样,也可呈不规则形,周围常伴有圆形空泡样结构。结论 Birbeck颗粒可能起源于细胞膜,空间结构可能为不规则形,其形态具有多样性,不规则性,非典型Birbeck颗粒也具有诊断意义。     

儿童急性特发性血小板减少性紫癜与EB病毒感染的关系

目的探讨儿童急性特发性血小板减少性紫癜(AITP)与EBV感染的关系。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)测定87例AITP患儿病毒特异性抗体EBV-IgM,做骨髓巨核细胞、外周血小板以及外周血异形淋巴细胞计数,采用改良MAIPA法检测血小板特异性抗体(GPIIb/IIIa)。对照组为40例健康体检的儿童。用统计学分析软件包SPSS13.0进行统计学分析。结果 87例AITP患儿中,EBV-IgM阳性者21例,阳性率24.14%,明显高于对照组(P<0.01)。AITP患儿EBV阳性组的外周血异形淋巴细胞数、血小板抗GPIIb/IIIa抗体阳性率均明显高于EBV阴性组(P<0.01)。而AITP患儿EBV阳性组的骨髓巨核细胞数和外周血小板数与EBV阴性组相比差异无显著性(P>0.05)。结论 EBV感染确实与部分儿童AITP的发病有关。EBV感染引起ITP的机制可能与引发机体自身免疫反应有关。     

1脱-氨基-8-D精-氨酸血管加压素治疗血友病的研究进展

1-脱氨基-8-D-精氨酸血管加压素(DDAVP)是人工合成的血管加压素类药物,可提高健康人群及血友病(hemophilia)患者血浆因子Ⅷ(FⅧ)、von Willebrand因子(vWF)及组织型纤溶酶原激活物(t-PA)水平。在国外,DDAVP成功用于防治轻型血友病A(HA)、1型血管性血友病导致的出血事件,已有30多年历史。越来越多研究证实,DDAVP对女性HA携带者、已有抑制物产生的HA及获得性HA,甚至对血友病B(HB),也有一定治疗作用。DDAVP使用安全、价格低廉,尤其可降低因使用血液制品导致的人体免疫缺陷病毒(HIV)、肝炎病毒等的传播及因反复使用外源性FⅧ导致的FⅧ抑制性抗体产生的危险。因此,建议对新诊断为血友病的患者,也应进行DDAVP应答测试,以评估患者在将来防治出血性事件时使用该药的可能性和方案。