首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   4262篇
  免费   507篇
  国内免费   141篇
耳鼻咽喉   57篇
儿科学   140篇
妇产科学   69篇
基础医学   1040篇
口腔科学   64篇
临床医学   221篇
内科学   620篇
皮肤病学   107篇
神经病学   336篇
特种医学   59篇
外国民族医学   2篇
外科学   530篇
综合类   525篇
预防医学   102篇
眼科学   36篇
药学   360篇
中国医学   205篇
肿瘤学   437篇
  2023年   79篇
  2022年   94篇
  2021年   152篇
  2020年   172篇
  2019年   251篇
  2018年   284篇
  2017年   253篇
  2016年   230篇
  2015年   226篇
  2014年   291篇
  2013年   270篇
  2012年   220篇
  2011年   297篇
  2010年   207篇
  2009年   198篇
  2008年   187篇
  2007年   163篇
  2006年   167篇
  2005年   163篇
  2004年   111篇
  2003年   101篇
  2002年   71篇
  2001年   61篇
  2000年   55篇
  1999年   47篇
  1998年   34篇
  1997年   20篇
  1996年   27篇
  1995年   48篇
  1994年   22篇
  1993年   36篇
  1992年   22篇
  1991年   20篇
  1990年   13篇
  1989年   13篇
  1987年   10篇
  1986年   15篇
  1985年   25篇
  1984年   47篇
  1983年   23篇
  1982年   31篇
  1981年   21篇
  1980年   28篇
  1979年   24篇
  1978年   25篇
  1977年   15篇
  1976年   7篇
  1975年   10篇
  1974年   9篇
  1973年   6篇
排序方式: 共有4910条查询结果,搜索用时 93 毫秒
1.
目的:探究miR-145 对血管平滑肌细胞(VSMC)的生物活性及对SM22α mRNA 表达的作用。方法: VSMC分为3 组,增殖VSMC组( 增殖组)、增殖VSMC + 转染miR-145-NC 组( 空载体组)、增殖VSMC+转染 miR-145 组( 增殖转染组)。采用RT-PCR 检测VSMC中SM22α mRNA、miR-145 的表达;免疫印迹检测cyclin E、p27 蛋白水平;Transwell 小室检测VSMC侵袭能力;MTT检测VSMC活力;流式细胞术检测VSMC凋亡率。 结果:增殖组VSMC中SM22α mRNA、miR-145 水平与空载体组相比数值较为接近;与增殖组及空载体组相比, 增殖转染组VSMC中miR-145、SM22α mRNA 表达升高。增殖组VSMC中cyclin E、p27 蛋白水平与空载体组相 比无差异;增殖转染组cyclin E 蛋白水平低于空载体组、增殖组,p27 蛋白水平高于空载体组、增殖组。增殖组 VSMC迁移数量与空载体组相比无差异;增殖转染组VSMC迁移数量明显低于空载体组、增殖组。增殖组与空载 体组VSMC在不同时间点的OD 值均较为接近;增殖转染组OD 值在不同时间点均低于空载体组、增殖组。增殖 组VSMC凋亡率与空载体组数值接近,组间比较差距较小;增殖转染组VSMC凋亡率较空载体组和增殖组升高。 结论:过表达miR-145 通过促进SM22α 水平增加,抑制血管平滑肌细胞的增殖,并促进其凋亡。  相似文献   
2.
陈明武  王开宇  杨波  郑诗豪 《天津医药》2022,50(12):1246-1253
目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)OPA相互作用蛋白5反义转录本1(OIP5-AS1)对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响机制。方法 收集33例胶质瘤患者(低级别胶质瘤14例、高级别胶质瘤19例)和33例颅脑损伤患者的组织标本。实时荧光定量PCR(qPCR)检测组织和细胞中OIP5-AS1、微小RNA-942-5p(miR-942-5p)和检查点激酶1(CHEK1)mRNA表达,分析胶质瘤组织中OIP5-AS1、miR-942-5p和CHEK1 mRNA表达水平的相关性。体外培养人脑胶质瘤细胞系U87、SHG-44、U251、H4和正常人星形胶质细胞NHA,Western blot检测细胞中CHEK1蛋白表达。将U87细胞分为对照(NC)组、siRNA阴性对照(si-NC)组、OIP5-AS1 siRNA(si-OIP5-AS1)组、si-OIP5-AS1+inhibitor阴性对照(si-OIP5-AS1+anti-NC)组、si-OIP5-AS1+miR-942-5p抑制剂(si-OIP5-AS1+anti-miR-942-5p)组,采用Lipofectamine 3000试剂进行转染。转染后,qPCR和Western blot检测细胞中OIP5-AS1、miR-942-5p和CHEK1 mRNA和蛋白表达水平;MTT法测定细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。最后通过双荧光素酶和RNA免疫沉淀(RIP)实验验证OIP5-AS1和miR-942-5p以及CHEK1和miR-942-5p的相互作用。结果 OIP5-AS1和CHEK1在脑胶质瘤组织和细胞中过表达,miR-942-5p呈低表达(均P<0.05);相关分析显示,脑胶质瘤组织中OIP5-AS1与miR-942-5p的表达水平呈负相关,miR-942-5p与CHEK1 mRNA的表达水平呈负相关,CHEK1与OIP5-AS1 mRNA的表达水平呈正相关;且OIP5-AS1、CHEK1 mRNA在高级别胶质瘤组织中的表达明显高于低级别组织,而高级别胶质瘤中的miR-942-5p水平明显低于低级别组织(P<0.01)。沉默OIP5-AS1可显著上调miR-942-5p,抑制CHEK1的mRNA和蛋白表达(均P<0.05);沉默OIP5-AS1可显著抑制U87细胞增殖、迁移和侵袭,促进U87细胞凋亡(均P<0.05);下调miR-942-5p可上调CHEK1表达,阻断OIP5-AS1沉默对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响(均P<0.05)。双荧光素酶和RIP实验证实miR-942-5p是OIP5-AS1的靶基因,CHEK1是miR-942-5p的下游靶基因。结论 沉默OIP5-AS1可能通过上调miR-942-5p抑制CHEK1表达,抑制脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移,并促进细胞凋亡。  相似文献   
3.
Objective: evaluating the role of FOXO3 mRNA and mi RNA 182-5P expression levels in BC patients. Method: 25 Samples of breast cancer and paired samples of non-cancerous tissues from the same resected breast were obtained from 25 female patients suffering from breast cancer and examined and analyzed by real time PCR to detect the expression levels of FOXO3 mRNA and mi RNA 182-5P. Patients’ data were collected from patients medical records. Results: Foxo3 m RNA expression was down regulated in BC tissues (1.37± 1.96) as compared to control group (23.62 ± 54.39) and decreased FOXO3 expression was associated with larger tumor size (p= 0.046), late histopathological grading (p= 0.002), late TNM staging (<0.001) and increased miR-182 expression (p= 0.025). We found that expression level of miR-182 was significantly higher among breast cancer group (1.10±1.15) as compared to the control group (0.58±0.96 ) with p value = 0.017. We noted a significant increased expression associated with larger tumor size (p= 0.002), late histopathological grading (p= 0.008), late TNM staging (p= 0.002) and decreased FOXO3 expression (p= 0.025). A significant negative correlation between miR-182 and FOXO3 mRNA fold expression with r = - 0.447, and a p value of 0.025, this could be attributed to miRNA targeting FOXO gene. Coclusion: Down regulation of FOXO3 and up regulation of miR-182 expression was associated with advanced breast cancer. The negative correlation between miR-182 and FOXO3 mRNA could be attributed to miRNA targeting FOXO gene.  相似文献   
4.
5.
目的探讨miRNA-592在肾细胞癌(RCC)中的作用及其与预后的关系。方法逆转录-聚合酶链反应检测110例RCC组织及其配对的癌旁组织、正常人肾上皮细胞系(HK-2)和人RCC细胞系(786-O、ACHN、Caki-1和769-P)中miRNA-592的表达。分析miRNA-592与RCC临床病理特征及生存预后的关系,生存分析用Kaplan-Meier法。用LipofectAMINETM 2000试剂盒将miRNA-592沉默质粒(sh-miRNA-592组)或空载体质粒(sh-NC组)转染入786-O细胞,克隆形成实验和CCK-8法检测增殖能力,Annexin-V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹法检测细胞增殖相关蛋白(Cyclin B1、增殖细胞核抗原)和凋亡相关蛋白(Bax、Cleaved caspase-3)。结果癌组织中miRNA-592相对表达量为(2.34±0.47),明显高于癌旁组织的(0.97±0.41),HK-2细胞的miRNA-592相对表达量为(1.01±0.08),低于786-O细胞(3.84±0.47)、ACHN细胞(2.76±0.53)、Caki-1细胞(1.98±0.12)与769-P细胞(2.45±0.52),差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-592高、低表达组的T分期患者比例比较,差异有统计学意义(P<0.05)。miRNA-592高表达患者的存活率低于低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。sh-miRNA-592组miRNA-592相对表达量、细胞克隆数与细胞培养48、72和96 h时细胞增殖检测光密度值均低于sh-NC组,sh-miRNA-592组细胞凋亡率高于sh-NC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miRNA-592在RCC中的高表达与不良生存预后有关,沉默miRNA-592可抑制RCC细胞的增殖并促进凋亡。  相似文献   
6.
7.
目的 评估检测大肠肿瘤患者粪便中SEPT-9和微RNA(miRNA)-34b/c基因甲基化对大肠肿瘤筛查的临床性能。方法 采用病例对照研究方法,使用甲基化敏感性高分辨率熔解曲线法检测大肠肿瘤患者(大肠癌组35例、大肠腺瘤组47例)和正常对照人群(正常对照组52名)粪便中SEPT-9和miRNA-34b/c基因是否存在甲基化,来评估其筛查大肠肿瘤的性能。结果 大肠癌组SEPT-9和miRNA-34b/c基因的甲基化阳性率分别为68.6%、71.4%,大肠腺瘤组分别为57.4%、63.8%,正常对照组分别为9.6%、11.5%。3组的SEPT-9、miRNA-34b/c基因甲基化阳性率比较差异均有统计学意义(2SEPT-9 = 37.185,2miRNA-34b/c = 40.040,P均< 0.001),利用Bonferroni法进行两两比较,大肠癌组和大肠腺瘤组的甲基化阳性率比较差异无统计学意义,两者与正常对照组比较差异均有统计学意义(P均< 0.001)。3组联合检测SEPT-9和miRNA-34b/c基因的甲基化阳性率为88.6%、76.6%、13.5%,大肠癌组和大肠腺瘤组联合检测的甲基化阳性率均高于SEPT-9单基因检测和miRNA-34b/c单基因检测(P均< 0.05)。结论 检测粪便中SEPT-9和miRNA-34b/c基因甲基化具有效好的大肠肿瘤筛查性能,或许可作为大规模人群筛查大肠肿瘤新的生物标志物组合;多基因甲基化联合检测筛查的性能优于单基因。  相似文献   
8.
目的探讨外周血miRNA-150与CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞在儿童免疫性血小板减少症(ITP)中变化及意义。 方法选取南通大学附属妇幼保健院在2017年3月至2020年9月接受诊治的ITP患儿93例,其中新诊断ITP患儿(病程<3个月)56例,持续性ITP患儿(病程3~12个月)37例。另选取本院同期健康体检儿童50例作为对照组。采用实时荧光定量PCR反应测定外周血miRNA-150表达,采用流式细胞术测定CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞表达。 结果ITP患儿外周血miRNA-150表达高于对照组,且CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞表达率低于对照组(P<0.05)。持续性ITP组外周血miRNA-150表达高于新诊断ITP组,而CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞表达率低于新诊断ITP组(P<0.05)。全反应(CR)组外周血miRNA-150表达低于反应(R)组和无效(NR)组,且R组低于NR组(P<0.05)。CR组CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞表达率高于R组和NR组,且R组高于NR组(P<0.05)。外周血miRNA-150对ITP诊断敏感度和特异度分别为78.18%和60.53%;CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞表达对ITP诊断敏感度和特异度分别为83.63%和71.05%。miRNA-150与PLT呈负相关(r=-0.738),而CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞与PLT呈正相关(r=0.796)。 结论外周血miRNA-150在ITP患儿中高表达,而CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞在ITP患儿中低表达,且外周血miRNA-150和CD19+CD24hiCD38hiBreg细胞表达与疗效密切相关。  相似文献   
9.
《Immunobiology》2022,227(6):152283
The claudin 18.2(CLDN18.2) antigen is highly expressed in gastric mucosa epithelial cells and frequently expressed in malignant tumors. Positive clinical outcomes have popularized claudin 18.2 as a novel cellular and antibody therapeutic. Here, we designed a bispecific antibody-ZWB67 using the XFab® platform, aimed at redirecting CD3+ effector T cells to CLDN18.2+ target cells or tissues. Physicochemical characterization, binding properties, T cell stimulatory activity, and T cell-dependent cellular cytotoxicity of ZWB67 were evaluated in dosage intervals using antigens of CD3 and target cells expressing CLDN18.2 or CD3. Then, the anti-tumor activity was assessed in humanized CD3EDG mice bearing MC-38-hCLDN18.2 tumors. Our data demonstrate that ZWB67 specifically binds to the human CD3e antigen (KD = 1.04E?08 M) and binds more strongly to CLDN18.2+ cells than to CD3+ cells (4.3- to 9.2-fold difference). ZWB67 showed good activity in the luciferase reporter system and exhibited dose-dependent activation, cytotoxicity of T cells, and cytokine release when co-cultured with CLDN18.2+ cells and CD3+ T cells. ZWB67 also exhibited high in vivo efficacy in the MC-38-hCLDN18.2 xenograft mouse model. In conclusion, the novel anti-CLDN18.2 × anti-CD3 bispecific antibody exhibited low affinity for anti-CD3, highly specific binding, potent cytotoxicity, and anti-tumor activity. These data provide a basis for future preclinical and clinical development of this therapeutic strategy.  相似文献   
10.
目的:探究全反式维甲酸(ATRA)对IL-22处理后HaCaT细胞Cx43蛋白表达水平和细胞间隙连接通讯(GJIC)功能的影响,以及该过程是否与JNK通路有关,进一步阐明ATRA对GJIC功能影响的分子作用机制。方法:筛选ATRA影响IL-22处理HaCaT细胞最适处理时间;划痕标记染料示踪试验观察GJIC功能影响;免疫荧光检测ATRA和/或IL-22处理组Cx43、p-JNK、JNK表达水平的变化。结果:ATRA使HaCaT细胞的GJIC功能呈处理时间依赖性上升。ATRA作用于IL-22诱导HaCaT细胞后, Cx43蛋白表达水平增加, GJIC功能上调,p-JNK表达无明显变化。结论:ATRA可抑制IL-22介导的Cx43表达减少和GJIC下调作用,这一过程与JNK通路无关。  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号