HAP1基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

[目的]研究HAP1基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及作用机制.[方法]取对数生长期已构建好的MDA-MB-23 1/HAP1和MDA-MB-231/Pb稳转细胞株(5×106),接种于5周龄BALB/C雄性裸鼠左腹股沟部皮下,建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,21d裸鼠皮下肿瘤长径到达0.6～0.9cm时,分为4组(n=5):MDA-MB-231/Pb组,MDA-MB-231/HAP1组,MDA-MB-231/Pb+放射组和MDA-MB-231/HAP1+放射组.放射组在第21d给予5Gy X线照射一次后继续饲养3周左右.期间每隔4d测量1次肿瘤的长径及短径,计算肿瘤体积.第6周时处死各组裸鼠统计瘤重.免疫组织化学方法分析Cleaved-caspase-3和Cleaved-caspase-9表达,TUNEL分析细胞凋亡.[结果]MDA-MB-231/HAP1+放射组裸鼠肿瘤生长明显迟缓,平均体积小于其他3组(P均＜0.01),MDA-MB-231/HAP1+放射组平均瘤重明显小于其他3组(P均＜0.01).TUNEL凋亡实验结果表明,MDA-MB-231/Pb组细胞平均凋亡率为3.27％ ±1.51％,MDA-MB-231/HAP1组为36.77％ ±3.78％,MDA-MB-231/Pb+放射组为46.27％±2.98％,MDA-MB-231/HAP1+放射组为83.07％±0.21％,MDA-MB-231/HAP1+放射组凋亡率明显高于其他3组(P＜0.05).免疫组织化学染色评分结果显示,MDA-MB-231/Pb组,MDA-MB-23 1/HAP1组,MDA-MB-231/Pb+放射组,MDA-MB-231/HAP1+放射组中凋亡蛋白Cleaved-caspase-3平均积分分别为1.67±0.47,6.00±1.63,7.00±1.41和14.67±1.89,凋亡蛋白Cleaved-caspase-9平均积分分别为2.00±0.82,4.67±0.94,5.33±0.94和11.00±1.41;Cleavedcaspase 3和cleaved-caspase 9在MDA-MB-231/HAP11+放射组中的水平明显高于其他3组(P＜0.05).[结论] HAP1基因可能通过调控肿瘤细胞的凋亡来增强人乳腺癌细胞对放射治疗的敏感性.