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1.
目的观察机械牵张力(SS)是否通过激活PKCδ诱导小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移,并进一步探究小檗碱(BBR)对其的影响及作用机制。方法体外常规培养小鼠VSMC分为6组:阴性对照组(NC)、小檗碱组(BBR)、PKCδ抑制剂Sotrastaurin组(Sotras)、SS组、SS+BBR组和SS+Sotras组。静息培养的VSMC分别用BBR或Sotrastaurin或ddH2O预处理1 h,继而机械牵张力(10%牵张强度)牵拉不同时间或不牵拉作为对照。收集各组VSMC,Western blot检测PKCδ磷酸化水平;免疫荧光法检测VSMC增殖;细胞划痕实验检测VSMC迁移。结果免疫荧光和细胞划痕实验结果显示,与阴性对照组相比,机械牵张力刺激显著提高VSMC中Ki67阳性水平约469%(P<0.05,n=3),划痕宽度缩小约54.9%(P<0.05,n=3),而BBR和Sotrastaurin能明显抑制机械牵张力引起的上述变化,与SS组相比,Ki67阳性水平分别下降约66.9%和80.2%(P<0.05,n=3),划痕宽度增加约79.4%和120.1%(P<0.05,n=3);Western blot结果显示,与阴性对照组相比,机械牵张力刺激可诱导PKCδ磷酸化水平呈时间依赖性升高,以30 min最显著,提升约97.5%(P<0.05,n=3);而BBR可呈浓度依赖性抑制机械牵张力刺激诱导的PKCδ磷酸化水平升高,以200μmol/L效果最显著,降低约37.6%(P<0.05,n=3)。结论BBR可通过抑制PKCδ磷酸化进而阻断机械牵张力诱导的VSMC增殖和迁移。  相似文献   
2.
目的:探究miR-145 对血管平滑肌细胞(VSMC)的生物活性及对SM22α mRNA 表达的作用。方法: VSMC分为3 组,增殖VSMC组( 增殖组)、增殖VSMC + 转染miR-145-NC 组( 空载体组)、增殖VSMC+转染 miR-145 组( 增殖转染组)。采用RT-PCR 检测VSMC中SM22α mRNA、miR-145 的表达;免疫印迹检测cyclin E、p27 蛋白水平;Transwell 小室检测VSMC侵袭能力;MTT检测VSMC活力;流式细胞术检测VSMC凋亡率。 结果:增殖组VSMC中SM22α mRNA、miR-145 水平与空载体组相比数值较为接近;与增殖组及空载体组相比, 增殖转染组VSMC中miR-145、SM22α mRNA 表达升高。增殖组VSMC中cyclin E、p27 蛋白水平与空载体组相 比无差异;增殖转染组cyclin E 蛋白水平低于空载体组、增殖组,p27 蛋白水平高于空载体组、增殖组。增殖组 VSMC迁移数量与空载体组相比无差异;增殖转染组VSMC迁移数量明显低于空载体组、增殖组。增殖组与空载 体组VSMC在不同时间点的OD 值均较为接近;增殖转染组OD 值在不同时间点均低于空载体组、增殖组。增殖 组VSMC凋亡率与空载体组数值接近,组间比较差距较小;增殖转染组VSMC凋亡率较空载体组和增殖组升高。 结论:过表达miR-145 通过促进SM22α 水平增加,抑制血管平滑肌细胞的增殖,并促进其凋亡。  相似文献   
3.
目的: 探讨丹酚酸B(Salvianolic acid B,SAB)改善高磷诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的作用及机制。方法: 采用大鼠血管平滑肌细胞(A7r5)钙化体外模型,用细胞增殖与活性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测SAB对细胞活力的影响;2.6 μmol·g-1高磷诱导VSMCs钙化,加入丹参多酚酸类化合物丹酚酸B、丹酚酸C(Salvianolic acid C,SAC)、迷迭香酸(Rosmarinic acid,RA)及细胞自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA,5 nmol·g-1),采用邻甲酚酞络合铜法及茜素红S染色检测细胞钙化程度;Western blot检测VSMCs钙化指标Runx2、OPN,自噬相关蛋白Beclin-1和LC3II/LC3I以及平滑肌收缩表型蛋白Calponin、SM22α的表达。结果: (1)钙离子浓度定量实验及茜素红染色实验显示SAB显著减轻高磷诱导的VSMCs钙化;(2)SAB浓度小于100 nmol·g-1以下时对VSMCs生存活力无明显影响,选择3,10,30 nmol·g-1剂量进行后续实验;Western blot显示SAB明显降低VSMCs成骨样分化的分子标志物Runx2、OPN蛋白表达(P<0.05),上调自噬标志物Beclin-1、LC3-I/II及VSMCs收缩表型标志物Calponin、SM22蛋白表达(P<0.05)。(3)SAB减轻高磷诱导VSMCs钙化的作用被自噬抑制剂3-MA阻断。结论: SAB可通过激活自噬抑制VSMCs钙化及向成骨样表型转化。  相似文献   
4.
5.
目的探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)联合血红蛋白(hemoglobin,Hb)水平预测子宫肌瘤并子宫腺肌症发生的价值。 方法回顾性分析行子宫切除术治疗的子宫良性病变患者167例的临床资料,根据组织病理学诊断结果分为单纯子宫肌瘤(对照组)95例和子宫肌瘤并子宫腺肌症(观察组)72例。检测患者外周血中性粒细胞计数(neutrophil count,NEUT)、淋巴细胞计数(lymphocyte count,LY)、Hb水平等血常规指标,并计算NLR。比较2组临床资料和生化指标。采用多因素Logistics回归分析子宫肌瘤并子宫腺肌症发生的影响因素,绘制受试者工作特征曲线评估外周血NLR、Hb水平对子宫肌瘤并子宫腺肌症发生的预测价值。 结果观察组糖尿病史患者比例、流产史患者比例、血清人附睾蛋白4(human epididymis protein 4,HE4)、糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)含量、外周血NLR高于对照组,外周血LY、Hb水平均低于对照组(P<0.05)。多因素Logistic分析结果显示,血清HE4含量、血清CA125含量、外周血NLR、外周血Hb水平是影响子宫肌瘤并子宫腺肌症发生的危险因素(OR=1.579、5.726、3.669、1.833);NLR、Hb水平、NLR联合Hb水平预测子宫肌瘤并子宫腺肌症发生的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.759(95%CI:0.681~0.836)、0.776(95%CI:0.700~0.852)、0.849(95%CI:0.786~0.913);NLR联合Hb水平预测子宫肌瘤并子宫腺肌症发生的AUC大于单独NLR、Hb水平(P<0.05)。 结论外周血NLR、Hb水平是子宫肌瘤并子宫腺肌症发生的危险因素,可以作为子宫肌瘤并子宫腺肌症早期筛查和诊断的参考指标。  相似文献   
6.
病例资料患者,男,16岁,左上肢疼痛、活动受限4月余,加重1周,夜间痛为主。查体:患者体型消瘦,左肩背部及关节间隙后方局部肿块隆起,局部压痛,边界不清,质中,活动度差,肩关节各向活动受限,邻近皮肤无色素沉着。MRI示左侧肩胛骨及关节盂见膨胀性骨质破坏,并可见不规则软组织肿块形成,边界不清,信号不均匀,呈长T;、长/短T;异常信号,并可见液-液平面,范围约10.1cm×8.6cm×7.7cm,肿块与肩胛下肌、冈下肌分界不清(图1~4),增强扫描可见不均匀明显强化(图5~7)。左腋窝及左侧锁骨上窝可见多发增大淋巴结影。左肩关节周围软组织见大片状稍长T;、稍长T;信号影。MRI疑诊为毛细血管扩张型骨肉瘤。CT示左侧肩胛骨及关节盂见膨胀性骨质破坏,周围软组织肿块形成;左侧肱骨头骨质未见异常,左侧肩关节尚在位(图8)。  相似文献   
7.
8.
9.
10.
目的:探讨去除尼古丁和焦油的香烟烟雾提取物(fCSE)与抗氧化剂对阴茎平滑肌细胞缝隙连接蛋白Cx43表达及勃起功能的影响。方法:选30只SD雄性大鼠,随机分为3组:对照组(每日皮下注射PBS)、fCSE组(每日皮下注射fCSE)及fCSE+还原型谷胱甘肽(GSH)组(每日皮下注射fCSE+GSH)。8周后通过皮下注射脱水吗啡刺激后观察大鼠发生勃起的比例及次数;光镜下观察大鼠阴茎海绵体组织结构变化;利用激光共聚焦扫描显微镜观察阴茎海绵体平滑肌Cx43的表达。结果:fCSE组与对照组相比,大鼠阴茎勃起次数和勃起率显著下降(P<0.01),对照组与fCSE+GSH组无显著性差异(P>0.05);光镜下fCSE组较对照组平滑肌排列稍紊乱,血窦扩张,但未充血,纤维结缔组织较多,CSE+GSH组与对照组无明显差别;对照组和fCSE+GSH组Cx43密度分别达(65.00±5.57)%和(63.00±4.21)%,两者之间无统计学意义;fCSE组Cx43密度达(32.00±3.45)%,与对照组和fCSE+GSH组差异显著。结论:去除尼古丁和焦油的香烟烟雾提取物导致阴茎勃起功能下降,平滑肌Cx43密度下降,其机制可能是对连接蛋白造成了氧化应激损伤,影响到平滑肌细胞的增殖和迁移,进而影响到了勃起功能。  相似文献   
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