靶向Tim-3药物研发进展

肿瘤微环境可诱导一些免疫检查点分子的高表达,以利于肿瘤细胞逃避免疫系统的识别和攻击.目前基于程序性死亡受体1(programmed cell death protein 1,PD-1)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(cytotoxic T-lymphocyte associated protein 4,CTLA-4)以及T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(T-cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 3,Tim-3)等免疫检查点分子的靶向抗体药物研发已经取得了极大的进展,其中多种靶向PD-1和CTLA-4的抗体药物已被美国食品药品监督管理局(Food andDrug Administration,FDA)批准上市,虽然有部分患者经以上药物治疗后出现完全缓解或生存期延长,但尚存在较多患者出现耐药或没有缓解病情的状况.最新的研究发现,靶向PD-1治疗的耐药患者Tim-3表达上调,Tim-3也被认为是潜在的新一代肿瘤治疗靶点,Tim-3与PD-1的靶向联合治疗有可能成为研究的热点.现就国内外靶向Tim-3药物的研究现状做一综述.     

信号转导及转录激活因子家族分子在巨噬细胞极化调控中的作用研究进展

巨噬细胞在调控炎症及免疫反应,维持免疫稳态中发挥关键的作用.不同微环境条件下,巨噬细胞功能出现异质性.其可以极化为经典活化(M1)或替代活化(M2)两种不同的极化类型,分别发挥促炎或抑炎的功能.众所周知,许多调控分子参与了巨噬细胞的极化调控过程.在众多的极化调控分子中,信号转导及转录激活因子(Stats)家族是一类最主要的调控分子.Stats家族有7个成员,即Stat1、Stat2、Stat3、Stat4、Stat5a、Stat5b和Stat6.它们结构相似,但功能不同.目前已经明确,Stats分子在机体炎症应答中发挥重要的作用,调控着巨噬细胞的极化进程.     

Foxp3,Galectin-9,PD-L1在小鼠DC2.4细胞的表达

目的观察CD80,CD86,Foxp3,Galectin-9,PD-L1在小鼠DC细胞的表达,了解小鼠DC2.4细胞系的免疫学特性。方法用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液培养小鼠DC2.4细胞,光学显微镜观察细胞形态;流式细胞术检测CD80,CD86,Foxp3,Galectin-9,PD-L1在DC2.4细胞表达。结果光学显微镜示小鼠DC2.4细胞贴壁生长,呈树突、梭形及不规则形;流式细胞术检测DC2.4细胞CD80表达为91.04%±4.90%,CD86表达为98.54%±1.96%,Foxp3无或微表达,Galectin-9表达为14.33%±2.94%,PD-L1表达为98.80%±0.63%。结论小鼠DC2.4细胞是一个高表达CD80,CD86及PD-L1,低表达Galectin-9,无或微表达Foxp3的细胞系。     

滤泡辅助性T细胞（TFH）在炎性肠病中的表达研究

目的观察新型CD4＋T辅助细胞亚群-滤泡辅助性T细胞（T follicular helper cells,TFH）在炎性肠病（inflammatory bowel diseases,IBD）中的表达,探究其在IBD发病中的作用及机制。方法用饮用葡聚硫酸钠（dex-tran sulfate sodium,DSS）的方法建立IBD动物模型,密度梯度离心法分离小鼠脾淋巴细胞,采用不同荧光素标记的CD4I、COS、CD40L、CXCR5抗体进行流式细胞染色,分析上述TFH的表面标记在DSS诱导IBD（DSS-IBD）模型中的变化;同时提取淋巴细胞RNA,用实时定量PCR检测TFH的特异性转录因子Bcl-6和效应分子IL-21的表达变化。结果与结论与对照组相比,DSS-IBD模型动物CD4＋ICOS＋,CD4＋CD40L＋,CD4＋CXCR5＋T细胞的比例,以及Bcl-6和IL-21在mRNA表达水平均显著下降,显示TFH亚群的功能调节失常可能是该类IBD的重要发病机制之一。     

Tim-3在调控IFI44表达及影响H1N1感染中的作用研究

目的探讨Tim-3信号影响免疫细胞抗感染作用的机制。方法通过基因芯片筛选及体内外验证的方法探讨Tim-3对IFI44(一种抗感染关键效应分子)表达的影响,并结合H1N1感染模型对其意义进行评价。结果在巨噬细胞上敲低Tim-3表达或通过Tim-3融合蛋白阻断Tim-3信号,均能显著提高IFI44的表达,而在Tim-3高表达的巨噬细胞中IFI44的表达受到明显抑制。在整体水平上检测Tim-3信号对IFI44表达的影响发现,给予受H1N1病毒感染小鼠腹腔注射s Tim-3蛋白能显著提高小鼠体内IFI44的表达进而降低H1N1病毒载量。结论 Tim-3在抑制抗病毒感染效应分子IFI44表达中发挥关键作用;部分解释了Tim-3调控抗感染免疫的机制,也为防治H1N1等病毒的感染提供了新的思路。     

小剂量抗CD3单克隆抗体有效逆转新发的I型糖尿病

目的 验证抗CD3单克隆抗体治疗自身免疫病如I型糖尿病的可行性,并对机理进行初步探讨.方法 以I型糖尿病动物模型-非肥胖性糖尿病 (nonobese diabetic, NOD) 小鼠为研究对象,将新发病的小鼠随机分为治疗组和对照组,分别给予抗CD3抗体和对照抗体,剂量均为5 μg/d×5 d,监测血糖观察糖尿病的逆转情况.结果 经短期小剂量CD3单抗治疗,到第9周时,75%的小鼠的血糖恢复至正常.维持时间超过30周,胰岛形态亦得到了明显改善.CD3单抗的这种效应并不是由于清除T细胞引起免疫抑制所致,而是诱导产生了胰岛β细胞特异性的免疫耐受.结论 小剂量抗CD3单克隆抗体治疗可有效逆转新发的Ⅰ型糖尿病.     

跨膜型CD59分子的构建及其在小鼠NIH3T3和EL-4细胞表达的研究

应用ＲＴ－ＰＣＲ方法,从Ｕ９３７细胞总ＲＮＡ中扩增得到编码人ＣＤ４６分子跨膜区和膜内区ｃＤＮＡ片段,用ＰＣＲ方法扩增得到编码成熟的ＣＤ５９胞外区蛋白的ｃＤＮＡ片段,连接并构建了跨膜型的ＣＤ５９分子ｃＤＮＡ。快速克隆于ｐＧＥＭ－Ｔ Ｅａｓｙ载体进行序列测定,证实了其阅读框的完整和序列的正确性。     

大剂量甲基强的松龙冲击疗法治疗多发性肌炎的临床体会(附3例临床报告)

多发性肌炎(PM),是一种病因不明,发生于横纹肌的自身免疫性炎症性疾病。其治疗多予以糖皮质激素、免疫抑制剂、环孢菌素或采用全身放疗、血浆置换等方法,但以肾上腺皮质激素治疗为首选。我们收治3例均以大剂量的甲基强的松龙冲击疗法治疗,获得良好疗效,报告如下。1　临床资料　　Bobam多发性肌炎的诊断标准[1]:1对称性四肢近端肌无力,呈进行性加重,明显肌力下降及肌肉萎缩;2血清酶谱(CPK、LDH、AST、ALP)明显增高;3肌电图呈肌源性改变;4肌肉病理活检:呈肌炎症性改变。本文3例均符合上述标准,并除外肿瘤、结缔组织及其它胶原性疾病。其…