miR-21通过靶基因ZNF326调控乳腺癌细胞侵袭、迁移的分子机制研究

目的:探讨微小RNA-21（miR-21）靶向锌指蛋白326(ZNF326)对乳腺癌细胞侵袭、迁移的影响及其分子机制。方法:采用qRT-PCR与Western blot法检测乳腺癌细胞株HCC70、MDA-MB-231、BT549、MDA-MB-468与正常细胞株HBL-100中miR-21与ZNF326的表达。以miR-21表达量最高的乳腺癌HCC70细胞为研究对象，分为NC组、anti-miR-con组、anti-miR-21组、pcDNA-control组、pcDNA-ZNF326组；共转染分组为anti-miR-21+si-con组、anti-miR-21+si-ZNF326组。MTT法检测细胞增殖能力，Transwell迁移及侵袭实验检测细胞迁移及侵袭能力。双荧光素酶报告基因系统验证miR-21与ZNF326的靶向调控关系。Western blot法检测CDK1、MMP-2蛋白的表达。结果:与正常细胞株HBL-100相比，乳腺癌细胞株HCC70、MDA-MB-231、BT549、MDA-MB-468中miR-21高表达，ZNF326 mRNA及蛋白表达水平均显著下降；分别与anti-miR-con组、pcDNA-control组比较，anti-miR-21组与pcDNA-ZNF326组HCC70细胞增殖能力显著下降，细胞迁移及侵袭能力明显降低，CDK1、MMP-2的表达水平明显降低；双荧光素酶实验结果表明miR-21能靶向结合ZNF326的3' UTR并调控其表达；与anti-miR-21+si-con组相比，anti-miR-21+si-ZNF326组HCC70细胞增殖、迁移及侵袭能力均明显增强，促进CDK1、MMP-2表达。结论:miR-21可靶向抑制ZNF326基因的表达，进而促进乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭。     

乳腺浸润性导管癌组织中ALDH1+/CD133+干细胞样细胞与血管生成的关系

目的 探讨乳腺浸润性导管癌组织中肿瘤干细胞标志物ALDH1、CD133的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法 应用免疫组织化学双染法检测120例乳腺浸润性导管癌组织中ALDH1⁺/CD133⁺ 干细胞样细胞,单染法检测血管性标记CD34、CD105及VEGF的表达情况。统计ALPH1⁺/CD133⁺干细胞样细胞与临床病理因素;CD34、CD105与VEGF的关系。结果 25.83％（31/120）的病例存在ALDH1⁺/CD133⁺干细胞样细胞,ALDH1⁺/CD133⁺干细胞样细胞与ER、VEGF的表达及MVD均相关（P＜0.05）,但与年龄、肿瘤直径、PR、Her-2、组织学分级及淋巴结转移均无关（P＞0.05）。结论 乳腺浸润性导管癌组织中ALDH1⁺/CD133⁺干细胞样细胞可能通过调节VEGF的表达促进肿瘤新生血管的生成。     

大黄酸对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其机制

目的：探讨大黄酸对非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并阐明其机制。方法：将NSCLC A549细胞分为对照组和低、中及高剂量大黄酸组,采用不含大黄酸的培养基和含有质量浓度为5、10和20 μmol·L^-1大黄酸的培养基分别培养细胞24、48和72 h。采用MTT法检测各组A549细胞增殖率,流式细胞术检测A549细胞凋亡率以及不同细胞周期A549细胞百分比,Western blotting法检测各组A549细胞中半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）、半胱氨酸蛋白酶9（Caspase-9）、细胞色素C（Cyt-C）和凋亡诱导因子（AIF）蛋白表达水平,划痕实验和Transwell实验检测各组A549细胞迁移和侵袭能力。结果：大黄酸处理24h后,与对照组比较,低、中和高剂量大黄酸组A549细胞增殖率明显降低（P<0.05）,细胞迁移距离明显减少,侵袭细胞数量明显减少;中和高剂量大黄酸组A549细胞凋亡率明显升高（P<0.05）;高剂量大黄酸组G₁期细胞百分比明显降低（P<0.05）。大黄酸处理48 h后,与对照组比较,中和高剂量大黄酸组A549细胞中Caspase-3、Caspase-9、Cyt-C和AIF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：大黄酸可抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能与上调Caspase-3、Caspase-9、Cyt-C和AIF蛋白表达有关。     

宫颈鳞状细胞癌组织中Bmi-1的表达

目的:探讨宫颈鳞状细胞癌组织中Bmi-1的表达及意义。方法:分别采用免疫组化SP法和原位杂交法检测宫颈鳞状细胞癌(84例)和慢性宫颈炎(20例)组织中Bmi-1蛋白和mRNA的表达情况,并分析其表达与宫颈鳞状细胞癌临床病理特征之间的关系。结果:宫颈鳞状细胞癌组织中Bmi-1蛋白及mRNA的阳性表达率分别为71.4%和58.3%,高于其在慢性宫颈炎组织中的阳性表达率(5.0%和10.0%)(χ2=29.394和15.100,P均<0.001);且Bmi-1蛋白和mRNA在宫颈鳞状细胞癌组织中的阳性表达与临床分期、淋巴结转移有关(χ2=18.088、20.000和16.622、28.476,P均<0.001),而与肿瘤分化程度无关(P>0.05)。Bmi-1蛋白及mRNA在宫颈鳞状细胞癌中的表达呈正相关(rP=0.305,P=0.003)。结论:Bmi-1可能成为判断宫颈癌生物学行为的可靠的生物学指标。     

miR-124-3p.1靶向PRDM2调节JAK/STAT通路对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

摘 要：［目的］ 研究miR-124-3p.1对胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。［方法］ 运用qRT-PCR法检测组织和细胞中miR-124-3p.1、PR结构域蛋白2(PRDM2)的表达;将miR-124-3p.1 mimics、miR-NC、anti-miR-124-3p.1 mimics、anti-miR-NC用脂质体法转染PANC-1细胞;Western blot检测细胞中PRDM2、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达;MTT法检测细胞增殖。［结果］ 与人正常胰腺组织细胞相比,胰腺癌组织细胞中PRDM2表达显著性升高,miR-124-3p.1表达显著性降低（P<0.05）;PRDM2为miR-124-3p.1的靶标。过表达miR-124-3p.1可抑制胰腺癌细胞增殖、促进凋亡、抑制JAK/STAT通路。［结论］ miR-124-3p.1可抑制胰腺癌细胞增殖和促进凋亡,可能与靶向PRDM2和抑制JAK/STAT通路有关。